發(fā)布時(shí)間：2017-07-20 12:24

  本文關(guān)鍵詞：miRNA-181b在氧-糖剝奪致N2A細(xì)胞缺血損傷中的作用及對(duì)熱休克蛋白A5表達(dá)的調(diào)節(jié)

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【摘要】：目的探討miR-181b在氧糖剝奪(OGD)致N2As神經(jīng)瘤細(xì)胞缺血損傷中的作用,及其對(duì)熱休克蛋白(HSP)A5表達(dá)的調(diào)節(jié)。方法應(yīng)用N2A細(xì)胞OGD模型模擬神經(jīng)細(xì)胞缺血損傷,MTT比色法檢測(cè)N2A細(xì)胞生存率,免疫印跡法檢測(cè)HSPA5蛋白表達(dá)水平,實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)miR-181b和HSPA5 mRNA表達(dá)水平,熒光素酶報(bào)告基因技術(shù)檢測(cè)miR-181b對(duì)HSPA5 mRNA的直接調(diào)控作用。結(jié)果 miR-181b在OGD致N2A細(xì)胞缺血損傷中表達(dá)水平明顯降低(n=5);在OGD致N2A細(xì)胞缺血損傷過(guò)程中,通過(guò)上調(diào)或抑制miR-181b的表達(dá)水平可以顯著影響N2A細(xì)胞的生存率(n=6);而在非OGD條件下,miR-181b表達(dá)水平的改變對(duì)N2A細(xì)胞活力無(wú)影響;miR-181b表達(dá)水平的改變可顯著影響HSPA5蛋白表達(dá)水平(n=3),而非HSPA5的mRNA水平;共轉(zhuǎn)染miR-181b前體(premiR-181b)或miR-181b抑制劑(anti-miR-181b)可顯著抑制或增高含有HSPA5 mRNA 3’-UTR的熒光素酶報(bào)告基因的活性(n=5)。結(jié)論 miR-181b通過(guò)負(fù)性調(diào)節(jié)HSPA5的蛋白表達(dá)水平,在OGD致N2A神經(jīng)細(xì)胞缺血性損傷中發(fā)揮重要作用。
【作者單位】： 首都醫(yī)科大學(xué)神經(jīng)生物學(xué)系北京腦重大疾病研究院;
【關(guān)鍵詞】： 氧-糖剝奪 缺血性損傷 miR-b 熱休克蛋白A 免疫印跡法 實(shí)時(shí)定量PCR 雙熒光素酶報(bào)告基因分析 NA細(xì)胞
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31071048,31171147) 國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)性研究資助項(xiàng)目(2012CB18200) 973前期專項(xiàng)資金資助項(xiàng)目(2011CB512109)
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： 目前,缺血性腦卒中已成為全球人口死亡及致殘的重要疾病[1]。腦缺血后,由于組織血供不足,神經(jīng)細(xì)胞代謝障礙,最終導(dǎo)致細(xì)胞不可逆性損傷和死亡的一系列病理生理學(xué)過(guò)程和機(jī)制已比較清楚,但目前臨床上對(duì)腦卒中的治療尚缺乏有效措施[2]。因此,闡明腦缺血/低氧預(yù)適應(yīng)(ischemia/hypox

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 馬麗娟;周健;汪俊軍;;MicroRNAs—缺血性腦卒中潛在的診斷標(biāo)志物及治療靶點(diǎn)[J];臨床檢驗(yàn)雜志;2013年08期

2 鐘潔;李潔霏;郭穎;韓松;尹艷玲;李淑娟;李俊發(fā);;miR-378負(fù)性調(diào)節(jié)caspase-3蛋白表達(dá)減輕氧-糖剝奪致小鼠N2A細(xì)胞缺血損傷[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2013年11期

3 李潔霏;章欣欣;鐘潔;楊璇;李筠;韓松;李俊發(fā);;腦內(nèi)源性cPKC gamma水平影響缺血性卒中小鼠腦梗死體積和神經(jīng)功能損傷[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2013年11期

4 郭穎;曲彥明;韓松;鐘潔;于春江;李俊發(fā);;血管細(xì)胞黏附分子-1蛋白在人腦膠質(zhì)瘤組織內(nèi)表達(dá)改變及其臨床意義[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2013年12期

5 胡躍強(qiáng);唐農(nóng);吳林;孫淑榮;蘇錦勛;覃琴;;聯(lián)合水蛭注射液后處理對(duì)大鼠腦缺血損傷磷酸化蛋白激酶B表達(dá)的影響[J];中華老年心腦血管病雜志;2013年12期

6 保玉蓮;朱榆紅;;MicroRNA與缺血性腦卒中關(guān)系的研究進(jìn)展[J];中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志;2014年04期

7 林洋;芮耀誠(chéng);;腦缺血大鼠腦組織及血漿中microRNA-124a表達(dá)的變化[J];中國(guó)腦血管病雜志;2011年03期

8 彭靜靜;張春妮;;微小核糖核酸與缺血性腦損傷[J];臨床檢驗(yàn)雜志;2014年12期

9 王穎;李金;王磊;徐成振;才忠喜;;基于機(jī)器學(xué)習(xí)的microRNA預(yù)測(cè)方法研究進(jìn)展[J];計(jì)算機(jī)科學(xué);2015年02期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 趙建軍;miRNA在脊髓發(fā)育及腫瘤分類中的作用[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

2 申樂(lè);PSD-95小干擾RNA沉默效率評(píng)估與功能研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

3 王曉映;阿爾茨海默病中microRNA-34a作用機(jī)制的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

4 王沖;P19細(xì)胞分化過(guò)程中miRNA、bHLH因子及PcGs之間的相互調(diào)控[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

5 王月紅;口腔疣狀癌、口腔鱗癌全基因組及miRNA表達(dá)譜研究[D];中南大學(xué);2012年

6 黃江湖;MicroRNA-21在急性脊髓損傷中的作用及川芎嗪的抗凋亡作用機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2013年

7 Ahmed Galal ELDeen Mohamed Omran;MicroRNAs與內(nèi)側(cè)顳葉癲癇發(fā)生發(fā)展機(jī)制的相關(guān)性研究[D];中南大學(xué);2013年

8 戴毅;應(yīng)用基因芯片捕獲和新一代高通量測(cè)序技術(shù)建立Duchenne/Becker型肌營(yíng)養(yǎng)不良基因診斷平臺(tái)及相關(guān)臨床應(yīng)用[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

9 姚小英;MiR-199a及其靶基因在大鼠3-硝基丙酸誘導(dǎo)的腦缺血耐受過(guò)程中的表達(dá)[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2010年

10 董銀鳳;Kir6.1/K-ATP通道在小鼠局灶性腦缺血再灌注損傷中的作用[D];南京醫(yī)科大學(xué);2013年

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本文編號(hào)：568025