本文關(guān)鍵詞：EV71與CB3病毒VP1融合蛋白的構(gòu)建表達(dá)與抗原性初步評(píng)價(jià)

  更多相關(guān)文章： 腸道病毒型 柯薩奇B病毒 外殼蛋白VP 融合蛋白

【摘要】：目的構(gòu)建pET-22b-ECVP1表達(dá)載體,在大腸桿菌中誘導(dǎo)表達(dá)腸道病毒71型(EV71)及柯薩奇B3型(CB3)病毒VP1融合蛋白(ECVP1),并鑒定其抗原性。方法利用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)方法分別從EV71與CB3病毒基因組中擴(kuò)增得到外殼蛋白VP1基因,經(jīng)重疊延伸PCR(SOE-PCR)方法拼接構(gòu)建重組融合蛋白基因(ecvp1),將該片段連接到pET-22b表達(dá)載體上,在大腸桿菌BL21(DE3)中誘導(dǎo)表達(dá)融合蛋白,經(jīng)Western blot鑒定其抗原性。結(jié)果pET-22b-ECVP1表達(dá)載體構(gòu)建成功,融合蛋白相對(duì)分子量約為65 ku,Western blot分析表明,該融合蛋白能被抗EV71及抗CB3抗體特異識(shí)別。結(jié)論成功構(gòu)建pET-22b-ECVP1表達(dá)質(zhì)粒并誘導(dǎo)ECVP1融合蛋白表達(dá),且融合蛋白具有良好的抗原性。
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué);軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所病原微生物生物安全國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 腸道病毒型 柯薩奇B病毒 外殼蛋白VP 融合蛋白
【基金】：北京市自然科學(xué)基金(編號(hào):7112107)
【分類(lèi)號(hào)】：R392.1
【正文快照】： 手足口病(hand-foot-and-mouth disease,HFMD)是由多種腸道病毒引起的以嬰幼兒發(fā)病為主的一種急性傳染病,其主要癥狀以發(fā)熱和手足、口腔等部位的皮疹或皰疹性咽峽炎為主[1]。引起HFMD的腸道病毒主要包括腸道病毒71型(enterovirus 71,EV71)、柯薩奇病毒�？滤_奇病毒B組3型(cox-

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1 陳U，

本文編號(hào)：556366