發(fā)布時(shí)間：2017-07-05 07:18

  本文關(guān)鍵詞：fliY基因在空腸彎曲菌致病性相關(guān)趨化和定植中的作用

  更多相關(guān)文章： 彎曲桿菌 空腸/致病力 小鼠 基因敲除 鞭毛 聚合酶鏈反應(yīng) 印跡法 蛋白質(zhì) 鞭毛馬達(dá)開關(guān)蛋白 運(yùn)動(dòng)力 趨化 定植

【摘要】：目的:構(gòu)建空腸彎曲菌(Campylobacter jejuni)鞭毛馬達(dá)開關(guān)蛋白FliY編碼基因(fliY)敲除突變株,了解FliY蛋白控制細(xì)菌鞭毛運(yùn)動(dòng)的作用及其與細(xì)菌趨化和定植的關(guān)系。方法:采用pBluescript-Ⅱ-SK質(zhì)粒構(gòu)建用于敲除空腸彎曲菌NCTC11168株fliY基因的自殺質(zhì)粒。根據(jù)同源交換原理,利用自殺質(zhì)粒構(gòu)建空腸彎曲菌fliY基因敲除突變株(fliY-)。采用PCR、PCR產(chǎn)物測(cè)序與Western Blot,對(duì)fliY-突變株進(jìn)行鑒定。采用體外菌落遷徙試驗(yàn)、細(xì)菌趨化試驗(yàn)以及小鼠空腸定植試驗(yàn),檢測(cè)fliY-突變株趨化和定植能力。結(jié)果:fliY-突變株生長(zhǎng)曲線與野生株相似,但PCR與測(cè)序及Western Blot結(jié)果顯示,fliY-突變株中fliY基因已被敲除。與野生株比較,fliY-突變株半固體平板上菌落明顯較小(P0.05),對(duì)脫氧膽酸鈉和牛膽汁趨化能力顯著下降(P0.05),在感染小鼠空腸組織標(biāo)本中的細(xì)菌數(shù)(CFU)也明顯減少(P0.05)。結(jié)論:空腸彎曲菌fliY基因功能與調(diào)控鞭毛運(yùn)動(dòng)作用有關(guān),從而對(duì)細(xì)菌趨化和定植過程產(chǎn)生重大影響。
【作者單位】： 浙江省金華職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院;浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)系;浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【關(guān)鍵詞】： 彎曲桿菌 空腸/致病力 小鼠 基因敲除 鞭毛 聚合酶鏈反應(yīng) 印跡法 蛋白質(zhì) 鞭毛馬達(dá)開關(guān)蛋白 運(yùn)動(dòng)力 趨化 定植
【基金】：浙江省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(Y2100230)
【分類號(hào)】：R378.2
【正文快照】： 食源性感染是當(dāng)前威脅人類健康和生命安全的重要公共衛(wèi)生問題�？漳c彎曲菌(Campylobacter jejuni)經(jīng)腸道感染,引起以腹瀉為主的急性腸炎,也可導(dǎo)致反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、Reiter's和Guillain-Barrre綜合征等并發(fā)癥,故該菌是重要的食源性病原菌[1-3]。不少病原菌從消化道進(jìn)入人體后,依

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：521008