本文關(guān)鍵詞：人血管內(nèi)皮生長因子165基因慢病毒載體的構(gòu)建及其在人胚胎神經(jīng)干細(xì)胞中的表達(dá)

  更多相關(guān)文章： 血管內(nèi)皮生長因子類 慢病毒載體 神經(jīng)干細(xì)胞 轉(zhuǎn)染

【摘要】：目的:構(gòu)建攜帶人血管內(nèi)皮生長因子165(hVEGF165)基因的慢病毒表達(dá)載體,轉(zhuǎn)染人胚胎神經(jīng)干細(xì)胞(hNSCs)并檢測hVEGF165基因在hNSCs內(nèi)的表達(dá)。方法:用RT-PCR法擴(kuò)增出hVEGF165 cDNA,插入pCDH-CMV-copGFP慢病毒載體中,構(gòu)建pCDH-hVEGF165慢病毒表達(dá)載體,雙酶切和測序鑒定,包裝并轉(zhuǎn)染hNSCs。熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染細(xì)胞綠色熒光蛋白(GFP)表達(dá),流式細(xì)胞術(shù)(FCM)測定轉(zhuǎn)染率,Western blot法檢測細(xì)胞中hVEGF165的表達(dá)。結(jié)果:酶切及測序結(jié)果顯示成功構(gòu)建pCDH-hVEGF165重組慢病毒表達(dá)載體,轉(zhuǎn)染7d后觀察宿主細(xì)胞內(nèi)有大量GFP表達(dá),FCM測定轉(zhuǎn)染率為63%,Western blot檢測證實hVEGF165蛋白在hNSCs中過表達(dá)。結(jié)論:本實驗成功構(gòu)建了攜帶hVEGF165的慢病毒表達(dá)載體,并在hNSCs中過表達(dá)hVEGF165基因。
【作者單位】： 溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院神經(jīng)外科;
【關(guān)鍵詞】： 血管內(nèi)皮生長因子類 慢病毒載體 神經(jīng)干細(xì)胞 轉(zhuǎn)染
【基金】：浙江省自然科學(xué)基金項目(編號:Y2110807)
【分類號】：R329
【正文快照】： 神經(jīng)干細(xì)胞具有自我更新和多向分化潛能,是理想的供移植細(xì)胞和基因治療載體。神經(jīng)干細(xì)胞能部分修復(fù)因腦出血引起的神經(jīng)結(jié)構(gòu)和功能損害。但單純的神經(jīng)干細(xì)胞移植并不能對腦出血早期局部病理改變產(chǎn)生積極影響[1]。本研究將攜帶人血管內(nèi)皮生長因子165(hVEGF165)基因的慢病毒載體

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 周煒;馮進(jìn)波;王旭平;劉春喜;姜虹;王榮;丁士芳;;攜帶人血管內(nèi)皮生長因子165基因的復(fù)制缺陷型腺病毒載體的構(gòu)建和鑒定[J];實用醫(yī)學(xué)雜志;2009年03期

2 王曉艷;李莉華;郭子健;饒敏;;Med19過表達(dá)慢病毒載體的構(gòu)建及鑒定[J];實用醫(yī)學(xué)雜志;2011年22期

3 蘇志鵬,葉盛,錢旭,諸葛啟釧;人胚胎神經(jīng)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及鑒定[J];浙江醫(yī)學(xué);2005年10期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 楊民;王強(qiáng);王劍;;重組人血管內(nèi)皮生長因子121的腺相關(guān)病毒載體構(gòu)建及誘導(dǎo)體內(nèi)血管生成的實驗研究[J];實用醫(yī)學(xué)雜志;2010年12期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉君;攜帶血管生成素-1基因重組腺病毒載體的構(gòu)建及修飾骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的實驗研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 畢永延;潘棟超;馮東福;陳二濤;汪洋;;小鼠pLVX-Wnt3a-IRES-ZsGreen1慢病毒載體的構(gòu)建及神經(jīng)干細(xì)胞轉(zhuǎn)染[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2010年12期

2 胡楊;盛磊;馬瑩;何惠宇;阿布力孜·阿布杜拉;阿爾孜古麗;;堿性成纖維細(xì)胞生長因子-慢病毒真核表達(dá)載體的構(gòu)建及轉(zhuǎn)染[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年06期

3 張寶;霍霞;彭琳;齊宗利;徐錫金;李燕;鄭良楷;丘波;;FUS1基因慢病毒載體的構(gòu)建[J];中華腫瘤防治雜志;2008年04期

4 黃愛華;王淑艷;梁慶成;吳云;關(guān)云謙;張愚;陳贊;;人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)鑒定和慢病毒載體介導(dǎo)膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子在臍血間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)[J];中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報;2010年01期

5 薄占東;趙勁民;楊志;蘇偉;洪光祥;雷正旺;;神經(jīng)營養(yǎng)素3基因轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細(xì)胞及其表達(dá)(英文)[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2008年12期

6 陳景波;王國斌;孫念峰;陶凱雄;舒曉剛;張景輝;;膠質(zhì)細(xì)胞源性營養(yǎng)因子及內(nèi)皮素B受體基因共轉(zhuǎn)染小鼠神經(jīng)干細(xì)胞(英文)[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2009年49期

7 呂勝青,劉運(yùn)生,楊輝,何家全,王彬,Ichiro Yoshimura;胞嘧啶脫氨酶基因修飾神經(jīng)干細(xì)胞及其表達(dá)的離體實驗研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2003年11期

8 趙永波,王曉梅,劉文文;重組大鼠質(zhì)粒pEGFP-GDNF的構(gòu)建及大鼠胚胎神經(jīng)干細(xì)胞轉(zhuǎn)染的研究[J];神經(jīng)疾病與精神衛(wèi)生;2005年04期

9 易甫;吳紅;賈國良;郭文怡;呂安林;王海昌;張榮慶;;納米粒子介導(dǎo)血管內(nèi)皮生長因子基因轉(zhuǎn)染的實驗研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2006年03期

10 薄占東;趙勁民;楊志;蘇偉;洪光祥;雷正旺;;神經(jīng)營養(yǎng)素-3基因轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細(xì)胞的實驗研究[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2006年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 吳樹亮;金連弘;李竹英;劉慧雯;張寶東;史敬東;;重組rAAV2/eGFP、rAAV2/NGF病毒轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細(xì)胞的研究[A];中國解剖學(xué)會第八屆組織學(xué)與胚胎學(xué)專業(yè)青年研討會論文集[C];2004年

2 宋躍明;袁海峰;劉浩;龔全;孔清泉;周春光;;慢病毒介導(dǎo)NEP1-40轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細(xì)胞的研究[A];第六屆西部骨科論壇暨貴州省骨科年會論文匯編[C];2010年

3 張海燕;蘭蘭;趙春禮;王蓓蓓;段德義;徐群淵;;溫控性永生化大鼠中腦神經(jīng)干細(xì)胞系的建立[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會第八屆會員代表大會暨學(xué)術(shù)大會論文摘要集[C];2003年

4 孫一睿;胡錦;王爾松;奚才華;姚海軍;;單層黏附培養(yǎng)技術(shù)在哺乳動物神經(jīng)干細(xì)胞體外穩(wěn)定增殖和多向分化中的應(yīng)用[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經(jīng)外科醫(yī)師分會第四屆全國代表大會論文匯編[C];2009年

5 朱慧;李曉紅;戚菁;施維;吳信華;陸玉華;鞠少卿;劉炎;;Pax3負(fù)性調(diào)控神經(jīng)干細(xì)胞分化過程中膠質(zhì)纖維酸性蛋白的表達(dá)[A];2010’全國腫瘤分子標(biāo)志及應(yīng)用學(xué)術(shù)研討會暨第五屆中國中青年腫瘤專家論壇論文匯編[C];2010年

6 李革飛;李劍平;;應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測神經(jīng)干細(xì)胞表面標(biāo)志物-Nestin[A];中國輸血協(xié)會第五屆輸血大會論文專集（摘要篇）[C];2010年

7 李力;萬琪;劉永紅;張巍;;小鼠神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)及缺血神經(jīng)元對其增殖、分化的影響[A];科技、工程與經(jīng)濟(jì)社會協(xié)調(diào)發(fā)展——中國科協(xié)第五屆青年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2004年

8 姚立松;劉天慶;葛丹;崔占峰;馬學(xué)虎;;海藻酸鈣微膠珠培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞[A];第一屆全國化學(xué)工程與生物化工年會論文摘要集(下)[C];2004年

9 田東萍;蘇敏;吳賢英;張舸;;硒、B-27在神經(jīng)干細(xì)胞球存活與分化中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會2005年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2005年

10 張坤;黃慶軍;;白介素-1β對體外海馬神經(jīng)干細(xì)胞分化為5-HT能神經(jīng)元影響的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會精神病學(xué)分會第九次全國學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 時仲省 高思敏;移植神經(jīng)干細(xì)胞 癱瘓兔子可爬行[N];大眾衛(wèi)生報;2001年

2 王成應(yīng);能克隆的神經(jīng)干細(xì)胞被分離[N];健康報;2004年

3 本報記者 仇逸;突破堅冰[N];經(jīng)濟(jì)參考報;2001年

4 ;英研究用神經(jīng)干細(xì)胞治療中風(fēng)[N];人民日報海外版;2000年

5 北京康復(fù)中心神經(jīng)外科 黃紅云;神經(jīng)干細(xì)胞之謎[N];健康報;2008年

6 孫國根;神經(jīng)干細(xì)胞并非“全能制造者”[N];中國醫(yī)藥報;2009年

7 劉霞;美將成人皮膚細(xì)胞變成神經(jīng)干細(xì)胞[N];科技日報;2011年

8 劉霞;美培育出能自我更新的神經(jīng)干細(xì)胞[N];科技日報;2011年

9 孫國根　白毅;靈長類腦內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞被發(fā)現(xiàn)[N];中國醫(yī)藥報;2011年

10 ;我國科學(xué)家成功地在體外培養(yǎng)出神經(jīng)干細(xì)胞[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報;2001年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李巍;神經(jīng)干細(xì)胞的分化調(diào)控及BDNF基因修飾后對大鼠脊髓損傷修復(fù)的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2002年

2 高國一;胎鼠腦神經(jīng)干細(xì)胞鑒定純化與生物學(xué)特性觀察[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2002年

3 劉飆;激活素和bFGF對神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞定向分化誘導(dǎo)作用的研究[D];吉林大學(xué);2007年

4 李立君;慢病毒介導(dǎo)NT-3基因轉(zhuǎn)導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)生物學(xué)特性研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

5 蘇冠華;肝細(xì)胞生長因子基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植的促血管新生作用[D];華中科技大學(xué);2010年

6 馬東初;CD226分子表達(dá)于造血干/祖細(xì)胞和巨核細(xì)胞譜系及神經(jīng)細(xì)胞譜系參與巨核細(xì)胞倍體化調(diào)控[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

7 周虎田;骨髓源神經(jīng)干細(xì)胞生物學(xué)特性的研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2005年

8 楊志峰;應(yīng)用慢病毒載體介導(dǎo)RNA干擾在MCF-7細(xì)胞中剔降IKKα基因和制備轉(zhuǎn)基因小鼠模型的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

9 劉福云;大鼠胎腦神經(jīng)干細(xì)胞及兒童骨髓間質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為神經(jīng)細(xì)胞及其鑒定[D];四川大學(xué);2004年

10 張翠萍;低氧對神經(jīng)干細(xì)胞增殖和分化的影響及HIF-1的作用機(jī)制[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2006年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉春江;大鼠胎腦神經(jīng)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及電穿孔轉(zhuǎn)染[D];中南大學(xué);2009年

2 龔江標(biāo);腺病毒介導(dǎo)LacZ基因在神經(jīng)干細(xì)胞中的轉(zhuǎn)染與表達(dá)[D];浙江大學(xué);2004年

3 欒沖;可誘導(dǎo)表達(dá)hBMP-2基因的慢病毒載體的構(gòu)建及其慢病毒的產(chǎn)生和鑒定[D];青島大學(xué);2010年

4 邱克軍;酪氨酸羥化酶基因轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細(xì)胞及表達(dá)[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2001年

5 姚志芳;人誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞（iPS）系的建立[D];南方醫(yī)科大學(xué);2010年

6 李軍;一種人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶基因啟動子的重組與功能鑒定[D];重慶大學(xué);2007年

7 劉向陽;慢病毒載體表達(dá)人B型利鈉肽的方法學(xué)探討[D];華中科技大學(xué);2006年

8 宋精梅;比較新生大鼠腦部不同部位的神經(jīng)干細(xì)胞被誘導(dǎo)分化為少突膠質(zhì)細(xì)胞的差異[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

9 李政;內(nèi)皮祖細(xì)胞調(diào)控神經(jīng)干細(xì)胞分化及其機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年

10 馮年花;人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞向神經(jīng)干細(xì)胞分化的實驗研究[D];南昌大學(xué);2010年

，

本文編號：526469