本文關鍵詞：富氫水對小鼠UUO模型腎纖維化的作用及機制研究

  更多相關文章： 富氫水 UUO α-SMA 富氫水 Sirt-1 TGF-β1 腎纖維化

【摘要】：第一部分富氫水對小鼠UUO模型腎纖維化的作用目的:研究富氫水對小鼠UUO模型腎纖維化的保護作用。方法:通過結扎balb/c小鼠右側輸尿管建立單側輸尿管梗阻(Unilateral Ureteral Obstruction,UUO)模型。將小鼠隨機分為正常組(Normal)、假手術組(Sham)、UUO組及UUO富氫水處理組(UUO+HW)。術后第10天檢測小鼠血肌酐(Scr)及尿素氮(BUN);腎組織H.E.染色,觀察其纖維化改變;免疫組化檢測腎組織α-SMA表達水平;Western-blot檢測各組腎組織原漿中α-SMA改變。結果:血生化結果表明,Normal組和Sham組之間Scr和BUN水平無明顯差異,UUO組Scr和BUN水平明顯高于Normal組及Sham組(P0.05),HW+UUO組BUN水平則明顯低于UUO組(P0.05),Scr水平也變現(xiàn)出一定程度的降低(P0.1)。H.E.染色結果發(fā)現(xiàn),Normal組與Sham組顯微鏡下腎小球、腎間質(zhì)并無明顯變化,而UUO組中,小鼠腎間質(zhì)纖維化及腎小球損傷明顯,HW+UUO組中,間質(zhì)纖維化及腎小球損傷程度較UUO組有所減輕。免疫組織化學染色發(fā)現(xiàn)UUO組α-SMA大量表達于腎間質(zhì)及腎小球基底膜,而HW+UUO組中腎間質(zhì)只有較少部分出現(xiàn)染色,部分腎小球基底膜有染色。Western-blot結果顯示,Normal組和Sham組小鼠腎組織原漿中α-SMA表達無明顯差異,UUO組α-SMA水平顯著高于Normal組(P0.05),UUO+HW組α-SMA水平較UUO降低明顯(P0.05),較Normal組升高無統(tǒng)計學意義(P0.05)結論:富氫水可減輕小鼠UUO模型腎纖維化程度。第二部分富氫水抑制腎纖維化的作用機制目的:研究富氫水是否通過調(diào)控Sirt-1,發(fā)揮抗腎纖維化的作用,并探索富氫水對經(jīng)典TGF-β1/Smad2通路的影響。方法:將HK-2細胞分為正常組(Control),富氫水處理組(HW),TGF-β1組,TGF-β1+富氫水處理組(HW+TGF-β1),抑制劑組(HW+TGF-β1+Sirtinol),Western-blot檢測各組中α-SMA、Fibronectin、E-cadherin、Smad2、Sirt-1的表達。并在HW+TGF-β1組使用Sirt-1的抑制劑,觀察此時腎纖維化標志物α-SMA、Fibronectin、E-cadherin表達,以進一步探究富氫水發(fā)揮作用的機制。結果:Western-blot結果顯示:HW+TGF-β1組中,α-SMA及Fibronectin表達較TGF-β1組顯著降低(α-SMA P0.05;Fibronectin,P0.05),E-cadherin表達較TGF-β1組有明顯提高(P0.05)。HW組與Control組相比,Sirt-1表達差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。TGF-β1組中,Sirt-1表達較HW+TGF-β1組(P0.05)及Control組(P0.05)顯著降低。HW+TGF-β1組中,Sirt-1表達略低于Control組,但無統(tǒng)計學意義(P0.05)。HW+TGF-β1+Sirtinol組中,E-cadherin表達與HW+TGF-β1組相比顯著降低(P0.05),較TGF-β1組無明顯差異(P0.05),。對經(jīng)典的TGF-β1/Smad2通路進行檢測時發(fā)現(xiàn),HW+TGF-β1組與TGF-β1組中Smad2的表達無明顯差異(P0.05)。結論:富氫水通過Sirt-1抑制HK-2細胞纖維化,暫無證據(jù)表明富氫水通過經(jīng)典TGF-β1/Smad2通路發(fā)揮抗腎纖維化作用。
【關鍵詞】：富氫水 UUO α-SMA 富氫水 Sirt-1 TGF-β1 腎纖維化
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R692;R-332
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 前言10-13
• 第一部分 富氫水對小鼠UUO模型腎纖維化的影響13-24
• 材料與方法13-17
• 結果17-21
• 討論21-23
• 結論23-24
• 第二部分 富氫水抑制腎纖維化的作用機制24-45
• 材料與方法24-35
• 結果35-40
• 討論40-44
• 結論44-45
• 參考文獻45-49
• 綜述49-56
• 參考文獻52-56
• 攻讀學位期間公開發(fā)表的論文56-57
• 致謝57-58

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本文編號：673571