本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用抑制性消減雜交篩選志賀菌基因轉(zhuǎn)移耐多藥相關(guān)基因

  更多相關(guān)文章： 志賀菌 基因轉(zhuǎn)移 耐多藥相關(guān)基因

【摘要】：目的:應(yīng)用抑制性消減雜交技術(shù)初步篩選志賀菌基因轉(zhuǎn)移耐多藥相關(guān)基因。方法:以志賀菌基因轉(zhuǎn)移耐多藥株DNA為檢測(cè)子,以其敏感株DNA為驅(qū)趕子,構(gòu)建DNA消減文庫(kù),采用PCR鑒定及斑點(diǎn)雜交進(jìn)行篩選,并隨機(jī)挑取陽(yáng)性克隆測(cè)序,所得結(jié)果在GenBank中進(jìn)行同源性比較和分析。結(jié)果:成功構(gòu)建了志賀菌基因轉(zhuǎn)移耐多藥株的特異性DNA消減雜交文庫(kù)。選取部分陽(yáng)性克隆進(jìn)行雜交篩選,其中5個(gè)測(cè)序成功,與GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行初步比對(duì),3個(gè)可能為新基因,2個(gè)為已知基因(Tn3926轉(zhuǎn)座子部分的轉(zhuǎn)座酶基因及23SrRNA核糖體核糖核酸)。結(jié)論:成功構(gòu)建了志賀菌基因轉(zhuǎn)移耐多藥株的特異性DNA消減雜交文庫(kù)并獲得了其耐多藥相關(guān)基因,提示轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的耐藥機(jī)制可能在志賀菌基因轉(zhuǎn)移耐多藥中起重要作用。
【作者單位】： 鄭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院流行病學(xué)教研室;河南科技大學(xué)醫(yī)學(xué)院預(yù)防醫(yī)學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 志賀菌 基因轉(zhuǎn)移 耐多藥相關(guān)基因
【基金】：河南省醫(yī)學(xué)科技攻關(guān)基金資助項(xiàng)目WKJ2007-2-024
【分類(lèi)號(hào)】：R378
【正文快照】： 近年來(lái),隨著抗生素的廣泛應(yīng)用甚至濫用,志賀菌菌株頻繁發(fā)生變異,產(chǎn)生耐藥株,且耐藥率高、耐藥產(chǎn)生速度快及范圍廣[1-2],給細(xì)菌性痢疾的防治帶來(lái)新的挑戰(zhàn),因此深入探討志賀菌耐多藥機(jī)制成為目前解決志賀菌耐多藥的先決條件。該實(shí)驗(yàn)采用差異表達(dá)基因克隆技術(shù)抑制性消減雜交[3],

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本文編號(hào)：639571