本文關鍵詞：金黃色葡萄球菌VBNC狀態(tài)的誘導條件和EMA-qPCR檢測

  更多相關文章： 金黃色葡萄球菌 活的非可培養(yǎng)狀態(tài) 誘導條件 疊氮溴乙錠 qPCR

【摘要】：為建立金黃色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)活的非可培養(yǎng)(VBNC)狀態(tài)的誘導條件模型,考察了溫度、鹽度和酸度3個因素對金黃色葡萄球菌細菌可培養(yǎng)數(shù)的影響,通過正交試驗優(yōu)化得到了VBNC狀態(tài)的誘導條件,同時觀察細菌可培養(yǎng)數(shù)的變化,建立了DNA結合染料疊氮溴乙錠(EMA)與qPCR技術相結合檢測VBNC金黃色葡萄球菌的方法.實驗結果表明:細菌可培養(yǎng)數(shù)受酸度的影響最大,VBNC狀態(tài)的最佳誘導條件為菌液在含15%NaCl和0.3%乙酸的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中于4℃下培養(yǎng)12 d;通過正交試驗誘導后的不可培養(yǎng)菌可由EMA-qPCR方法有效檢出,其與qPCR法的Ct值(熒光信號達到設定的閾值所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù))之差在1.29～8.56之間變化.
【作者單位】： 華南理工大學輕工與食品學院;
【關鍵詞】： 金黃色葡萄球菌 活的非可培養(yǎng)狀態(tài) 誘導條件 疊氮溴乙錠 qPCR
【基金】：國家自然科學基金青年科學基金資助項目(31101279) 教育部高等學校博士學科點專項科研基金新教師類資助課題(20110172120034) 華南理工大學中央高校基本科研業(yè)務費專項資金資助項目(2011ZM0101) 廣東省天然產物綠色加工與產品安全重點實驗室開放課題(201101)
【分類號】：R378
【正文快照】： 金黃色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus,簡稱SA)是一種常見的高致病性革蘭氏陽性菌,傳播途徑較多,對人類的安全構成了威脅.食品中的SA在一定情況下可以產生腸毒素,從而導致食物中毒.由SA引起的食品安全問題廣泛存在[1],因此,對SA進行檢測十分重要,而檢測的關鍵是食品中活菌是

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 魯梅芳;金玉妍;;金黃色葡萄球菌活的非可培養(yǎng)狀態(tài)的誘導和檢出[J];環(huán)境與健康雜志;2009年10期

2 魯玉俠;郭祀遠;石磊;李琳;;EMA-LAMP方法快速檢測死/活的食源性沙門氏菌[J];食品科學;2009年22期

3 李影;段銳;錢愛東;王偉利;;“活的非可培養(yǎng)狀態(tài)”細菌熒光觀察方法[J];生物技術;2010年03期

4 張嚴峻,張俊彥,梅玲玲,王志剛,朱敏,王贊信;金黃色葡萄球菌腸毒素基因的分型和分布[J];中國衛(wèi)生檢驗雜志;2005年06期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 葉云;鐘英英;;PCR法檢測水中金黃色葡萄球菌腸毒素A基因[J];安徽農業(yè)科學;2008年26期

2 王營;于宏偉;郭潤芳;賈英民;;金黃色葡萄球菌腸毒素基因分布的研究[J];河北農業(yè)大學學報;2010年05期

3 姜毓君;李一松;相麗;畢宇涵;趙鳳;;RT-PCR檢測金黃色葡萄球菌腸毒素A基因[J];東北農業(yè)大學學報;2009年02期

4 閆軍;遇曉杰;蘇華;張劍峰;謝平會;薛成玉;董銳;高飛;;原料乳中金黃色葡萄球菌風險評估基礎研究[J];中國公共衛(wèi)生管理;2010年01期

5 高世光;郝陶光;;丹東口岸出口食品中金黃色葡萄球菌及腸毒素檢測分析[J];中國國境衛(wèi)生檢疫雜志;2010年03期

6 蘇明權;楊柳;馬越云;常亮;肖鳳靜;郝曉柯;;實時熒光定量PCR檢測金黃色葡萄球菌方法的試驗研究[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2010年08期

7 王麗;王冰;黎桂蓮;林一曼;賀連華;石曉路;吳平芳;陳妙玲;;金黃色葡萄球菌腸毒素快速分型體系的建立及應用[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2012年02期

8 陸貞玉;;食品中金黃色葡萄球菌及其檢測方法現(xiàn)況[J];應用預防醫(yī)學;2010年S1期

9 史紅;王娟;鄭增忍;單虎;王述柏;李玉清;黃秀梅;劉開成;韓艷;張鵬;;金黃色葡萄球菌耐藥性及腸毒素分型研究[J];動物醫(yī)學進展;2012年06期

10 許振偉;韓奕奕;孟瑾;鄭小平;鄒明輝;;熟食肉制品中金黃色葡萄球菌風險評估基礎研究[J];包裝與食品機械;2012年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張穎;莫自耀;龐杏林;鄧志愛;張欣強;陳守義;王鳴;;一起食物中毒事件的金黃色葡萄球菌分子分型研究[A];2010廣東省預防醫(yī)學會學術年會資料匯編[C];2010年

2 何永盛;;食品中有害微生物快速檢測技術的研究進展[A];2010第二屆中國食品安全高峰論壇論文集[C];2010年

3 唐吉思;吳金花;布日額;張海寶;薛曉陽;劉洋;;內蒙古牛乳中產腸毒素A型金黃色葡萄球菌的分離與鑒定[A];第3屆全國人畜共患病學術研討會論文集[C];2011年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 祝儒剛;海產品中致病性副溶血弧菌PCR快速檢測體系建立及定量研究[D];沈陽農業(yè)大學;2011年

2 馬保臣;奶牛乳腺炎病因學和金黃色葡萄球菌的分子調查及Fnbp蛋白免疫[D];山東農業(yè)大學;2006年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 羅晶晶;斑點叉尾洶生魚片加工過程中的微生物變化[D];華中農業(yè)大學;2010年

2 丁嵐;產金黃色葡萄球菌腸毒素A工程菌構建及其發(fā)酵條件研究[D];華中農業(yè)大學;2010年

3 呂亞楠;VBNC單核增生性李斯特桿菌mRNA抑制性消減雜交差異基因的克隆與分析[D];吉林農業(yè)大學;2011年

4 蘇培成;功能化納米粒子的制備及其在毒素快速檢測中的應用研究[D];湖南師范大學;2011年

5 趙明君;海洋弧菌復蘇促進因子家族糖蛋白酶的研究[D];中國海洋大學;2011年

6 王靜思;新型葡萄球菌腸毒素SEG、SEU的表達及結構功能分析[D];天津大學;2010年

7 凌巍;金黃色葡萄球菌的分布及其腸毒素基因的研究[D];河北農業(yè)大學;2007年

8 索玉娟;食品中金黃色葡萄球菌的分布及其腸毒素基因的研究[D];河北農業(yè)大學;2008年

9 段鴻斌;乳中金黃色葡萄球菌B型腸毒素的酶聯(lián)免疫檢測[D];西北農林科技大學;2008年

10 閆軍;原料乳中金黃色葡萄球菌的風險評估[D];東北農業(yè)大學;2008年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 高濤;食品中金黃色葡萄球菌腸毒素及檢測方法的研究進展[J];福建分析測試;2003年02期

2 魏忠彬;李影;錢愛東;段銳;;VBNC狀態(tài)乳酸桿菌的復蘇[J];中國飼料;2006年18期

3 吳慧清 ,吳清平 ,張菊梅 ,馬永;生物發(fā)光檢測法和國標法檢測樣品中活菌總數(shù)的比較研究[J];食品工業(yè)科技;2004年04期

4 曾冰冰;肖凱軍;石磊;肖如武;;LAMP方法在食品微生物檢測中的應用[J];現(xiàn)代食品與藥品雜志;2007年01期

5 李沂軒,紀巖文;吖啶橙染色方法檢查線索細胞[J];中國皮膚性病學雜志;2005年11期

6 李影;王偉利;錢愛東;;畜產品相關食源性致病菌“活的非可培養(yǎng)狀態(tài)”的檢測策略[J];中國動物檢疫;2009年01期

7 李影;魏忠彬;錢愛東;段銳;;乳酸桿菌活的非可培養(yǎng)狀態(tài)誘導條件的篩選與熒光觀察[J];中國獸醫(yī)科學;2008年10期

8 孫曉媛;李影;;細菌的“VBNC”狀態(tài)在開發(fā)未可培養(yǎng)微生物中的探索[J];中國預防獸醫(yī)學報;2008年12期

9 孫曉媛;錢愛東;李影;;三株沙門氏菌VBNC狀態(tài)誘導條件的篩選[J];中國預防獸醫(yī)學報;2009年03期

10 陳欣;張雅蓮;孫永華;甄然;于東寧;;我院耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的耐藥性及腸毒素分析[J];中華整形燒傷外科雜志;1997年05期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馮理達,包桂文,錢菊卿,李素英;氣功“外氣”對革蘭氏陽性球菌作用情況觀察[J];自然雜志;1982年09期

2 王秀梅;人體多形核白細胞對金黃色葡萄球菌粘附和吞入的動力學同時檢測[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;1985年06期

3 陳小英;馮瑞山;陳知本;;金黃色葡萄球菌抗生素耐藥質粒DNA的抽提及檢測[J];中國藥科大學學報;1985年02期

4 王松森;;教學中常用的一種實驗細菌——葡萄球菌[J];生物學通報;1993年01期

5 張杏怡,何禮賢,胡必杰,李錫瑩;耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的耐藥性研究[J];中華醫(yī)院感染學雜志;1996年02期

6 裴建武;甘孟侯;;雞源金黃色葡萄球菌耐藥性轉移的研究[J];中國獸醫(yī)雜志;1996年04期

7 李菁華,王東輝,關顯智,周密;金黃色葡萄球菌耐藥性(R)質粒的鑒定[J];白求恩醫(yī)科大學學報;1997年03期

8 林燕英,梁軍,楊明學,黃永茂;金黃色葡萄球菌β-內酰胺酶測定及藥敏分析[J];瀘州醫(yī)學院學報;1997年01期

9 溫建新;奶牛乳腺炎金黃色葡萄球菌血清型的分離鑒定[J];中國奶牛;2000年02期

10 周婭,趙忠,趙舒斌,王寧萍;金黃色葡萄球菌耐藥表型檢測[J];寧夏醫(yī)學雜志;2000年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 丁曉飛;郝莉;李冰燕;張增利;;1,25(OH)_2D_3對巨噬細胞吞噬金黃色葡萄球菌過程的影響[A];中國營養(yǎng)學會第十屆微量元素營養(yǎng)學術會議論文摘要匯編[C];2009年

2 王金鳳;;金黃色葡萄球菌酶的折疊、動態(tài)特性與功能——多維核磁共振研究[A];中國生物化學與分子生物學會第八屆會員代表大會暨全國學術會議論文摘要集[C];2001年

3 余雁;易智彪;梁逸曾;;代謝組學中細胞破碎方法的研究[A];中國化學會第二十五屆學術年會論文摘要集（下冊）[C];2006年

4 馬保臣;柴同杰;秦卓明;董玉蘭;;乳腺炎金葡菌腸毒素和休克綜合征毒素-1研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會2006學術年會論文集（上冊）[C];2006年

5 胡楊波;王瑤;張勇;戴岳;楊寶玉;陳士云;;QS信號分子調控對金黃色葡萄球菌生物膜形成的影響[A];2006中國微生物學會第九次全國會員代表大會暨學術年會論文摘要集[C];2006年

6 崔玉東;馬金柱;張晶;朱戰(zhàn)波;樸范澤;;S．aureus IsdB基因克隆和蛋白表達及免疫原性研究[A];第二屆全國人畜共患病學術研討會論文集[C];2008年

7 于維麟;朱元祺;;金黃色葡萄球菌腸毒素B的基因克隆及原核表達[A];中華醫(yī)學會第七次全國檢驗醫(yī)學學術會議資料匯編[C];2008年

8 邱t焑，

本文編號：679490