本文關(guān)鍵詞：人乳頭瘤病毒16型E2蛋白表達、純化及抗血清制備

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【摘要】：目的表達人乳頭瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白,并制備小鼠抗HPV16 E2血清。方法采用PCR技術(shù)擴增HPV16E2基因,構(gòu)建入pET21b載體,重組表達載體pET21b-HPV16E2經(jīng)鑒定后轉(zhuǎn)化大腸埃希菌BL21(DE3),誘導表達并鑒定表達產(chǎn)物。經(jīng)純化、變性和復性方法,制備可溶性HPV16 E2蛋白。免疫BALB/c小鼠制備抗血清,檢測小鼠IFN-γ、CD4~+T細胞、CD8~+T細胞、CD4/CD8比值和抗血清滴度變化。結(jié)果酶切和測序結(jié)果表明pET21b-HPV16 E2構(gòu)建成功。表達蛋白相對分子質(zhì)量(M_r)為42 000,Western blot法證明具有較高特異性。小鼠抗血清效價升高,CD4~+T細胞數(shù)量和CD4/CD8比值升高,小鼠IFN-γ無升高。結(jié)論成功制備可溶性HPV16 E2蛋白和小鼠抗HPV16 E2高效價的抗血清。
【作者單位】： 哈爾濱醫(yī)科大學微生物學教研室黑龍江省感染與免疫重點實驗室;哈爾濱醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)學院婦科;哈爾濱醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院婦科;
【關(guān)鍵詞】： 人乳頭瘤病毒型 E蛋白 表達 抗血清
【基金】：國家自然科學基金(81000726,30901706) 黑龍江省留學歸國基金(LC2009C26)
【分類號】：R373.9
【正文快照】： 人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPY)目前分為100多型,根據(jù)感染部位分為皮膚型(P乳頭瘤病毒)和黏膜型(a乳頭瘤病毒)。黏膜型HPV被分為低危型和高危型。高危型HPV主要引起宮頸癌,還與乳腺癌、支氣管癌、頭頸鱗癌、喉癌和肛周生殖 器癌發(fā)生有關(guān),其中,HPV16型是最普遍的型別

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