發(fā)布時(shí)間：2017-07-06 12:15

  本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)基因表達(dá)HBV抗原特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞受體

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【摘要】：目的通過逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)HBV抗原特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)的T細(xì)胞受體(TCR)轉(zhuǎn)基因表達(dá),初步觀察其結(jié)合活性。方法從HLA-A2陽性急性乙肝患者外周血中誘導(dǎo)、分選、克隆和擴(kuò)增HBV抗原特異性CTL;提取細(xì)胞RNA,用RT-PCR、5'-RACE和OVER-LAP PCR等方法獲取TCR的α和β鏈編碼基因;構(gòu)建TCR重組逆轉(zhuǎn)錄病毒,介導(dǎo)特異性TCR分別在人Jurkat T細(xì)胞和HLA-A2陽性健康人CD8 T淋巴細(xì)胞上表達(dá)。結(jié)果從1例HLA-A2陽性急性乙肝患者樣本中分別獲得了2組TCR Vα、Vβ配對(duì),分別命名為α21β13、α15β13,包裝的重組逆轉(zhuǎn)錄病毒滴度為(1.5～5.0)×105IU/mL,用針對(duì)目標(biāo)TCR的特異性Vβ鏈抗體(抗Vβ13 TCR-PE)和HLA-A2限制性表位特異性五聚體(pentamer)進(jìn)行免疫熒光染色,重組TCR在T細(xì)胞表面獲得表達(dá):其中在Jurkat細(xì)胞上轉(zhuǎn)入的Vβ13鏈表達(dá)細(xì)胞占1.06%～2.25%,在HLA-A2陽性健康人T細(xì)胞上Vβ13陽性細(xì)胞和pentamer陽性細(xì)胞分別占到1.03%～2.06%和1.05%～1.12%,在HLA-A2陰性健康人T細(xì)胞上Vβ13陽性細(xì)胞和pentamer陽性細(xì)胞均低于0.05%。結(jié)論通過逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)可以使HBV特異性CTL TCR獲得轉(zhuǎn)基因表達(dá),具有結(jié)合HLA-A2限制性表位的活性。
【作者單位】： 桂林醫(yī)學(xué)院;解放軍302醫(yī)院全軍傳染病研究所肝衰竭研究中心病毒性肝炎研究室;桂林市第三人民醫(yī)院肝病科;
【關(guān)鍵詞】： 乙型肝炎病毒 細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞 T細(xì)胞受體 表位特異性 表達(dá)
【基金】：國家自然科學(xué)基金(30771898) 軍隊(duì)“十一五”醫(yī)藥衛(wèi)生科研杰出人才項(xiàng)目(06J024)
【分類號(hào)】：R392.11
【正文快照】： 肝細(xì)胞內(nèi)乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)清除主要依靠HBV抗原表位特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)的作用[1],急性乙肝患者可以產(chǎn)生較強(qiáng)的CTL反應(yīng),慢性乙型肝炎患者的外周血中往往CTL反應(yīng)很弱,且針對(duì)的病毒抗原表位反應(yīng)單一,導(dǎo)致不能完全清除HBV[2

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 謝國化;鮑鳴;仲大蓮;余為一;李槿年;;編碼雞CD8α鏈無信號(hào)肽基因片段的克隆與表達(dá)[J];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年01期

2 王東琳,朱勇,李琦,劉振世,謝晶,歐陽為明,金伯泉;磁分離酶聯(lián)免疫法檢測IL-4方法的建立[J];標(biāo)記免疫分析與臨床;2004年04期

3 錢少平,王玲,林霖,楊恂,顏曉玉,蔣永威,官和立,劉燕,楊瑩,劉代順;慢性支氣管炎患者血清與痰中IL-8含量初步觀察[J];標(biāo)記免疫分析與臨床;2005年03期

4 解慧梅;穆祥;胡格;劉易通;于同泉;路蘋;黃會(huì)嶺;;黃芪多糖對(duì)大鼠腸黏膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌NO的影響[J];北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào);2005年04期

5 畢黎琦,趙吉生,王國光;系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者免疫細(xì)胞系列分化抗原的表達(dá)[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2005年03期

6 穆雪梅,段立公;白細(xì)胞介素6與運(yùn)動(dòng)性骨骼肌損傷綜述[J];首都體育學(xué)院學(xué)報(bào);2005年05期

7 高美華,李武修,馮獻(xiàn)啟,宮兆龍,胡濤,呂俊華;He-Ne激光照射對(duì)腫瘤壞死因子基因表達(dá)的調(diào)控[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1999年06期

8 黃堅(jiān);覃華麗;黃顯凱;周繼紅;;CRH對(duì)大鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響[J];創(chuàng)傷外科雜志;2006年01期

9 王小寧;受體編輯/修正——免疫識(shí)別與耐受的新模式[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2002年10期

10 王自力,索占偉,穆祥,許劍琴;內(nèi)毒素對(duì)微循環(huán)及血管內(nèi)皮細(xì)胞功能影響的研究進(jìn)展[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2003年06期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 祁振強(qiáng);胡廣大;楊照華;張福恩;;一種基于免疫反饋原理的新型控制算法[A];2003中國控制與決策學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2003年

2 馬雪云;牛鐘相;;不同動(dòng)物血清補(bǔ)體對(duì)大腸桿菌的殺滅效果[A];山東農(nóng)業(yè)微生物技術(shù)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

3 田剛;陳代文;;免疫調(diào)節(jié)肽研究進(jìn)展[A];飼料營養(yǎng)研究進(jìn)展——第五屆全國飼料營養(yǎng)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

4 孔慶波;;兩種轉(zhuǎn)移因子對(duì)犬免疫應(yīng)答相關(guān)細(xì)胞因子IL-2和IL-12分泌的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)養(yǎng)犬學(xué)分會(huì)第十二次全國養(yǎng)犬學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2007年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 焦新安;重組卡介苗誘導(dǎo)T細(xì)胞免疫應(yīng)答的分子、細(xì)胞機(jī)理研究[D];揚(yáng)州大學(xué);1999年

2 賈衛(wèi);一種新的白細(xì)胞分化抗原CD226(PTA1)分子結(jié)構(gòu)和功能關(guān)系的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2001年

3 胡旭;胚芽滋養(yǎng)膠囊對(duì)流感病毒感染小鼠肺病變與免疫狀態(tài)影響的初步研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2002年

4 趙世紅;脈絡(luò)膜新生血管發(fā)生機(jī)制及防治的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2003年

5 薛江楠;可溶型免疫抑制性受體9.1C3/LAIR-1分子及其與疾病關(guān)系的研究[D];中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);2003年

6 楊美祥;年齡對(duì)大鼠擴(kuò)弓的影響及其力傳導(dǎo)途徑[D];中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);2003年

7 陳偉紅;HBV野生株和核殼蛋白變異株在HepG2細(xì)胞的HLA-I表達(dá)及調(diào)節(jié)機(jī)制[D];中國人民解放軍第一軍醫(yī)大學(xué);2003年

8 夏榮;白細(xì)胞介素—6誘導(dǎo)相關(guān)新基因的功能研究[D];中國人民解放軍第一軍醫(yī)大學(xué);2003年

9 張耿豪;中藥風(fēng)濕寧防治實(shí)驗(yàn)性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的作用及機(jī)制研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2003年

10 邱罕凡;異種心臟移植排斥反應(yīng)中黏附分子的表達(dá)及LFA-1 mAb、AS-ICAM-1 ODN的作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2003年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 洪偉;淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原-1在腎臟缺血再灌注損傷中的作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2002年

2 李州利;PTA1（CD226）與腎移植患者急性排斥反應(yīng)相關(guān)性的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2002年

3 菅金龍;人CD226基因啟動(dòng)子序列和單核苷酸多態(tài)性研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2002年

4 孟潔如;腫瘤細(xì)胞中TNFR的表達(dá)和nrhTNF對(duì)腫瘤細(xì)胞生長及其NF-κB活性的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2002年

5 張玉平;CML細(xì)胞和bcr/abl多肽誘導(dǎo)TCR Vβ亞家族T細(xì)胞克隆性增殖的研究[D];暨南大學(xué);2002年

6 侍巍;CD15和CEA在肺癌組織中的表達(dá)[D];蘇州大學(xué);2002年

7 許麗娜;鴨Ⅰ型干擾素基因的克隆及原核表達(dá)[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

8 陳曦;HVT疫苗和SEB接種雛雞及其感染vMDV后的免疫學(xué)動(dòng)態(tài)變化[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

9 黨平;機(jī)械壓力對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞p38 MAPK活性及IL-6基因表達(dá)的影響[D];中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);2003年

10 楊玉興;生物方劑分析藥理學(xué)：逍遙散臨床藥動(dòng)及冠心Ⅱ號(hào)實(shí)驗(yàn)藥效的初步研究[D];中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);2003年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 董菁 ,李進(jìn) ,施雙雙 ,皇甫競坤 ,成軍 ,王勤環(huán),洪源 ,李莉;乙型肝炎病毒基因組準(zhǔn)種與變異特點(diǎn)的研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2002年02期

2 邵飛,朱鳳群;乙型肝炎病毒基因分型的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2005年03期

3 張光文;姚新生;馬世武;楊創(chuàng)國;于樂成;侯金林;;慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴細(xì)胞受體譜系分析及互補(bǔ)決定區(qū)3序列測定[J];中華肝臟病雜志;2006年01期

4 鄧洪;崇雨田;韓曉燕;張富程;彭曉謀;高志良;姚集魯;;慢性乙型肝炎患者特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的變化[J];中華肝臟病雜志;2006年10期

5 范振平,王福生,徐東平,褚福亮,施明,周宇,張玲霞;乙型肝炎患者HBcAg特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞的檢測及其與臨床疾病狀態(tài)的關(guān)系[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2004年24期

6 鄧洪;韓曉燕;陳幼明;張富程;彭曉謀;高志良;姚集魯;;慢性HBV感染患者抗原表位特異性CTL與ALT水平無關(guān)[J];中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版);2006年04期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 石統(tǒng)東,吳玉章,邊疆,賈正才,周偉,鄒麗云;乙型肝炎病毒抗原表位模擬多肽誘導(dǎo)CTL應(yīng)答的研究(英文)[J];免疫學(xué)雜志;2003年03期

2 梁聲強(qiáng);杜娟;詹林盛;;乙型肝炎病毒特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞在病毒清除過程中的作用[J];生物技術(shù)通訊;2011年04期

3 王永祥;;用表達(dá)乙型肝炎病毒“核心-前S”雜交蛋白的鼠傷寒和傷寒桿菌無毒株作為口服疫苗[J];國外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊);1995年02期

4 鄧家剛;周程艷;郭宏偉;;乙型肝炎實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的研究進(jìn)展[J];山西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2007年02期

5 祖述憲;;澳大利亞抗原在貝體內(nèi)的發(fā)現(xiàn)及傳播實(shí)驗(yàn)[J];國際流行病學(xué)傳染病學(xué)雜志;1975年02期

6 李秋香;李冬田;徐丹濱;鄭玉廷;任中原;;用~(51)Cr白細(xì)胞粘附抑制實(shí)驗(yàn)檢測乙肝特異性轉(zhuǎn)移因子的抗原特異性[J];天津醫(yī)藥;1993年11期

7 王霞;;比色法檢測乙型肝炎病毒前C區(qū)點(diǎn)突變[J];國外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊);1998年05期

8 龔作炯;;乙型、丙型肝炎病毒的病毒學(xué)及抗病毒靶位[J];內(nèi)科急危重癥雜志;2006年03期

9 劉志華;駱抗先;胡靜;曹虹;何海棠;;乙型肝炎病毒全基因重組腺病毒感染免疫研究[J];肝臟;2006年06期

10 朱丹丹;邵彬;李建鋒;;淺談我國乙型肝炎病毒的研究現(xiàn)狀及展望[J];科協(xié)論壇(下半月);2008年04期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 沃健兒;侯偉;劉克洲;李敏偉;陳離偉;胡中榮;劉榮華;胡敏君;;不同結(jié)合臂長10-23 DNAzymes對(duì)乙型肝炎病毒S基因和C基因表達(dá)的抑制作用[A];2005年浙江省感染病、肝病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

2 王春花;成軍;王欣欣;吳煜;劉妍;郎振為;;乙型肝炎病毒前-前-S蛋白在大腸桿菌中的表達(dá)和純化研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國第九次感染病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

3 孟忠吉;李磊;李新宇;張正茂;張振華;田擁軍;王寶菊;張s，

本文編號(hào)：526187