小鼠軟骨內(nèi)成骨過程中軟骨細(xì)胞發(fā)育與淋巴管生長的研究
本文關(guān)鍵詞:小鼠軟骨內(nèi)成骨過程中軟骨細(xì)胞發(fā)育與淋巴管生長的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:研究目的:本論文通過觀察軟骨細(xì)胞Ⅱ型膠原,以研究軟骨細(xì)胞在軟骨內(nèi)成骨過程中的發(fā)育情況,并通過檢測淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物L(fēng)YVE-1與促淋巴管生長因子VEGF-C的表達(dá),闡明軟骨內(nèi)成骨過程中VEGF-C對軟骨成骨過程中淋巴管生長發(fā)育的影響,并分析了淋巴管與軟骨內(nèi)成骨的關(guān)系,并為軟骨內(nèi)成骨過程以及生長軟骨損傷的修復(fù)提供理論參考,也對青少年骨的健康發(fā)育有著積極意義。研究方法:取昆明小鼠第1、3、5、7、9、11、13、15、17、19天日齡仔鼠的雙側(cè)股骨,采用HE染色法觀察股骨軟骨發(fā)育過程中軟骨細(xì)胞形態(tài)變化和血管侵入情況,運(yùn)用免疫組織化學(xué)法觀察股骨中Ⅱ型膠原、LYVE-1的表達(dá)情況,利用RT-PCR檢測Ⅱ型膠原、LYVE-1和VEGF-C表達(dá)。研究結(jié)果:1.股骨生長發(fā)育過程表現(xiàn)為軟骨內(nèi)成骨,仔鼠出生前股骨初級骨化中心已形成,次級骨化中心尚未形成。2.第7天血管侵入骨骺,次級骨化中心開始形成。隨著日齡增大次級骨化中心不斷擴(kuò)大,第13天骨骺生長區(qū)大量血管侵入,軟骨外基質(zhì)大面積鈣化,第19天血管侵入減少,但骨骺仍未完全鈣化。3.伴隨軟骨細(xì)胞的增殖分化,Ⅱ型膠原主要在增殖和肥大軟骨細(xì)胞上表達(dá)。LYVE-1肥大軟骨細(xì)胞與成骨區(qū)表達(dá)。Ⅱ型膠原隨著日齡增大,表達(dá)量呈現(xiàn)升高趨勢,第15天后開始下降。LYVE-1mRNA在第5天與13天表達(dá)呈上升趨勢。VEGF-CmRNA表達(dá)與LYVE-1mRNA表達(dá)呈正相關(guān),整體趨勢基本保持一致。研究結(jié)論:1.股骨骨化表現(xiàn)為軟骨內(nèi)成骨,初級骨化中心與次級骨化中心軟骨發(fā)育有差異,次級骨化中心無軟骨細(xì)胞肥大期。2.股骨內(nèi)骨化過程中有毛細(xì)淋巴管存在,且主要存在于軟骨細(xì)胞肥大區(qū)與成骨區(qū)。3.血管生長因子VEGF-CmRNA變化趨勢與LYVE-1mRNA呈正相關(guān),與淋巴管生長變化一致。
【關(guān)鍵詞】:軟骨內(nèi)骨化 Ⅱ型膠原 LYVE-1 VEGF-C 淋巴管
【學(xué)位授予單位】:華中師范大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R336
【目錄】:
- 摘要5-6
- Abstract6-9
- 1. 引言9-11
- 2. 文獻(xiàn)綜述11-22
- 2.1 軟骨內(nèi)成骨11-16
- 2.1.1 軟骨細(xì)胞11
- 2.1.2 軟骨外基質(zhì)與Ⅱ型膠原11-12
- 2.1.3 軟骨細(xì)胞的增殖與分化12-13
- 2.1.4 軟骨細(xì)胞的成熟13
- 2.1.5 生長因子與轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控13-14
- 2.1.6 血管侵入14-16
- 2.2 淋巴管16-22
- 2.2.1 淋巴管的生長與功能16-17
- 2.2.2 淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物17
- 2.2.3 促淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子17-22
- 3. 實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)方法22-27
- 3.1 實(shí)驗(yàn)器材與主要試劑22-23
- 3.1.1 實(shí)驗(yàn)器材22
- 3.1.2 主要試劑22-23
- 3.2 實(shí)驗(yàn)方法23-27
- 3.2.1 動物模型23-24
- 3.2.2 HE染色24-25
- 3.2.3 RT-PCR25-26
- 3.2.4 數(shù)據(jù)分析26-27
- 4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-36
- 4.1 HE染色結(jié)果27-29
- 4.2 Ⅱ型膠原蛋白在不同日齡仔鼠股骨中的表達(dá)29-30
- 4.3 LYVE-1蛋白在不同日齡仔鼠股骨中的表達(dá)30-32
- 4.4 Collagen Ⅱ mRNA、LYVE-1mRNA、VEGF-CmRNA在不同日齡仔鼠股骨中的表達(dá)32-36
- 5. 討論與分析36-40
- 5.1 軟骨內(nèi)成骨過程中軟骨細(xì)胞發(fā)育與Ⅱ型膠原的表達(dá)36-37
- 5.2 軟骨內(nèi)成骨過程中LYVE-1的變化與軟骨外基質(zhì)的重建37-38
- 5.3 VEGF-C對淋巴管生長的影響38-40
- 6 結(jié)論40-41
- 7. 展望41-42
- 參考文獻(xiàn)42-48
- 致謝48
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4 張e,
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