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柚皮素對(duì)支氣管上皮細(xì)胞中Smad介導(dǎo)的TGF-β1通路的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-07-03 21:14

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【摘要】:目的:觀察柚皮素對(duì)支氣管上皮細(xì)胞中Smad介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)通路的影響,并研究其可能的機(jī)制。方法:培養(yǎng)HBE細(xì)胞,分為對(duì)照組、TGF-β1組和柚皮素干預(yù)組。柚皮素干預(yù)組分別與25、50和100μmol/L的柚皮素共孵育2 h后,與TGF-β1組一起加入TGF-β1。2 h后用real-time PCR方法檢測(cè)各組細(xì)胞纖溶酶原激活物抑制劑1(PAI-1)mRNA表達(dá)。另外在加入TGF-β1后30 min時(shí),提取對(duì)照組、TGF-β1組和柚皮素高劑量組細(xì)胞總蛋白,用Western blot方法檢測(cè)Smad2水平及磷酸化的Smad2水平,同時(shí)用免疫熒光法檢測(cè)Smad2的核轉(zhuǎn)位。結(jié)果:TGF-β1組的PAI-1mRNA水平較對(duì)照組明顯增高,隨著給予柚皮素劑量的增大,PAI-1 mRNA水平明顯降低。TGF-β1組經(jīng)TGF-β1刺激30 min后,磷酸化的Smad2明顯增加,經(jīng)柚皮素干預(yù)后則隨著柚皮素劑量的增加,Smad2磷酸化明顯受抑制。各組的總Smad2水平無明顯變化。免疫熒光實(shí)驗(yàn)顯示TGF-β1組的細(xì)胞核內(nèi)Smad2明顯增多,而柚皮素干預(yù)組(100μmol/L)的細(xì)胞核內(nèi)Smad2含量明顯減少。結(jié)論:柚皮素可能通過抑制Smad2磷酸化及減少核內(nèi)Smad2含量來影響TGF-β1在支氣管上皮細(xì)胞中的生物功能。
【作者單位】: 南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京醫(yī)院呼吸科;
【關(guān)鍵詞】柚皮素 轉(zhuǎn)化生長因子β Smad
【基金】:國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81100073)
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 支氣管哮喘嚴(yán)重危害人類健康,目前臨床上最常用的治療哮喘藥物是糖皮質(zhì)激素,但是長期使用會(huì)引起免疫力低下、骨質(zhì)疏松、代謝紊亂等不可避免的不良反應(yīng)[1]。柚皮素是柑橘類水果提取物,屬于發(fā)現(xiàn)較早、研究較多的黃酮類化合物。目前已發(fā)現(xiàn)柚皮素具有抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗

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