本文關(guān)鍵詞：壓力性尿失禁大鼠動物模型的建立及NOS、COX-2、P38的檢測

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【摘要】：1.研究目的1.1建立穩(wěn)定可靠的壓力性尿失禁(SUI)大鼠模型；1.2研究三種一氧化氮合酶(iNOS、nNOS、eNOS)、環(huán)氧合酶2(COX-2)、絲裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)在正常大鼠組(對照組)和SUI大鼠組(注射iNOS抑制劑S-甲基異硫脲SMT及注射生理鹽水)陰道、尿道和肛提肌組織中的表達(dá)情況；1.3分析五種因子含量在壓力性尿失禁模型組和正常對照組中表達(dá)含量變化情況,初步探討SUI動物模型形成的分子機(jī)制及五種因子與SUI發(fā)生發(fā)展關(guān)系,為臨床發(fā)病機(jī)制、診斷及治療提供一定的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。2.實(shí)驗(yàn)方法2.1 將60只雌性已分娩SD大鼠分為三組：A組為正常分娩組(14只),B組為正常分娩+陰道擴(kuò)張組(22只),C組為正常分娩+陰道擴(kuò)張+卵巢切除組(24只)；2.2對各組SD大鼠進(jìn)行噴嚏實(shí)驗(yàn)及尿流動力學(xué)檢測,以證實(shí)壓力性尿失禁；2.3再次將A組和尿失禁模型成功的B、C組SD大鼠分別隨機(jī)各均分為2個組：A1、B1、C1組腹腔注射生理鹽水,A2、B2、C2組腹腔注射SMT；2.4實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,分別隨機(jī)提取各亞組SD大鼠(各6只)的陰道、尿道和肛提肌組織,行免疫組化實(shí)驗(yàn)分析各亞組SD大鼠陰道、尿道和肛提肌組織中五種因子(iNOS、nNOS、eNOS、COX-2、P38)的表達(dá)及分布情況,用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析比較SUI模型組和正常組中五種因子表達(dá)含量的變化情況。3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1 實(shí)驗(yàn)8個月中共6只大鼠死亡,其中B組死亡2只,C組死亡4只。A、B、C三組SD大鼠的腹漏尿點(diǎn)壓(ALPP)分別為(64.85±2.44)cmH2O、(45.20±2.78) cmH2O、(44.75±2.33) cmH2O,兩兩比較A組與B組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001)、A組與C組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001),B組與C組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.578)；A、B、C三組SD大鼠的最大膀胱容量(MBC)分別為(2.82±0.40)ml、(2.77±0.49)ml、(2.78±0.39)ml,三組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.943)；噴嚏實(shí)驗(yàn)A組全為陰性,B組有12只大鼠表現(xiàn)為陽性(陽性率為60%),C組有18只大鼠表現(xiàn)為陽性(陽性率為90%)。3.2 iNOS主要表達(dá)在三組SD大鼠尿道和陰道粘膜上皮細(xì)胞的胞核,肛提肌組織細(xì)胞的胞漿。iNOS的染色強(qiáng)度表達(dá)積分在三組間比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；注射SMT抑制劑后,iNOS的染色強(qiáng)度表達(dá)積分有不同程度下降,組內(nèi)前后比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.3 nNOS主要表達(dá)在三組SD大鼠陰道粘膜上皮細(xì)胞的胞漿,肛提肌組織細(xì)胞的胞核,而在尿道上皮組織中未見明顯表達(dá)。在陰道和肛提肌組織中,nNOS的染色強(qiáng)度表達(dá)積分在三組間比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；注射SMT抑制劑后,nNOS的染色強(qiáng)度表達(dá)積分未見明顯變化,組內(nèi)前后比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.4 eNOS主要表達(dá)在三組SD大鼠肛提肌組織細(xì)胞的胞漿,而在尿道、陰道上皮組織中未見明顯表達(dá)。在肛提肌組織中,eNOS的染色強(qiáng)度表達(dá)積分在三組間比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；注射SMT抑制劑后,eNOS的染色強(qiáng)度表達(dá)積分未見明顯變化,組內(nèi)前后比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.5 COX-2主要表達(dá)在三組SD大鼠陰道粘膜上皮細(xì)胞的胞漿,肛提肌組織細(xì)胞的胞漿,而在尿道粘膜上皮未見明顯表達(dá)。在陰道和肛提肌組織中,COX-2的染色強(qiáng)度表達(dá)積分在三組間比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；注射SMT抑制劑后,COX-2的染色強(qiáng)度表達(dá)積分有不同程度下降,組內(nèi)前后比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.6 P38表達(dá)在三組SD大鼠尿道、陰道上皮細(xì)胞的胞漿和胞核,肛提肌組織細(xì)胞的胞漿和胞核。P38的染色強(qiáng)度表達(dá)積分在三組間比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；注射SMT抑制劑后,P38的染色強(qiáng)度表達(dá)積分未見明顯變化,組內(nèi)前后比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.結(jié)論4.1妊娠、陰道球囊擴(kuò)張模擬產(chǎn)傷、切卵巢模擬雌激素水平下降均可成功建立壓力性尿失禁動物模型,同時(shí)模擬多種病因成功率更高。4.2 iNOS在SUI大鼠模型組尿道、陰道及肛提肌組織中的表達(dá)含量均較正常對照組有明顯升高；使用SMT抑制劑后,iNOS的表達(dá)含量明顯下降,提示iNOS參與了SUI的發(fā)病,SMT能抑制iNOS的表達(dá)。4.3 nNOS在三組SD大鼠的尿道粘膜組織中均未見明顯表達(dá),在SUI大鼠模型組陰道、肛提肌組織中的表達(dá)含量均較正常對照組有明顯升高,提示nNOS參與了SUI的發(fā)��；使用SMT抑制劑后,nNOS的表達(dá)含量無明顯變化,SMT不能抑制nNOS的表達(dá)。4.4 eNOS在三組SD大鼠的尿道、陰道粘膜組織中未見明顯表達(dá),SUI大鼠模型組肛提肌組織中的表達(dá)含量均較正常對照組有明顯升高,提示eNOS參與了SUI的發(fā)��；使用SMT抑制劑后,eNOS的表達(dá)含量無明顯變化,SMT不能抑制eNOS的表達(dá)。4.5 COX-2在三組SD大鼠的尿道粘膜組織未見明顯表達(dá),在SUI大鼠模型組陰道及肛提肌組織中的表達(dá)含量均較正常對照組有明顯升高,提示COX-2參與了SUI的發(fā)��；使用SMT抑制劑后,COX-2的表達(dá)含量明顯下降,SMT能抑制COX-2的表達(dá)。4.6 P38在三組SD大鼠的尿道、陰道及肛提肌組織中的表達(dá)含量無明顯差異,使用SMT抑制劑后,P38的表達(dá)含量明顯無明顯變化,提示P38與SUI的發(fā)病關(guān)系不密切,SMT不能抑制P38表達(dá)。4.7綜上所述,提示三種NOS及COX-2和SUI發(fā)病密切相關(guān),而P38與SUI的發(fā)病關(guān)系不密切。
【關(guān)鍵詞】：壓力性尿失禁 動物模型 誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS) 神經(jīng)型一氧化氮合酶(nNOS) 內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS) 環(huán)氧合酶2(COX-2) P38
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R-332;R711.59
【目錄】：

• 中英文縮略詞5-8
• 中文摘要8-11
• 英文摘要11-15
• 第一部分 壓力性尿失禁(SUI)大鼠動物模型的建立15-30
• 引言15-16
• 材料和方法16-19
• 結(jié)果19-21
• 討論21-27
• 結(jié)論27
• 參考文獻(xiàn)27-30
• 第二部分 SUI大鼠動物模型陰道、尿道、肛提肌組織中相關(guān)因子(NOS、COX-2、P38)的檢測30-72
• 引言30-33
• 材料和方法33-39
• 結(jié)果39-59
• 討論59-66
• 結(jié)論66
• 參考文獻(xiàn)66-72
• 綜述72-83
• 參考文獻(xiàn)80-83
• 論著83-92
• 參考文獻(xiàn)90-92
• 文章發(fā)表情況92-93
• 致謝93

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

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本文編號：582455