本文關(guān)鍵詞：炎性刺激因子對(duì)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖作用的研究

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【摘要】：目的觀察不同濃度的LPS、NNK對(duì)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)增殖以及對(duì)細(xì)胞蛋白NF-κB、CUGBP1表達(dá)的影響。方法體外分離、純化、擴(kuò)增同種小鼠BMSCs,MTT法檢測(cè)炎性刺激因子在不同濃度時(shí)對(duì)小鼠BMSCs增殖的影響;免疫細(xì)胞化學(xué)染色定位檢測(cè)NF-κB和CUGBP1在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)和分布;Western blot定量檢測(cè)細(xì)胞蛋白NF-κB和CUGBP1的表達(dá)。結(jié)果MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,不同濃度的LPS、NNK和LPS聯(lián)合NNK均能促進(jìn)小鼠BMSCs的增殖,其中LPS12.5μg/ml、NNK10μg/ml、LPS12.5μg/ml聯(lián)合NNK10μg/ml組對(duì)小鼠BMSCs增殖的促進(jìn)作用最為明顯;免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果可見(jiàn)在相同濃度刺激因子孵育不同時(shí)間的條件下BMSCs細(xì)胞蛋白NF-κB和CUGBP1在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的位置不同,在LPS48小時(shí)組中,NF-κB幾乎在所有的細(xì)胞核中成陽(yáng)性表達(dá),但在LPS24小時(shí)組和LPS96小時(shí)組中NF-κB在細(xì)胞核表達(dá)較少,主要表達(dá)與細(xì)胞質(zhì)中。當(dāng)經(jīng)過(guò)LPS孵育后,CUGBP1在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中呈陽(yáng)性表達(dá),在一些細(xì)胞中主要表達(dá)于細(xì)胞核中。NF-κB在NNK48小時(shí)組的細(xì)胞中主要表達(dá)于細(xì)胞核中,在NNK24小時(shí)組和NNK96小時(shí)組主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)中。在NNK24小時(shí)組中,CUGBP1主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)中,但在NNK48小時(shí)組和NNK96小時(shí)組中CUGBP1主要表達(dá)于細(xì)胞核中。在LPS聯(lián)合NNK組內(nèi),在24小時(shí)組和96小時(shí)組中,NF-κB在細(xì)胞核中的表達(dá)顯著高于48小時(shí)組。在24小時(shí)組中,CUGBP1陽(yáng)性細(xì)胞核數(shù)量明顯高于48小時(shí)和96小時(shí);Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)NF-κB最高表達(dá)量分別出現(xiàn)在LPS48h,NNK24h和LPS聯(lián)合NNK24h,CUGBP1最高表達(dá)量分別出現(xiàn)在LPS96h,NNK48h和LPS聯(lián)合NNK24h。結(jié)論炎性刺激因子可能通過(guò)激活NF-κB并上調(diào)CUGBP1在細(xì)胞中的表達(dá)促進(jìn)BMSCs的增殖。
【關(guān)鍵詞】：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 細(xì)胞增殖 NF-κB CUGBP1
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 摘要2-4
• Abstract4-7
• 引言7-9
• 第一章 實(shí)驗(yàn)材料9-14
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物9
• 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器9-13
• 1.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑一覽表9-11
• 1.2.2 主要試劑配制11-13
• 1.3 實(shí)驗(yàn)儀器一覽表13-14
• 第二章 實(shí)驗(yàn)方法14-19
• 2.1 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和擴(kuò)增14
• 2.2 LPS和NNK對(duì)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖的影響14-15
• 2.3 各細(xì)胞內(nèi)NF-κB、CUGBP1蛋白表達(dá)和分布15-16
• 2.3.1 免疫細(xì)胞化學(xué)染色15-16
• 2.3.2 免疫細(xì)胞化學(xué)染色照片分析16
• 2.4 各細(xì)胞蛋白NF-κB、CUGBP1的表達(dá)量16-18
• 2.4.1 細(xì)胞蛋白提取16
• 2.4.2 蛋白濃度測(cè)定16-17
• 2.4.3 聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE)17-18
• 2.5 抗菌多肽對(duì) LPS 生物活性的影響18
• 2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析18-19
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果19-26
• 3.1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)19
• 3.2 炎性刺激因子對(duì)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖的影響19-20
• 3.3 LPS、NNK和LPS聯(lián)合NNK對(duì)NF-κB和CUGBP1在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)特點(diǎn)的影響20-22
• 3.3.1 LPS孵育NF-κB和CUGBP1蛋白細(xì)胞內(nèi)表達(dá)和分布特點(diǎn)的影響20-21
• 3.3.2 NNK孵育NF-κB和CUGBP1在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)和分布特點(diǎn)的影響21
• 3.3.3 LPS聯(lián)合NNK孵育NF-κB和CUGBP1在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)和分布特點(diǎn)的影響21-22
• 3.4 LPS、NNK和LPS聯(lián)合NNK孵育對(duì)小鼠BMSCs NF-κB和CUGBP1蛋白表達(dá)量的影響22
• 3.5 抗菌多肽對(duì) LPS 生物活性的影響22-26
• 第四章 實(shí)驗(yàn)分析與討論26-29
• 結(jié)論29-30
• 縮略詞表30-31
• 參考文獻(xiàn)31-35
• 綜述35-55
• 綜述的參考文獻(xiàn)44-55
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果55-56
• 致謝56-58

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

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本文編號(hào)：674137