本文關(guān)鍵詞：狂犬病病毒CVS-11株全序列測定及其感染性克隆的構(gòu)建，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：【目的】測定狂犬病病毒標(biāo)準(zhǔn)攻擊毒CVS-11株全基因組序列,構(gòu)建CVS-11株全長cDNA感染性克隆�！痉椒ā縍T-PCR擴(kuò)增CVS-11株全基因組得到有重疊的12個(gè)片段,分別克隆至平端載體pEASY-Blunt,測定CVS-11株全基因組核苷酸序列。用軟件DNAMAN分析CVS-11全序列單一性酶切位點(diǎn),設(shè)計(jì)引物,分4段擴(kuò)增CVS-11全基因組,擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)多步酶切、連接逐步插入至真核表達(dá)載體pcDNA3.1,獲得全長質(zhì)粒pcDNA3.1-CVS-11。pcDNA3.1-CVS-11與其輔助質(zhì)粒pcDNA3.1-N、P、L、G共轉(zhuǎn)染NA細(xì)胞,經(jīng)免疫熒光染色、RT-PCR鑒定,拯救得到重組病毒rCVS-11�！窘Y(jié)果】CVS-11全基因組序列由11 927個(gè)核苷酸組成,編碼5個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白,結(jié)構(gòu)基因排列同已知的其他狂犬病病毒一致。成功構(gòu)建了CVS-11全長cDNA重組質(zhì)粒pcDNA3.1-CVS-11和其輔助質(zhì)粒pcDNA3.1-N、P、L和G。經(jīng)共轉(zhuǎn)染,成功拯救了重組病毒rCVS-11。【結(jié)論】CVS-11株感染性克隆的構(gòu)建為從分子水平上進(jìn)一步研究狂犬病病毒奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 吉林大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所;吉林省人獸共患病預(yù)防與控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 狂犬病病毒 CVS- 全序列測定 感染性cDNA克隆
【基金】：公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201103032) “十一五”國家科技支撐計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目(2010BAD04B03)~~
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所,3吉林省人獸共患病預(yù)防與控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,長春130122狂犬病病毒(rabies virus)屬于彈狀病毒科狂犬病病毒屬,其基因組大小約12 kb,是單股負(fù)鏈非分節(jié)段RNA,編碼5個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白�？袢〔《灸芨腥径喾N動(dòng)物和人,引起神經(jīng)性疾病,感染病死率高達(dá)100%。標(biāo)

【相似文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：狂犬病病毒CVS-11株全序列測定及其感染性克隆的構(gòu)建，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：469147