發(fā)布時(shí)間：2017-06-20 22:10

  本文關(guān)鍵詞：祛痰化瘀方對(duì)PCOS模型大鼠內(nèi)分泌及卵巢纖維化的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探索祛痰化瘀方對(duì)脫氫表雄酮(Dehydroepiandrosterone,DHEA)誘導(dǎo)的多囊卵巢綜合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)模型大鼠促卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)、睪酮(T)、卵巢間質(zhì)TGF-β1表達(dá)及顆粒細(xì)胞層厚度的影響,探討祛痰化瘀方治療多囊卵巢綜合征的作用機(jī)制,實(shí)際是為臨床應(yīng)用祛痰化瘀方治療多囊卵巢綜合征提供理論依據(jù)。方法:選取SD雌性大鼠80只,采用隨機(jī)分組法,分為空白組(22只)與病理模型組(58只)。自22日齡起,持續(xù)20天給予病理模型組頸背部皮下注射脫氫表雄酮(DHEA)6mg/100g體重+0.2ml大豆油混合劑,建立PCOS模型;空白組大鼠每天皮下注射的油劑0.2ml。造模完成后,取空白組、病理模型組各10只大鼠進(jìn)行模型評(píng)估。剩余空白組(12只)及病理模型組(48只)大鼠均進(jìn)行藥物干預(yù)實(shí)驗(yàn)。病理模型組平均分為祛痰化瘀方高劑量組,祛痰化瘀方低劑量組,二甲雙胍組,模型組�？瞻捉M、模型組同其體積生理鹽水灌胃。祛痰化瘀方高、低劑量組、二甲雙胍組根據(jù)Bios氏法計(jì)算千克體重劑量,計(jì)算用藥量。連續(xù)給藥28天后,鏡下觀(guān)察各組大鼠的陰道脫落細(xì)胞涂片;當(dāng)?shù)鹊矫拷M大鼠均處于同一動(dòng)情周期的時(shí)候,禁食12h,隨后以10%的水合氯醛0.3ml/100g進(jìn)行麻醉,腹主動(dòng)脈取血,分離血清,-20℃保存,應(yīng)用ELISA試劑盒檢測(cè)FSH、LH、T的濃度。剝除大鼠左側(cè)卵巢后稱(chēng)重,迅速放置于已經(jīng)準(zhǔn)備好的4%的多聚甲醛溶液中固定,固定12-24小時(shí),脫水透明后,石蠟包埋,切片,并采用HE染色法染色組織,IPP測(cè)量卵泡顆粒細(xì)胞層厚度;免疫組化法檢測(cè)卵巢間質(zhì)TGF-β1的表達(dá)。結(jié)果:1.模型評(píng)估:(1)動(dòng)情周期:各組大鼠經(jīng)過(guò)10天的陰道涂片后發(fā)現(xiàn):空白組大鼠動(dòng)情期以陰道開(kāi)口日為第一日,并在24小時(shí)后進(jìn)入動(dòng)情后期,空白組大鼠動(dòng)情周期規(guī)律(4-5天);模型組大鼠的動(dòng)情周期變化不規(guī)律,或者無(wú)明顯的動(dòng)情周期。(2)模型組大鼠與空白組大鼠LH水平相比,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P0.01;空白組FSH與模型組相比有差異,P0.05;血清T水平,模型組與空白組相比較有差異,P0.05。(3)模型組大鼠左側(cè)卵巢重量與空白組相比,P0.05,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(4)模型組大鼠體重指數(shù)(BMI)與空白組相比,P0.05,不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(5)空白組大鼠卵巢間質(zhì)TGF-β1表達(dá)明顯區(qū)別于模型組,P0.01,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。模型組大鼠卵巢顆粒細(xì)胞層厚度較空白組薄,比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05。2.給藥后評(píng)估:(1)通過(guò)對(duì)大鼠陰道涂片的觀(guān)察,空白組大鼠動(dòng)情周期規(guī)律;而模型組的大鼠動(dòng)情周期紊亂。通過(guò)藥物干預(yù)后,祛痰化瘀高、低劑量組、二甲雙胍組大鼠的動(dòng)情周期基本恢復(fù)規(guī)律。(2)模型組大鼠血清LH表達(dá)程度較正常組明顯升高,P0.01,具有顯著差異。痰化瘀高劑量組LH水平高于二甲雙胍組,對(duì)比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.01。祛痰化瘀方低劑量組LH水平與二甲雙胍組比較無(wú)意義,P0.05;空白組FSH為(2.39±0.60)m IU/ml,模型組為(2.06±0.54)m IU/ml,P0.01,具有顯著差異。二甲雙胍、祛痰化瘀方高劑量、祛痰化瘀方低劑量對(duì)升高多囊卵巢綜合征大鼠血清FSH水平均有療效,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.01。各組大鼠血清T水平與模型組相比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05。(3)祛痰化瘀方高劑量、祛痰化瘀方低劑量、二甲雙胍組大鼠左側(cè)卵巢重量與模型組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.01。(4)各組大鼠體重指數(shù)經(jīng)過(guò)數(shù)據(jù)分析顯示,空白組、二甲雙胍組、祛痰化瘀方低劑量組、祛痰化瘀方高劑量組和模型組間無(wú)顯著差異,P0.05,不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(5)卵巢中TGF-β1表達(dá),高劑量組與空白組表達(dá)無(wú)差異P0.05,中藥高劑量組與二甲雙胍組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.05。卵巢顆粒細(xì)胞層厚度,高劑量組與空白組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P0.05,其余各組與之比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.01。結(jié)論:1.祛痰化瘀方通過(guò)降低多囊卵巢綜合征大鼠LH水平,升高FSH水平,改善多囊卵巢綜合征模型大鼠內(nèi)分泌紊亂情況,從而恢復(fù)卵巢功能,促進(jìn)正常排卵。2.祛痰化瘀方可降低TGF-β1在多囊卵巢綜合征大鼠卵巢間質(zhì)中的表達(dá),降低卵巢纖維化程度。3.祛痰化瘀方能夠使多囊卵巢綜合征大鼠卵泡顆粒細(xì)胞層厚度增厚,促進(jìn)卵泡生長(zhǎng)、成熟及排出。
【關(guān)鍵詞】：多囊卵巢綜合征 祛痰化瘀方 激素水平 TGF-β1 顆粒細(xì)胞層
【學(xué)位授予單位】：河南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R285.5;R-332
【目錄】：

• 英文縮略語(yǔ)表4-7
• 摘要7-9
• Abstract9-12
• 前言12-14
• 材料與方法14-21
• 1.實(shí)驗(yàn)材料14-15
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物14
• 1.2 飼料14
• 1.3 實(shí)驗(yàn)用藥14
• 1.4 主要試劑14-15
• 1.5 主要儀器15
• 2.實(shí)驗(yàn)方法15-20
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物15
• 2.2 造模方法15
• 2.3 模型動(dòng)物評(píng)估15-19
• 2.4 分組及給藥方法19
• 2.5 標(biāo)本采集與指標(biāo)檢測(cè)19-20
• 3.圖像分析和統(tǒng)計(jì)學(xué)處理20-21
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-26
• 1.一般狀態(tài)觀(guān)察21
• 2.動(dòng)物模型評(píng)估21-22
• 3.多囊卵巢大鼠給藥后評(píng)估22-26
• 理論討論26-34
• 1.PCOS大鼠模型的建立26
• 1.1 DHEA致PCOS大鼠模型的理論基礎(chǔ)26
• 1.2 DHEA致PCOS大鼠模型是成熟的模型26
• 2.多囊卵巢綜合征的中醫(yī)認(rèn)識(shí)26-27
• 2.1 古代醫(yī)家對(duì)多囊卵巢綜合征的認(rèn)識(shí)26-27
• 2.2 現(xiàn)代中醫(yī)對(duì)多囊卵巢綜合征的認(rèn)識(shí)27
• 3.祛痰化瘀方治療PCOS的理論依據(jù)27-29
• 3.1 痰濕血瘀是多囊卵巢綜合征的主要病因27-28
• 3.2 祛痰化瘀為治療多囊卵巢綜合征之法28
• 3.3 祛痰化瘀方藥物組成及方藥分析28-29
• 4.歷代醫(yī)家對(duì)單味中藥的認(rèn)識(shí)及藥理研究29-32
• 5.祛痰化瘀方對(duì)PCOS大鼠模型激素水平的影響和降低卵巢纖維化作用的探討32-33
• 5.1 祛痰化瘀方對(duì)PCOS大鼠模型激素水平的影響32-33
• 5.2 祛痰化瘀方對(duì)PCOS模型大鼠降低卵巢纖維化和顆粒細(xì)胞層厚度的影響33
• 6.本研究的創(chuàng)新和不足之處33-34
• 6.1 實(shí)驗(yàn)特點(diǎn)33
• 6.2 不足之處33-34
• 結(jié)論34-35
• 致謝35-36
• 參考文獻(xiàn)36-39
• 附錄1 陰道脫落細(xì)胞涂片39-40
• 附錄2 文獻(xiàn)研究40-47
• 參考文獻(xiàn)45-47
• 附錄3 在校期間論文論著情況47

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