發(fā)布時(shí)間：2017-07-25 22:22

  本文關(guān)鍵詞：弓形蟲棒狀體蛋白R(shí)OP18的原核表達(dá)及其免疫保護(hù)性研究

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【摘要】：目的克隆弓形蟲ROP18基因并構(gòu)建該基因的原核表達(dá)系統(tǒng)。方法根據(jù)GenBank發(fā)表的弓形蟲ROP18序列設(shè)計(jì)合成1對(duì)特異性引物,PCR擴(kuò)增ROP18抗原基因,并亞克隆到pET-28a原核表達(dá)載體,重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸埃希菌BL21感受態(tài)細(xì)胞,用IPTG誘導(dǎo)表達(dá),重組蛋白用SDS-PAGE及Western blot鑒定。重組蛋白經(jīng)純化后免疫小鼠,ELISA法檢測(cè)血清抗弓形蟲IgG,并通過攻蟲試驗(yàn)觀察重組蛋白的免疫保護(hù)作用。結(jié)果成功構(gòu)建了ROP18基因原核表達(dá)質(zhì)粒pET-28a-ROP18,表達(dá)重組蛋白的分子質(zhì)量單位約為55ku,該蛋白可被鼠抗弓形蟲多抗血清識(shí)別;經(jīng)ELISA檢測(cè),重組蛋白免疫小鼠產(chǎn)生了較高水平的血清抗體;攻蟲試驗(yàn)中,重組蛋白免疫小鼠生存時(shí)間較對(duì)照組小鼠顯著延長(P0.05)。結(jié)論成功構(gòu)建了ROP18基因原核表達(dá)質(zhì)粒,表達(dá)的重組蛋白具有一定的免疫保護(hù)作用。
【作者單位】： 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所 吉林省人畜共患病預(yù)防與控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所吉林省人畜共患病預(yù)防與控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;吉林省畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究院;
【關(guān)鍵詞】： 弓形蟲 ROP 原核表達(dá)
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.30972178,31072127,31001057)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 剛地弓形蟲(Toxoplasma gondii)是一種呈世界性分布、專性細(xì)胞內(nèi)寄生的機(jī)會(huì)性致病原蟲[1],可感染包括哺乳動(dòng)物及鳥類在內(nèi)的幾乎所有溫血脊椎動(dòng)物,據(jù)估計(jì)全世界有超過三分之一的人感染過弓形蟲[2]。一般情況下,宿主呈隱性感染,但在免疫缺陷病人群(如艾滋病和器官移植患者)弓形

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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【相似文獻(xiàn)】

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3 向吉?jiǎng)偂《盼∥?孕婦養(yǎng)貓狗孩子易患精神病[N];新華每日電訊;2005年

4 采寫 本報(bào)記者 郭靜　實(shí)習(xí)生 賈亞敏 王詩霖 通訊員 蘇育敏 受訪專家 廣東省婦幼保健院產(chǎn)前診斷中心、優(yōu)生遺傳咨詢�？浦魅吾t(yī)師 鐘燕芳;孕婦染弓形蟲病易致胎兒畸形[N];廣東科技報(bào);2008年

5 遼寧省計(jì)劃生育科研院 郭廷超;想懷孕：離寵物遠(yuǎn)點(diǎn)[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2006年

6 黃芳;準(zhǔn)媽媽要遠(yuǎn)離寵物[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2006年

7 記者 肖國強(qiáng)　通訊員 李亞平 張?jiān)偾?我省56萬人免費(fèi)婚孕檢[N];浙江日?qǐng)?bào);2010年

8 ;誰操縱了“動(dòng)物僵尸”[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

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10 實(shí)習(xí)記者 馬元霞;把好入口關(guān) 遠(yuǎn)離寄生蟲[N];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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6 朱德康;鴨疫里默氏桿菌莢膜多糖輸出蛋白基因的發(fā)現(xiàn)及其免疫原性研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

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中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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6 孫其U，

本文編號(hào)：573612