本文關(guān)鍵詞：結(jié)核分枝桿菌H37Rv菌株Hsp16.3基因缺失突變株的構(gòu)建與鑒定

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【摘要】：目的構(gòu)建及鑒定結(jié)核分枝桿菌國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株H37Rv菌株Hsp16.3基因缺失突變株。方法體外培養(yǎng)結(jié)核分枝桿菌國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株H37Rv菌株,并提取基因組DNA,擴(kuò)增Hsp16.3基因兩側(cè)序列,分別插入到pKO質(zhì)粒載體預(yù)定位點(diǎn)中,構(gòu)建Hsp16.3基因置換型打靶載體,電轉(zhuǎn)入結(jié)核分枝桿菌H37Rv菌株內(nèi),并與其基因組中的Hsp16.3基因同源交換,篩選出Hsp16.3基因缺失突變株。結(jié)果通過卡那霉素篩選和蔗糖反篩選及PCR鑒定,并在含有潮霉素培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)的菌株為Hsp16.3基因缺失突變株。結(jié)論成功構(gòu)建出結(jié)核分枝桿菌國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株H37Rv菌株Hsp16.3基因缺失突變株。
【作者單位】： 重慶市永川區(qū)人民醫(yī)院;石河子大學(xué)
【關(guān)鍵詞】： 基因敲除 Hsp. 結(jié)核分枝桿菌 HRv
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(No.30960355) 石河子大學(xué)科學(xué)技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃“自然科學(xué)與計(jì)劃創(chuàng)新”重點(diǎn)項(xiàng)目(No.ZRKX2010ZD01)~~
【分類號(hào)】：R378
【正文快照】： 結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tu-berculosis,MTB)引起的世界性傳染病,我國(guó)的結(jié)核病疫情依然十分嚴(yán)重,肺結(jié)核病的發(fā)病和死亡人數(shù) 始終排在法定報(bào)告?zhèn)魅静〉氖孜�。結(jié)核分枝桿菌感染人體后主要寄生在宿主巨噬細(xì)胞內(nèi),結(jié)核分枝桿菌小分子熱休克蛋白(small heat shock pr

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