評價環(huán)境雄激素類化合物重組Lac Z報告基因酵母細胞的建立
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更多相關(guān)文章: 酵母細胞 雄激素受體 雄性內(nèi)分泌干擾物
【摘要】:目的建立環(huán)境雄激素內(nèi)分泌干擾物酵母評價體系。方法以載體雙表達的方式構(gòu)建該重組基因酵母細胞。在表達載體中,用3-磷酸甘油醛脫氫酶(GPD)啟動子驅(qū)動雄激素受體基因(AR)的表達,并使其與V5抗原表位相融合;在報告載體中,用雄激素效應(yīng)元件(ERE)調(diào)控的Lac Z作為報告基因。將兩者轉(zhuǎn)化于酵母細胞(W303-1A)中,構(gòu)建成雄激素調(diào)控的重組Lac Z基因酵母細胞。用不同濃度的雄激素[去氫表雄酮(DHT)和丙酸睪酮(TP)]和雌激素(雌二醇、雌三醇、雌酮、二乙基已烯雌酚和乙炔基雌二醇),對重組基因酵母細胞分別進行敏感度和特異度研究。結(jié)果去氫表雄酮和丙酸睪酮與該重組基因酵母細胞有明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系,說明其具有良好的特異度,而與雌二醇、雌三醇、雌酮、二乙基已烯雌酚和乙炔基雌二醇5種雌激素化合物均無明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系,說明其具有較強的特異性。結(jié)論該重組基因酵母細胞可用于對環(huán)境雄激素類化合物的篩選。
【作者單位】: 揚州大學(xué)醫(yī)學(xué)院預(yù)防醫(yī)學(xué)教研室;揚州大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 酵母細胞 雄激素受體 雄性內(nèi)分泌干擾物
【基金】:江蘇省環(huán)境監(jiān)測科研基金(0714) 2011年江蘇省大學(xué)生實踐創(chuàng)新訓(xùn)練計劃(批準號B11129) 揚州大學(xué)2011年度大學(xué)生學(xué)術(shù)科技創(chuàng)新基金(33)
【分類號】:R392.12
【正文快照】: 環(huán)境內(nèi)分泌干擾物(environmental endocrine dis-ruptor,EED)中有一大類是具有雄激素樣活性,多數(shù)可與雄激素受體(androgen receptor,AR)結(jié)合發(fā)揮效應(yīng)。除對生物體產(chǎn)生生殖危害外[1],還會對免疫系統(tǒng)產(chǎn)生危害。自身免疫性疾病是臨床上常見的疾病,發(fā)病因素不僅決定于外環(huán)境多因
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