本文關(guān)鍵詞：鼠病毒MHV68研究新探

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【摘要】：鼠病毒MHV68(Murine Herpesvirus 68)隸屬γ皰疹病毒。γ皰疹病毒與惡性腫瘤的發(fā)生密切相關(guān),如EBV(Epstein-Barr virus)與鼻咽癌和Burkitt's淋巴瘤;KSHV(Kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus)則是引起卡波氏肉瘤(Kaposi’s sarcoma,KS)的直接病因,它的基因組幾乎可在所有卡波氏肉瘤中被檢出。EBV及KSHV極少能感染靈長(zhǎng)類以外的物種;目前也沒有適合這兩種病毒感染和復(fù)制的細(xì)胞模型,因此尋找一個(gè)替代的研究模型顯得十分必要。MHV68恰好符合這個(gè)研究模型的要求:MHV68的基因組中約78%的開放閱讀框與KSHV和EBV同源,且能感染實(shí)驗(yàn)小鼠,在體外能感染多種細(xì)胞,包括各種哺乳動(dòng)物的上皮細(xì)胞系和成纖維細(xì)胞系。近年來,斑馬魚作為一種重要的模式生物得到了廣泛的應(yīng)用,特別是在胚胎發(fā)育機(jī)制及各種人類疾病的研究中。相比于小鼠,斑馬魚在科學(xué)研究中又有許多獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),比如成本低、對(duì)人體和環(huán)境無害、容易獲得、易于在實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)和繁殖、子代多等。然而,目前尚未有采用斑馬魚研究MHV68的報(bào)道。本研究采用斑馬魚受精卵、ZF4細(xì)胞、IKKα敲除的MEF(Mouse Embryonic Fibroblast)細(xì)胞(MEF/IKKα-/-),乳倉鼠腎細(xì)胞(BHK cells,Baby Hamster Syrian Kidney)作為感染對(duì)象,得到一系列實(shí)驗(yàn)結(jié)果,具體研究?jī)?nèi)容和研究結(jié)果如下:1、斑馬魚受精卵被MHV68感染后,出現(xiàn)了胚胎發(fā)育延遲的現(xiàn)象。感染過的斑馬魚受精卵發(fā)育成熟后,提取基因組DNA,在其中檢測(cè)到了MHV68的基因片段。在胚胎發(fā)育各階段,用Q-PCR檢測(cè)了發(fā)育相關(guān)基因和免疫相關(guān)基因的表達(dá)變化,發(fā)現(xiàn)僅有轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(Transforming growth factorβ1,TGFβ1)在實(shí)驗(yàn)組(感染了MHV68的斑馬魚受精卵)中的表達(dá)比對(duì)照組低,而其它發(fā)育及免疫相關(guān)基因:FGF3、IFNθ1、IFNθ3、ISG15、TNFα,以及細(xì)胞質(zhì)病毒DNA感受因子:DDX41、DHX9、cGAS和MAVS在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中沒有明顯區(qū)別。2、IKKα敲除的MEF細(xì)胞被MHV68感染后,通過比較,其病毒噬斑大小都要小于其他細(xì)胞,包括MEF/IKKα-/-/IKKα等,可以得出結(jié)論:IKKα有助于MHV68感染MEF細(xì)胞。3、BHK細(xì)胞用青魚I型干擾素a(bcIFNa)處理后,用MHV68感染發(fā)現(xiàn):300微升bcIFNa預(yù)處理的BHK細(xì)胞中產(chǎn)生的病毒噬斑數(shù)量要比用100微升bc IFNa處理和對(duì)照處理的少,由此可以得出結(jié)論:青魚干擾素有助于BHK細(xì)胞抵抗MHV68的感染。
【關(guān)鍵詞】：MHV68 斑馬魚 青魚干擾素a
【學(xué)位授予單位】：湖南師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R373.11
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-10
• 第一章 前言10-19
• 1.1 鼠γ皰疹病毒 68(MHV68):研究γ皰疹病毒感染的模型10-12
• 1.1.1 KSHV病毒簡(jiǎn)介10-11
• 1.1.2 MHV68簡(jiǎn)介11-12
• 1.2 斑馬魚作為模式生物優(yōu)勢(shì)12-14
• 1.2.1 有關(guān)斑馬魚胚胎發(fā)育的研究12-13
• 1.2.2 斑馬魚在天然免疫中的研究13-14
• 1.3 RLR信號(hào)通路中IKKA的相關(guān)研究14-16
• 1.4 魚類干擾素研究進(jìn)展和青魚干擾素16-19
• 第二章 實(shí)驗(yàn)材料和方法19-28
• 2.1 MHV68在斑馬魚中的研究19-23
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料19
• 2.1.2 主要儀器19
• 2.1.3 試劑19-20
• 2.1.4 實(shí)驗(yàn)方法20-23
• 2.2 MHV68在MEF細(xì)胞中的研究23-24
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料23
• 2.2.2 主要儀器23
• 2.2.3 試劑23
• 2.2.4 實(shí)驗(yàn)方法23-24
• 2.3 MHV68與青魚I型干擾素A（BCIFNA）的研究24-28
• 2.3.1 實(shí)驗(yàn)材料24
• 2.3.2 主要儀器24
• 2.3.3 試劑24-25
• 2.3.4 實(shí)驗(yàn)方法25-28
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-40
• 3.1 MHV68延遲了斑馬魚早期胚胎發(fā)育28-31
• 3.2 MHV68的基因可以在被感染的斑馬魚胚胎中被檢測(cè)到31-33
• 3.3 MHV68引起斑馬魚胚胎和ZF4細(xì)胞中相關(guān)因子表達(dá)的變化33-36
• 3.4 MHV68在MEF細(xì)胞的成斑大小36-37
• 3.5 青魚I型干擾素A有助于BHK細(xì)胞抵御MHV68病毒37-40
• 第四章 討論40-42
• 參考文獻(xiàn)42-46
• 附錄46-47
• 致謝47-48

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周炳;趙美蓉;黃海鳳;;4種農(nóng)藥對(duì)斑馬魚胚胎的毒理研究[J];浙江工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2008年02期

2 ;法國(guó)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)斑馬魚造血干細(xì)胞生成機(jī)理[J];廣西科學(xué)院學(xué)報(bào);2010年01期

3 陳粉麗;張松林;李運(yùn)彩;;斑馬魚胚胎毒理學(xué)研究進(jìn)展[J];湖北農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年06期

4 劉在平;張松林;;斑馬魚在環(huán)境保護(hù)中的應(yīng)用[J];中國(guó)環(huán)境監(jiān)測(cè);2011年04期

5 王雪;王希敏;劉可春;韓利文;袁延強(qiáng);;斑馬魚胚胎在毒理學(xué)研究中的應(yīng)用[J];山東科學(xué);2011年06期

6 劉麗麗;王健;王海勝;余凱敏;李國(guó)超;閆艷春;;斑馬魚轉(zhuǎn)基因平臺(tái)的建立[J];生物技術(shù)通報(bào);2013年10期

7 朱琳,史淑潔;斑馬魚胚胎發(fā)育技術(shù)在毒性評(píng)價(jià)中的應(yīng)用[J];應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào);2002年02期

8 董武,楊景峰,王思珍,高原,解顏炯,馬國(guó)文;二VA英污染引起的特異性下頜短小—斑馬魚下頜形態(tài)學(xué)檢測(cè)[J];內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2005年03期

9 蔡翔,王捷,王穎;應(yīng)用胚胎檢測(cè)技術(shù)評(píng)價(jià)氟嗎啉對(duì)斑馬魚胚胎-幼體發(fā)育的影響[J];農(nóng)藥;2005年06期

10 張立鳳;鐘濤;桂永浩;;外源性視黃酸對(duì)斑馬魚心血管系統(tǒng)發(fā)育的影響[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào);2006年02期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬雯雯;杭曉明;王巍;劉聰;孫野青;;模擬微重力影響斑馬魚胚胎發(fā)育的蛋白質(zhì)組特征[A];“基因、進(jìn)化與生理功能多樣性”海內(nèi)外學(xué)術(shù)研討會(huì)暨中國(guó)生理學(xué)會(huì)第七屆比較生理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2009年

2 張利軍;史慧勤;彭雙清;;基于斑馬魚模式動(dòng)物的阿霉素心臟毒性作用研究[A];2010年全國(guó)藥物毒理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2010年

3 王晗;;斑馬魚生物鐘調(diào)節(jié)的分子遺傳和基因組機(jī)制[A];2011年全國(guó)時(shí)間生物醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

4 林秀坤;;斑馬魚作為抗腫瘤藥物模型的分子基礎(chǔ)[A];第四屆中國(guó)腫瘤大會(huì)中國(guó)藥理學(xué)會(huì)腫瘤藥理專業(yè)委員會(huì)分會(huì)場(chǎng)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2006年

5 侯佳;桂永浩;張立鳳;王躍祥;宋后燕;鐘濤;;視黃酸缺乏對(duì)斑馬魚胚胎心臟發(fā)育的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第五次全國(guó)兒科中青年學(xué)術(shù)交流大會(huì)論文匯編（上冊(cè)）[C];2008年

6 陳錫強(qiáng);韓利文;王希敏;王思鋒;侯海榮;劉可春;;促滲劑氮酮對(duì)斑馬魚胚胎的透皮作用及其毒性影響(英文)[A];2012年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十二屆中國(guó)藥師周論文集[C];2012年

7 于永利;楊景峰;王思珍;董武;;高殘留農(nóng)藥福美雙對(duì)斑馬魚胚胎體節(jié)以及脊索的影響[A];持久性有機(jī)污染物論壇2010暨第五屆持久性有機(jī)污染物全國(guó)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

8 巴雅斯胡;楊景峰;于永利;王思珍;董武;;高殘留農(nóng)藥代森鋅誘導(dǎo)斑馬魚胚胎脊索變形[A];持久性有機(jī)污染物論壇2011暨第六屆持久性有機(jī)污染物全國(guó)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2011年

9 張利軍;郭家彬;苑曉燕;史慧勤;趙君;束玉磊;彭雙清;;應(yīng)用斑馬魚胚胎和幼魚評(píng)價(jià)布洛芬的心臟毒性[A];2013年（第三屆）中國(guó)藥物毒理學(xué)年會(huì)暨藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)研究論壇論文摘要[C];2013年

10 朱小山;朱琳;李燕;端正花;;富勒烯(C_(60))對(duì)斑馬魚胚胎發(fā)育毒性的初步研究[A];第三屆全國(guó)環(huán)境化學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2005年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 劉妍;美國(guó)培育出終生透明的斑馬魚[N];中國(guó)漁業(yè)報(bào);2008年

2 本報(bào)記者 滕繼濮;小小斑馬魚 大大有用處[N];科技日?qǐng)?bào);2010年

3 楓葉　編譯;篩選藥物：斑馬魚責(zé)任重大[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2012年

4 記者 熊琳暉 通訊員 孫慧;研究斑馬魚揭示器官再生之謎[N];長(zhǎng)江日?qǐng)?bào);2013年

5 羅剛 李兵;斑馬魚破譯人類基因的先鋒[N];健康報(bào);2004年

6 記者 李學(xué)梅;斑馬魚為治療白血病提新思路[N];新華每日電訊;2010年

7 本報(bào)記者 許琦敏;靜候那一點(diǎn)流星似的光亮[N];文匯報(bào);2012年

8 本報(bào)記者 許琦敏;劉廷析 “掘?qū)殹卑唏R魚世界[N];文匯報(bào);2011年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 管翊閎;核仁因子Def磷酸化修飾調(diào)控細(xì)胞周期和p53降解的研究[D];浙江大學(xué);2015年

2 胡晶瑩;環(huán)境雌激素影響斑馬魚生殖系統(tǒng)發(fā)育機(jī)制的初步研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

3 趙婷;Karsch-Neugebauer綜合征斑馬魚模型的建立和行為學(xué)觀察[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 王健;新型斑馬魚模型在研究腫瘤浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移和血管侵襲機(jī)制中的應(yīng)用[D];山東大學(xué);2015年

5 王明勇;斑馬魚生物鐘基因per2突變體的構(gòu)建及在生物鐘系統(tǒng)中的功能分析[D];蘇州大學(xué);2014年

6 龔璐;p53及其異構(gòu)體△133p53/△113p53在人類細(xì)胞和斑馬魚中的功能及生物學(xué)意義研究[D];浙江大學(xué);2015年

7 郭翠翠;斑馬魚D3b基因結(jié)構(gòu)及其在胚胎發(fā)育中的作用研究[D];上海交通大學(xué);2014年

8 沈兵;致癌染料的生理毒性及分子機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2015年

9 張慶友;斑馬魚Mil/s1pr2和vmhc基因的功能研究及藥源性心臟毒性模型的建立[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

10 楊梅;乙草胺對(duì)斑馬魚的發(fā)育和生殖內(nèi)分泌干擾機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2015年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 崔俊安;稀土對(duì)斑馬魚胚胎發(fā)育的影響[D];青島科技大學(xué);2011年

2 吳二社;nano-TiO_2,nano-Ag對(duì)斑馬魚胚胎發(fā)育的毒理學(xué)研究[D];西北師范大學(xué);2012年

3 溫鼎聲;利用模式生物斑馬魚對(duì)化合物心臟毒性和急毒性篩選的研究[D];華南理工大學(xué);2012年

4 梁榮朝;丙烯酰胺對(duì)斑馬魚生物余能的影響及對(duì)其肝、鰓毒性的作用[D];哈爾濱商業(yè)大學(xué);2013年

5 海洋;魚藤素對(duì)斑馬魚胚胎CyclinD1的表達(dá)調(diào)控及相關(guān)抗腫瘤機(jī)制研究[D];華南理工大學(xué);2015年

6 蔣宇霞;東江流域沉積物生物毒性及其沉積物質(zhì)量綜合評(píng)價(jià)[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院(廣州地球化學(xué)研究所);2015年

7 袁忠月;殼聚糖納米載體對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)影響的研究[D];浙江大學(xué);2015年

8 余凱敏;毒死蜱對(duì)斑馬魚胚胎的毒性機(jī)制研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

9 羅茜;斑馬魚生長(zhǎng)抑素-1基因靶向敲降和營(yíng)救以及基于表達(dá)譜的胚胎發(fā)育功能分析[D];西南大學(xué);2015年

10 胡月陽;UBE2C基因在斑馬魚胚胎發(fā)育中的時(shí)空表達(dá)規(guī)律[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

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