本文關(guān)鍵詞：來航雞FOXL2蛋白單克隆抗體的制備，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:制備來航雞FOXL2蛋白的單克隆抗體。方法:利用生物信息學(xué)的方法分別預(yù)測來航雞FOXL2蛋白最有可能的線性表位,并人工合成多肽,高效液相色譜分析其純度,與KLH偶聯(lián)后免疫小鼠制備其單克隆抗體,用間接ELISA方法和免疫印跡進(jìn)行篩選,然后對篩選出來的細(xì)胞株進(jìn)行一般性質(zhì)測定、親和常數(shù)測定、IC50測定。結(jié)果:合成多肽純度95%,細(xì)胞融合后,其平均融合率為75%,并用間接ELISA方法和Western blot篩選出1條可與FOXL2蛋白發(fā)生明顯反應(yīng)的細(xì)胞株C2;經(jīng)測定,C2細(xì)胞株上清效價為1/128,腹水效價為1/256,其亞型屬于IgG1,雜交瘤細(xì)胞染色體為102條,腹水單抗的蛋白含量為1.576 g/L,其親和常數(shù)為2.12×106L/mol,IC50值為0.082 47μg/L。結(jié)論:成功制備了FOXL2蛋白單克隆抗體,為下一步深入研究FOXL2蛋白奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 河南科技學(xué)院動物科學(xué)院;河南科技學(xué)院新科學(xué)院;新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心;
【關(guān)鍵詞】： 來航雞 FOXL 單克隆抗體 表位
【分類號】：R392
【正文快照】： FOXL2基因(winged helix/forkhead transcriptionfactor gene 2,FOXL2)屬Fox超家族成員。據(jù)研究,FOXL2基因不但與人類BPES、POF、顆粒細(xì)胞瘤等諸多疾病的發(fā)生有關(guān)[1-4],還被認(rèn)為在動物性別決定、性別反轉(zhuǎn)、卵巢發(fā)育、維持動物第二性征等方面發(fā)揮著重要作用[5-7]。2002年,Fuhre

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