本文關(guān)鍵詞：Nrf2過(guò)表達(dá)對(duì)乙醇刺激下肝星狀細(xì)胞激活與增殖及合成Ⅰ型膠原的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討核因子E2相關(guān)因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)過(guò)表達(dá)對(duì)乙醇誘導(dǎo)下大鼠肝星狀細(xì)胞系HSC-T6激活與增殖及I型膠原mRNA及蛋白表達(dá)水平的影響。方法:采用脂質(zhì)體介導(dǎo)法對(duì)HSC-T6進(jìn)行pEGFP-Nrf2重組質(zhì)粒及pEGFP-N1空載質(zhì)粒瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,將細(xì)胞分為正常對(duì)照組、乙醇刺激組、乙醇刺激+pEGFP-Nrf2質(zhì)粒組和乙醇刺激+pEGFP-N1空載質(zhì)粒組。采用RT-PCR及Western blotting方法對(duì)HSC-T6中Nrf2、Ⅰ型膠原及α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)mRNA及蛋白表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè),采用MTT法對(duì)HSC-T6細(xì)胞增殖水平進(jìn)行檢測(cè),采用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)HSC-T6細(xì)胞周期分布進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果:(1)熒光顯微鏡下觀察顯示pEGFP-Nrf2質(zhì)粒成功轉(zhuǎn)染HSC-T6,轉(zhuǎn)染后48h Nrf2 mRNA及蛋白表達(dá)水平較其余組顯著升高(P0.05)。(2)乙醇刺激組與乙醇刺激+pEGFP-N1空載質(zhì)粒組之間細(xì)胞增殖水平、Ⅰ型膠原、α-SMA mRNA及蛋白表達(dá)水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),均明顯高于正常對(duì)照組(P0.05),細(xì)胞周期分布G1期比例下降,S期比例升高(P0.05),而乙醇刺激+pEGFP-Nrf2質(zhì)粒組細(xì)胞增殖水平及I型膠原、α-SMA mRNA及蛋白表達(dá)水平與乙醇刺激組及乙醇刺激+pEGFP-N1空載質(zhì)粒組相比均顯著下降(P0.05),細(xì)胞周期分布G1期比例顯著上升,S期比例顯著下降(P0.05),呈G1/S期阻滯。結(jié)論:Nrf2過(guò)表達(dá)可顯著抑制乙醇對(duì)HSC-T6 Ⅰ型膠原及α-SMA mRNA及蛋白表達(dá)的促進(jìn)作用,使HSC-T6細(xì)胞周期發(fā)生G1/S期阻滯,抑制乙醇誘導(dǎo)的HSC-T6增殖水平的升高,提示其對(duì)乙醇誘導(dǎo)的HSC-T6細(xì)胞活化具有負(fù)性調(diào)控作用。
【作者單位】： 南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院消化內(nèi)科 江西省分子重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 肝纖維化 肝星狀細(xì)胞 核因子E相關(guān)因子 Ⅰ型膠原 α-平滑肌肌動(dòng)蛋白
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.30360037)
【分類號(hào)】：R365
【正文快照】： 氧化應(yīng)激致肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cells,HSCs)活化是酒精性肝纖維化(alcoholic liver fibro-sis,ALF)發(fā)生的中心環(huán)節(jié)[1]。過(guò)度攝入的乙醇及其代謝產(chǎn)物是引起肝臟內(nèi)氧化應(yīng)激的主要介質(zhì),當(dāng)肝內(nèi)處于持續(xù)氧化應(yīng)激的環(huán)境時(shí),肝星狀細(xì)胞被激活,表型向肌成纖維樣細(xì)胞(myofibrob

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本文編號(hào)：464652