本文關(guān)鍵詞：T細胞通過產(chǎn)生IFN-γ參與單核細胞增生李斯特菌感染免疫，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景單核細胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,Lm)是一種革蘭陽性兼性厭氧菌,人體感染后一般表現(xiàn)為發(fā)熱、胃腸炎,但嬰幼兒、老年人以及免疫力低下人群感染后較為嚴重,可表現(xiàn)為敗血癥、腦膜炎和單核細胞極度增生等。該菌在4℃的環(huán)境中仍可生長繁殖,是冷藏食品威脅人類健康的主要病原菌之一。干擾素γ(IFN-γ)主要由活化的T細胞和DC細胞產(chǎn)生,它在胞內(nèi)菌感染中起到保護作用。在單核細胞增生李斯特氏菌感染的小鼠中,T細胞可通過分泌大量的IFN-γ抑制細菌載量,IFN-γ可進一步活化單核巨噬細胞、NK細胞等參與細菌清除。國內(nèi)外關(guān)于IFN-γ在人體感染單核細胞增生李斯特氏菌的作用較少報道,本課題擬以健康體檢者為對照,采用ELISA法檢測患者與健康對照者外周血血清IFN-γ含量,采用q-PCR的方法檢測外周血單個核細胞IFN-γmRNA含量,采用流式細胞術(shù)的方法檢測分泌IFN-γ的T細胞比例,探索T細胞能否通過IFN-γ參與單核細胞增生李斯特氏菌感染后的免疫。目的本課題擬以健康體檢者為對照,檢測外周血IFN-γmRNA及蛋白表達,同時檢測IFN-γ~+CD4~+T細胞比例,探索T細胞能否通過分泌IFN-γ參與單核細胞增生李斯特氏菌感染后免疫,為機體抗Lm感染免疫機制和減毒Lm的臨床應(yīng)用提供初步理論依據(jù)。方法1.研究對象:2013年5月-2015年5月于駐馬店市中心醫(yī)院感染科確診為Lm感染者納入Lm組,同期體檢科健康體檢者納入HC對照組。2.樣本收集和處理:收集Lm患者和HC對照者空腹血樣10ml,以肝素鋰抗凝,分離血漿凍存,并采用Ficoll分離法分離外周血單個核細胞,備用。3.血漿IFN-γ水平的檢測:采用人IFN-γELISA檢測試劑盒,檢測血漿IFN-γ含量。4.IFN-γmRNA的檢測:提取Lm患者和HC對照者外周血單個核細胞總RNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄后,采用實時熒光定量PCR檢測IFN-γmRNA的表達情況。5.IFN-γ~+CD4~+T細胞比例檢測:采用多色熒光抗體結(jié)合流式細胞術(shù)檢測并分析樣本中IFN-γ~+CD4~+T細胞比例。6.統(tǒng)計學(xué)方法:計量數(shù)據(jù)以均數(shù)加減標(biāo)準差(喁±s)表示,兩組間差異比較采用t檢驗,各組數(shù)據(jù)陽性率比較采用卡方檢驗。檢驗水準α=0.05,P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意。結(jié)果1.標(biāo)本分組情況:Lm組共計16例,HC組共計20例,性別、年齡無統(tǒng)計學(xué)差異。2.酶聯(lián)免疫法ELISA檢測結(jié)果:Lm組血漿IFN-γ含量為(7.26±4.99)pg/ml,高于HC組血漿IFN-γ含量(3.21±1.22)pg/ml,且有顯著統(tǒng)計學(xué)差異。3.熒光定量PCR檢測結(jié)果:Lm組外周血單個核細胞IFN-γmRNA相對表達量(118.15±34.35)倍,健康對照組為(99.24±19.46)倍,前者高于后者且結(jié)果有顯著統(tǒng)計學(xué)差異。4.流式細胞術(shù)結(jié)果:Lm組IFN-γ~+CD4~+T細胞比例為(8.61±5.22)%,HC組IFN-γ~+CD4~+T細胞比例為(5.76±1.23)%,前者高于后者且有統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)論1.Lm感染患者外周血IFN-γmRNA及蛋白表達均高于健康對照者;2.Lm感染患者外周血IFN-γ~+CD4~+T細胞比例增加,即T細胞可通過高表達IFN-γ參與Lm感染。
【關(guān)鍵詞】：單核細胞增生李斯特氏菌 T細胞 γ干擾素 感染免疫
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R378
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-12
• 1 材料和方法12-22
• 2 結(jié)果22-26
• 3 討論26-28
• 4 小結(jié)28-29
• 參考文獻29-31
• 綜述 細胞自主應(yīng)答在單核細胞增生性李斯特菌感染中的作用31-38
• 參考文獻35-38
• 附錄 縮寫詞中英文對照38-39
• 在攻讀學(xué)位期間發(fā)表的文章39-40
• 致謝40-41
• 個人簡歷41

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本文編號：468633