本文關(guān)鍵詞：鳥(niǎo)結(jié)核分枝桿菌感染巨噬細(xì)胞后的外泌體刺激巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子及其蛋白質(zhì)表達(dá)改變

  更多相關(guān)文章： 巨噬細(xì)胞 外泌體 M.avium -DE MALDI-TOF/TOFMS

【摘要】：目的探討鳥(niǎo)結(jié)核分枝桿菌(M.avium)感染巨噬細(xì)胞后分泌的外泌體[(+)外泌體]刺激巨噬細(xì)胞后產(chǎn)生的分子免疫機(jī)制及其差異蛋白質(zhì)成分研究。方法冷凍高速離心法收集經(jīng)鳥(niǎo)分枝結(jié)核桿菌感染及未感染的巨噬細(xì)胞上清中的外泌體,然后利用外泌體刺激巨噬細(xì)胞;ELISA方法檢測(cè)經(jīng)外泌體刺激巨噬細(xì)胞后細(xì)胞上清中IFN-γ、TNF-α的含量;流式細(xì)胞術(shù)從蛋白水平檢測(cè)巨噬細(xì)胞受外泌體刺激后CD80、CD86蛋白表達(dá)情況;2-DE MALDI-TOF/TOF MS技術(shù)分析鑒定巨噬細(xì)胞受M.avium感染后分泌的外泌體中的差異蛋白。結(jié)果 IFN-γ、TNF-α在(+)外泌體刺激巨噬細(xì)胞后培養(yǎng)上清中含量增加;CD80、CD86蛋白在巨噬細(xì)胞受(+)外泌體刺激后表達(dá)上調(diào)。外泌體經(jīng)2-DE MALDI TOF/TOF MS分析獲得18個(gè)差異蛋白,且質(zhì)譜成功鑒定12個(gè)。結(jié)論 (+)外泌體促進(jìn)巨噬細(xì)胞TNF-α、IFN-γ的分泌從而增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的炎癥反應(yīng),并且可促進(jìn)巨噬細(xì)胞CD80、CD86蛋白表達(dá)增強(qiáng);篩選出差異蛋白的功能與細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)、蛋白質(zhì)合成與加工,炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。
【作者單位】： 中南大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院分子生物學(xué)研究中心;江蘇省昆山市第一人民醫(yī)院;湖南省結(jié)核病防治所;中南大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院生物實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 巨噬細(xì)胞 外泌體 M.avium -DE MALDI-TOF/TOFMS
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81071326) 湖南省杰出青年基金(04JJ1006)
【分類號(hào)】：R392.11
【正文快照】： 外泌體(exosome)是由晚期內(nèi)體(endosome)形成并分泌到胞外的一種膜性小囊泡[1]�？乖岢始�(xì)胞(antigen-presenting cell,APC),如B淋巴細(xì)胞和樹(shù)突狀細(xì)胞都能分泌外泌體,在機(jī)體免疫中發(fā)揮有效的免疫刺激作用,刺激T淋巴細(xì)胞增殖引起免疫應(yīng)答[2]。外泌體含有豐富蛋白成分如MHC-Ⅰ

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本文編號(hào)：679041