本文關鍵詞：鳥結核分枝桿菌感染巨噬細胞后的外泌體刺激巨噬細胞產(chǎn)生的細胞因子及其蛋白質表達改變

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【摘要】：目的探討鳥結核分枝桿菌(M.avium)感染巨噬細胞后分泌的外泌體[(+)外泌體]刺激巨噬細胞后產(chǎn)生的分子免疫機制及其差異蛋白質成分研究。方法冷凍高速離心法收集經(jīng)鳥分枝結核桿菌感染及未感染的巨噬細胞上清中的外泌體,然后利用外泌體刺激巨噬細胞;ELISA方法檢測經(jīng)外泌體刺激巨噬細胞后細胞上清中IFN-γ、TNF-α的含量;流式細胞術從蛋白水平檢測巨噬細胞受外泌體刺激后CD80、CD86蛋白表達情況;2-DE MALDI-TOF/TOF MS技術分析鑒定巨噬細胞受M.avium感染后分泌的外泌體中的差異蛋白。結果 IFN-γ、TNF-α在(+)外泌體刺激巨噬細胞后培養(yǎng)上清中含量增加;CD80、CD86蛋白在巨噬細胞受(+)外泌體刺激后表達上調。外泌體經(jīng)2-DE MALDI TOF/TOF MS分析獲得18個差異蛋白,且質譜成功鑒定12個。結論 (+)外泌體促進巨噬細胞TNF-α、IFN-γ的分泌從而增強巨噬細胞的炎癥反應,并且可促進巨噬細胞CD80、CD86蛋白表達增強;篩選出差異蛋白的功能與細胞骨架結構、蛋白質合成與加工,炎癥反應密切相關。
【作者單位】： 中南大學生物科學與技術學院分子生物學研究中心;江蘇省昆山市第一人民醫(yī)院;湖南省結核病防治所;中南大學生物科學與技術學院生物實驗室;
【關鍵詞】： 巨噬細胞 外泌體 M.avium -DE MALDI-TOF/TOFMS
【基金】：國家自然科學基金(81071326) 湖南省杰出青年基金(04JJ1006)
【分類號】：R392.11
【正文快照】： 外泌體(exosome)是由晚期內體(endosome)形成并分泌到胞外的一種膜性小囊泡[1]。抗原提呈細胞(antigen-presenting cell,APC),如B淋巴細胞和樹突狀細胞都能分泌外泌體,在機體免疫中發(fā)揮有效的免疫刺激作用,刺激T淋巴細胞增殖引起免疫應答[2]。外泌體含有豐富蛋白成分如MHC-Ⅰ

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