本文關(guān)鍵詞：單純皰疹病毒2型潛伏相關(guān)轉(zhuǎn)錄本開放讀碼框的表達(dá)及其抗凋亡功能分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究單純皰疹病毒2型潛伏相關(guān)轉(zhuǎn)錄體(LAT)開放讀碼框(ORF)對(duì)凋亡誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)Vero細(xì)胞凋亡的影響。方法:PCR擴(kuò)增LAT ORF1、ORF2、ORF3片段,構(gòu)建重組質(zhì)粒pEGFPORF1、pEGFP-ORF2、pEGFP-ORF3,重組質(zhì)粒pEGFP-ORF1、pEGFP-ORF2、pEGFP-ORF3轉(zhuǎn)染Vero細(xì)胞;RT-PCR鑒定ORF1、ORF2、ORF3的表達(dá)。用凋亡誘導(dǎo)劑放線菌素D、順鉑、5-氟尿嘧啶(5-FU)誘導(dǎo)Vero細(xì)胞凋亡,通過熒光顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)的改變,MTT檢測(cè)細(xì)胞活性,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。結(jié)果:雙酶切和測(cè)序確認(rèn)pEGFP-ORF1、pEGFP-ORF2、pEGFP-ORF3構(gòu)建成功,RT-PCR表明這3個(gè)真核表達(dá)載體能在Vero細(xì)胞中高效表達(dá)。轉(zhuǎn)染各種pEGFP-ORF的Vero細(xì)胞經(jīng)凋亡誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)后,細(xì)胞形態(tài)正常。MTT結(jié)果表明轉(zhuǎn)染了各種重組質(zhì)粒pEGFP-ORF的Vero細(xì)胞經(jīng)凋亡誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)后Vero細(xì)胞活性與未經(jīng)任何處理的正常對(duì)照組相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但高于凋亡誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)凋亡的Vero細(xì)胞組及與轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒pEGFP-C2,且經(jīng)凋亡誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)的Vero細(xì)胞組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果表明,轉(zhuǎn)染各種重組質(zhì)粒pEGFP-ORF且經(jīng)凋亡誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)凋亡組與正常對(duì)照組凋亡率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而顯著低于轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒pEGFP-C2且經(jīng)凋亡誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)凋亡組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 HSV-2 LAT ORF對(duì)凋亡誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)的Vero細(xì)胞的凋亡具有抵抗作用。
【作者單位】： 廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院;華南理工大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 單純皰疹病毒 LAT ORFs 凋亡誘導(dǎo)劑 凋亡 Vero細(xì)胞
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(30972666,81071401,81171511)
【分類號(hào)】：R373
【正文快照】： 單純皰疹病毒(herpes simplex virus,HSV)是人類常見病毒性疾病的病原體,初次感染后,皰疹病毒會(huì)潛伏在人體神經(jīng)節(jié)中,各種非特異條件刺激下病毒會(huì)被激活,引起復(fù)發(fā)感染并出現(xiàn)相應(yīng)的臨床癥狀。皰疹病毒潛伏感染和再激活的機(jī)制還不是十分清楚,臨床上尚無有效的抗病毒藥物可以徹底

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 呂芳彪;單純皰疹病毒II型LAT基因開放讀碼框1抗細(xì)胞凋亡作用的研究[D];華南理工大學(xué);2013年

【相似文獻(xiàn)】

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 呂芳彪;單純皰疹病毒II型LAT基因開放讀碼框1抗細(xì)胞凋亡作用的研究[D];華南理工大學(xué);2013年

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  本文關(guān)鍵詞：單純皰疹病毒2型潛伏相關(guān)轉(zhuǎn)錄本開放讀碼框的表達(dá)及其抗凋亡功能分析，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：501649