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免疫調(diào)節(jié)因子TIPE2慢病毒載體的構(gòu)建及病毒包裝

發(fā)布時間:2017-08-09 04:01

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【摘要】:目的:TIPE2[Tumor necrosis factor(TNF)-αinduced protein 8-like 2(TNFAIP8L2),TIPE2]慢病毒載體的構(gòu)建及病毒包裝。方法:首先構(gòu)建帶有3×FLAG標簽的pCDNA3.1-3×FLAG-TIPE2質(zhì)粒,確認表達后再將標簽連同TIPE2序列一起克隆入pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro慢病毒表達載體,然后與pMD2.G、psPAX2共轉(zhuǎn)染293T細胞并收獲上清,進一步用含病毒顆粒的上清感染PLC/PRF/5及HEK293T細胞,Western blot檢測感染后TIPE2蛋白表達情況。結(jié)果:pCDNA3.1-3×FLAGTIPE2及pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro-TIPE2質(zhì)粒構(gòu)建成功,并能最終產(chǎn)出具有感染性的病毒顆粒。結(jié)論:成功構(gòu)建了TIPE2慢病毒載體并獲得具有感染性的病毒顆粒,為進一步研究TIPE2功能提供了有力的支持。
【作者單位】: 河南大學醫(yī)學院抗體藥物河南省工程實驗室;
【關(guān)鍵詞】免疫調(diào)節(jié)因子 TIPE 慢病毒 病毒包裝
【基金】:國家自然科學基金資助(30972687)
【分類號】:R392-3
【正文快照】: TIPE2[Tumor necrosis factor(TNF)-αinducedprotein 8-like 2(TNFAIP8L2)]是近年被鑒定出來的新型免疫調(diào)節(jié)因子,隸屬于TNFAIP8家族,具有維持機體免疫自穩(wěn)的功能[1]。在老鼠體內(nèi),TIPE2主要表達于淋巴系統(tǒng)或炎癥組織,可通過抑制TCR(T細胞受體)及TLR(Toll-like receptor)通路來

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本文編號:643372

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