本文關(guān)鍵詞：免疫調(diào)節(jié)因子TIPE2慢病毒載體的構(gòu)建及病毒包裝

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【摘要】：目的:TIPE2[Tumor necrosis factor(TNF)-αinduced protein 8-like 2(TNFAIP8L2),TIPE2]慢病毒載體的構(gòu)建及病毒包裝。方法:首先構(gòu)建帶有3×FLAG標(biāo)簽的pCDNA3.1-3×FLAG-TIPE2質(zhì)粒,確認(rèn)表達(dá)后再將標(biāo)簽連同TIPE2序列一起克隆入pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro慢病毒表達(dá)載體,然后與pMD2.G、psPAX2共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞并收獲上清,進(jìn)一步用含病毒顆粒的上清感染PLC/PRF/5及HEK293T細(xì)胞,Western blot檢測(cè)感染后TIPE2蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:pCDNA3.1-3×FLAGTIPE2及pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro-TIPE2質(zhì)粒構(gòu)建成功,并能最終產(chǎn)出具有感染性的病毒顆粒。結(jié)論:成功構(gòu)建了TIPE2慢病毒載體并獲得具有感染性的病毒顆粒,為進(jìn)一步研究TIPE2功能提供了有力的支持。
【作者單位】： 河南大學(xué)醫(yī)學(xué)院抗體藥物河南省工程實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 免疫調(diào)節(jié)因子 TIPE 慢病毒 病毒包裝
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助(30972687)
【分類號(hào)】：R392-3
【正文快照】： TIPE2[Tumor necrosis factor(TNF)-αinducedprotein 8-like 2(TNFAIP8L2)]是近年被鑒定出來的新型免疫調(diào)節(jié)因子,隸屬于TNFAIP8家族,具有維持機(jī)體免疫自穩(wěn)的功能[1]。在老鼠體內(nèi),TIPE2主要表達(dá)于淋巴系統(tǒng)或炎癥組織,可通過抑制TCR(T細(xì)胞受體)及TLR(Toll-like receptor)通路來

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