本文關(guān)鍵詞：含B7-H1 shRNA基因的慢病毒表達(dá)載體的制備及其抑制效果鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的設(shè)計針對B7-H1的shRNA序列,構(gòu)建慢病毒表達(dá)載體,包裝成病毒顆粒后檢測其對U251細(xì)胞中B7-H1基因的沉默效果。方法設(shè)計3對針對B7-H1 mRNA的shRNA,化學(xué)合成正義鏈和反義鏈,退火后與酶切后的pLKO.1載體進行連接。測序正確后包裝成病毒并感染U251細(xì)胞,分別用qRT-PCR及Western blot法檢測干擾效果。結(jié)果 qRT-PCR及Westernblot結(jié)果證實設(shè)計的3條RNA干擾序列中有2條可有效沉默U251細(xì)胞中B7-H1的表達(dá)。結(jié)論所制備的針對B7-H1的shR-NA慢病毒能特異性沉默B7-H1。
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院神經(jīng)外科;第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部免疫學(xué)教研室;海軍總醫(yī)院神經(jīng)外科;
【關(guān)鍵詞】： B-H shRNA 慢病毒載體 UMG細(xì)胞
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81171924)
【分類號】：R392.12
【正文快照】： T淋巴細(xì)胞的活化及特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答的產(chǎn)生和維持不僅需要MHC-抗原肽復(fù)合物提供的第一信號,還需要抗原提呈細(xì)胞(antigen presenting cell,APC)表面的協(xié)同刺激分子分子提供的第二信號。協(xié)同刺激分子又分為兩類,一類是引起細(xì)胞活化的刺激性分子,這類分子在T細(xì)胞活化階段發(fā)揮

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 華東;孫靜;茆勇;吳玉玉;周桓;朱明;;B7-H1分子在腫瘤微環(huán)境中的特異表達(dá)及對調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的誘導(dǎo)促進作用[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2011年03期

2 張冠華;蔣小兵;張湘衡;賽克;楊群英;陳忠平;牟永告;;人腦膠質(zhì)瘤組織中轉(zhuǎn)化生長因子β1表達(dá)與Treg浸潤的關(guān)系[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2011年06期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 韋浩;陳春美;楊衛(wèi)忠;;調(diào)節(jié)性T細(xì)胞與膠質(zhì)瘤免疫研究進展[J];國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2011年06期

2 姜祖光;李慎柯;岳文彬;;肝癌組織中轉(zhuǎn)化生長因子beta1表達(dá)與Treg浸潤的關(guān)系及臨床意義[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2012年15期

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 F. Xiao-Feng Qin;;Dynamic Behavior and Function of Foxp3~+ Regulatory T Cells in Tumor Bearing Host[J];Cellular & Molecular Immunology;2009年01期

2 牟永告;王振寧;史泓瀏;劉曉梅;魏大年;賽克;張湘衡;張冠華;李振業(yè);陳忠平;;核轉(zhuǎn)錄因子FOXP3蛋白在人腦星形細(xì)胞腫瘤組織中的表達(dá)及臨床意義[J];中國病理生理雜志;2010年08期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳鵬;馬忠森;王秀麗;李博;任錦;胡娛新;郟博;劉鋒;石瑩;;人HMGN5基因shRNA慢病毒載體構(gòu)建與RNAi效率的鑒定[J];中國實驗診斷學(xué);2011年01期

2 李宏圖;施萍;龐希寧;;REST/NRSF基因shRNA慢病毒載體的構(gòu)建與鑒定[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年32期

3 李振宇;徐開林;潘秀英;鹿群先;何徐彭;孫海英;;慢病毒載體介導(dǎo)不同內(nèi)部啟動子驅(qū)動綠色熒光蛋白表達(dá)效率[J];江蘇醫(yī)藥;2006年05期

4 馬強;李明;董文其;吳英松;;一種新型慢病毒載體制備體系的初步建立[J];生物化學(xué)與生物物理進展;2007年08期

5 馬強;李明;董文其;吳英松;;一種新型慢病毒載體制備方法的建立[J];生物工程學(xué)報;2007年05期

6 周磊;陳婕;徐欣;張敏;張新;;利用重組慢病毒載體建立穩(wěn)定表達(dá)綠色熒光蛋白細(xì)胞系[J];中國臨床醫(yī)學(xué);2009年02期

7 張樂;官國先;;SATB1基因RNAi慢病毒載體的構(gòu)建與鑒定[J];中國實用醫(yī)藥;2009年14期

8 羅毅;王小聰;鄒萍;;Pir-b基因慢病毒載體的構(gòu)建和表達(dá)[J];中國實驗血液學(xué)雜志;2009年04期

9 沈上杭;王占祥;陳玉英;毛賀輝;;HIF-1α基因RNAi慢病毒載體的構(gòu)建與鑒定[J];中國實用醫(yī)藥;2010年04期

10 毛賀輝;蘇國強;;FAK基因RNAi慢病毒載體的構(gòu)建與鑒定[J];腫瘤防治研究;2010年12期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉峰;肖興鵬;田玉科;;大鼠蛋白激酶Cγ可控shRNA慢病毒的構(gòu)建與鑒定[A];2011年全國醫(yī)藥學(xué)術(shù)論壇交流會暨臨床藥學(xué)與藥學(xué)服務(wù)研究進展培訓(xùn)班論文集[C];2011年

2 王云姣;程智剛;于鵬;李靖貽;白念岳;賀正華;楊勝輝;郭曲練;;攜帶dream基因shRNA的慢病毒載體的構(gòu)建及其對CCI大鼠的鎮(zhèn)痛作用[A];中華醫(yī)學(xué)會疼痛學(xué)分會第八屆年會暨CASP成立二十周年論文集[C];2009年

3 沈周俊;張成靜;;靶向整合素β1的shRNA載體的構(gòu)建與鑒定[A];華東六省一市泌尿外科學(xué)術(shù)年會暨2011年浙江省泌尿外科、男科學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2011年

4 薛美思;劉毅;;攜帶人胰島素基因慢病毒載體轉(zhuǎn)染臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的實驗研究[A];中華醫(yī)學(xué)會整形外科學(xué)分會第十一次全國會議、中國人民解放軍整形外科學(xué)專業(yè)委員會學(xué)術(shù)交流會、中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會醫(yī)學(xué)美容專業(yè)委員會全國會議論文集[C];2011年

5 劉莉;馬爽;顧海倫;任亞浩;于飛;安麗;楊軍;;慢病毒載體介導(dǎo)的SOCS-3 RNA干擾對大鼠脂肪細(xì)胞代謝影響的實驗研究[A];膳食變遷對民眾健康的影響：挑戰(zhàn)與應(yīng)對——第二屆兩岸四地營養(yǎng)改善學(xué)術(shù)會議學(xué)術(shù)報告及論文摘要匯編[C];2010年

6 郭瀛軍;郭嘉;張術(shù);王開宇;高遠(yuǎn)艦;何穎;孫樹漢;;慢病毒載體在疫苗研究中的應(yīng)用[A];2005全國第二屆核酸疫苗研討會論文集[C];2005年

7 宋達(dá)疆;黃曉元;任利成;楊興華;肖目張;王雙;;TREM-1基因RNAi慢病毒載體的構(gòu)建及功能初步檢測[A];中華醫(yī)學(xué)會燒傷外科學(xué)分會2009年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2009年

8 方_g聃;孫鳳強;王娟;張帆;張敬之;;cHS4和SV40的2×USE的聯(lián)合作用能夠有效降低慢病毒載體的通讀率[A];遺傳學(xué)與社會可持續(xù)發(fā)展——2010中國青年遺傳學(xué)家論壇論文摘要匯編[C];2010年

9 徐雙年;陳潔平;;小鼠c-myb特異性shRNA慢病毒表達(dá)載體的構(gòu)建和測序鑒定[A];第13屆全國實驗血液學(xué)會議論文摘要[C];2011年

10 石瑛;程時剛;陳旭;肖傳國;;大鼠TORC1基因重組慢病毒的構(gòu)建與鑒定[A];第十五屆全國泌尿外科學(xué)術(shù)會議論文集[C];2008年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張?zhí)锟?基因療法:沉寂之后的復(fù)蘇?[N];南方周末;2009年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 蘇冠華;肝細(xì)胞生長因子基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植的促血管新生作用[D];華中科技大學(xué);2010年

2 楊志峰;應(yīng)用慢病毒載體介導(dǎo)RNA干擾在MCF-7細(xì)胞中剔降IKKα基因和制備轉(zhuǎn)基因小鼠模型的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

3 于莉娜;Tiam1轉(zhuǎn)基因小鼠的建立及其功能研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2009年

4 江n;低強度脈沖超聲波對大鼠脂肪干細(xì)胞增殖和成骨分化的影響及成骨機制的初步研究[D];華中科技大學(xué);2012年

5 胡威;抑制Ppif基因的表達(dá)減輕腎缺血再灌注損傷的實驗研究[D];華中科技大學(xué);2010年

6 楊歡;慢病毒介導(dǎo)中國人產(chǎn)甲酸草酸桿菌中草酸分解基因FRC和OXC轉(zhuǎn)染肝干細(xì)胞的實驗研究[D];華中科技大學(xué);2011年

7 黃鋼;LPS刺激調(diào)控U937細(xì)胞表達(dá)B7-H1機制的實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2005年

8 陳智鴻;AQP5對人呼吸道黏膜下腺細(xì)胞水跨膜通透性及粘蛋白合成、分泌影響的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2006年

9 張存;B7-H1疫苗增強HER-2疫苗抗腫瘤免疫效應(yīng)的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2008年

10 王翔;RNA干擾阻斷TGFβ1對人顳動脈炎的影響及其機制[D];中南大學(xué);2009年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬貴亮;慢病毒載體介導(dǎo)的TNF-α基因在臍血間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)的實驗研究[D];青島大學(xué);2010年

2 欒沖;可誘導(dǎo)表達(dá)hBMP-2基因的慢病毒載體的構(gòu)建及其慢病毒的產(chǎn)生和鑒定[D];青島大學(xué);2010年

3 陳春;攜帶大鼠Foxp3基因慢病毒載體的構(gòu)建及慢病毒包裝的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

4 劉偉;小鼠趨化因子MIP-1α和共刺激分子B7-1基因重組慢病毒載體的構(gòu)建及鑒定[D];福建醫(yī)科大學(xué);2011年

5 姚志芳;人誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞（iPS）系的建立[D];南方醫(yī)科大學(xué);2010年

6 智深深;Islet-1在C_3H_(10)T1/2細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞特異性分化過程中的作用研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

7 陳新磊;選擇性下調(diào)大鼠ACC神經(jīng)元NR2B受體表達(dá)的小RNA干擾慢病毒載體的構(gòu)建[D];山東大學(xué);2010年

8 于爽;慢病毒肌肉注射介導(dǎo)人FVIII基因在大鼠體內(nèi)的表達(dá)[D];延邊大學(xué);2006年

9 林長貴;慢病毒載體介導(dǎo)nanog基因修飾小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞[D];福建醫(yī)科大學(xué);2008年

10 李偉;大鼠CRX基因的重組慢病毒載體LV-Rho-EGFP/CRX的構(gòu)建和表達(dá)[D];中南大學(xué);2008年

  本文關(guān)鍵詞：含B7-H1 shRNA基因的慢病毒表達(dá)載體的制備及其抑制效果鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：493508