本文關(guān)鍵詞：犬類肩袖損傷修復(fù)模型的構(gòu)建，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景和目的肩袖亦稱旋轉(zhuǎn)袖,是覆蓋于肩關(guān)節(jié)前、上、后方之肩胛下肌、岡上肌、岡下肌、小圓肌等肌腱組成的總稱,與關(guān)節(jié)囊緊密相連,附著在肱骨上端形成袖筒狀組織。肩袖上方為喙肩弓,其間有肩峰下滑囊相隔,正常的肩袖肌腱分為四層結(jié)構(gòu)：肌腱、非鈣化纖維軟骨、鈣化纖維軟骨、骨。肩袖功能是在上臂外展過(guò)程中使肱骨頭向關(guān)節(jié)盂方向拉緊,維持肱骨頭與關(guān)節(jié)盂的正常支點(diǎn)。肩袖斷裂將會(huì)減弱甚至喪失這一功能,而嚴(yán)重影響上肢外展功能。肩袖撕裂損傷是造成肩關(guān)節(jié)功能下降、疼痛常見的一種疾病,而且隨著年齡的增長(zhǎng),肩袖損傷的發(fā)病率隨之也增加,盡管目前外科治療手段隨著科技的發(fā)展得到了不斷提高,但是肩袖修復(fù)的失敗率依然處在20～90%不等,肩袖損傷目前臨床上多采用關(guān)節(jié)鏡下單排或者雙排縫合,但是單純的外科縫合技術(shù)的應(yīng)用并未取得理想的療效結(jié)果,因此亟需新型支架材料的研發(fā),如Bioscaffold(生物支架)、PRP(富血小板基質(zhì))等一類可吸收或者不可吸收的支架材料,但是可吸收的生物支架材料所能承受強(qiáng)度還不是特別令人滿意而不可吸收的支架材料由于生物兼容性的問(wèn)題也飽受爭(zhēng)議,支架材料的原料及工藝改進(jìn)將會(huì)有助于研發(fā)出既能提供可靠地力學(xué)強(qiáng)度又具有良好的生物兼容性的新型支架；同時(shí)應(yīng)該改進(jìn)的還有肩袖損傷的縫合方式和手術(shù)方法,由于各種新型支架材料或是外科手段都需要從動(dòng)物模型上驗(yàn)證后才能進(jìn)一步改善利用在臨床上,因此一個(gè)理想的肩袖損傷動(dòng)物模型將有助于肩袖損傷修復(fù)的研究；目前肩袖損傷修復(fù)的動(dòng)物模型有小鼠、羊、犬、猩猩等,但是小鼠由于體型較小,在制作動(dòng)物模型的過(guò)程中由于肌腱分離及縫合的精細(xì)度要求較高,對(duì)于初級(jí)研究人員而言增加了肩袖修復(fù)過(guò)程中手術(shù)操作的難度；從解剖學(xué)的角度而言,猩猩的肩袖解剖結(jié)構(gòu)是最接近人類的,而且猩猩能夠直立行走,修復(fù)后的患肢可以有效避免負(fù)重,最能模擬人體肩袖損傷修復(fù)的過(guò)程,但是由于猩猩的價(jià)格及飼養(yǎng)的原因也并不能被廣泛的應(yīng)用,而其中犬類的體型及肩袖結(jié)構(gòu)都較合適,因而肩袖損傷修復(fù)模型多采用犬類模型,雖然以往有過(guò)多篇關(guān)于應(yīng)用比格犬建造肩袖損傷的動(dòng)物模型,但是這些犬類肩袖損傷修復(fù)模型都沒有提到使用外固定支架固定,沒有予以制動(dòng)處理,因此即使損傷的肩袖得到手術(shù)治療但是由于負(fù)重等外界因素影響,從而可能會(huì)影響肩袖修復(fù)的效果,對(duì)于修復(fù)后的肩袖愈合有所不利,為更加準(zhǔn)確的收集犬類肩袖損傷修復(fù)后的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),我們提出犬類肩袖損傷修復(fù)制動(dòng)模型,利用外固定支架將修復(fù)后的犬肢固定于屈曲約90度,從而避免患肢負(fù)重造成肩袖愈合不利,能夠更加形象的模擬正常肩袖損傷修復(fù)術(shù)后的恢復(fù)情況。在完成犬類肩袖損傷修復(fù)制動(dòng)模型的基礎(chǔ)上,我們提出使用比格犬自體半腱肌擴(kuò)張部作為增強(qiáng)修補(bǔ)膜片進(jìn)行修補(bǔ)術(shù),自體半腱肌擴(kuò)張部不僅可以提供一個(gè)類似于生物支架的支撐結(jié)構(gòu)，，同時(shí)自體半腱肌的應(yīng)用還可以有效的避免生物兼容性問(wèn)題,因此,我們?cè)谌惣缧鋼p傷修復(fù)制模型的基礎(chǔ)上研究自體半腱肌擴(kuò)張部修復(fù)肩袖損傷的可行性。研究方法1.犬類肩袖損傷修復(fù)制動(dòng)模型的建立麻醉：首先使用速眠新2號(hào)0.08～0.10 mg/kg通過(guò)比格犬臀部肌肉注射,必要時(shí)配合觀察動(dòng)物麻醉反應(yīng)調(diào)整劑量。待動(dòng)物四肢無(wú)力、無(wú)法行走時(shí),再將丙泊酚注射液以0.1ml/kg的劑量推注入后肢小隱靜脈麻醉。消毒備皮：待實(shí)驗(yàn)用的比格犬完全麻醉后再將實(shí)驗(yàn)犬均以右側(cè)臥位放置在手術(shù)臺(tái)上,四肢捆綁于手術(shù)臺(tái)邊上的固定栓上,以防止手術(shù)過(guò)程中實(shí)驗(yàn)犬蘇醒造成損傷,之后以左側(cè)肩關(guān)節(jié)大結(jié)節(jié)處為中心用剃毛器備皮約10cm*10cm范圍,再用碘伏無(wú)菌消毒、鋪單。肩袖處理：取左側(cè)肱骨大結(jié)節(jié)的正中切口,測(cè)量長(zhǎng)約3-5cm,鈍性分離皮下、結(jié)締組織層,牽開肱二頭肌,充分暴露肱骨大結(jié)節(jié)-岡下肌腱連接部。用尖刀片在止點(diǎn)處游離岡下肌腱；精細(xì)修剪岡下肌腱末端。然后在肱骨大結(jié)節(jié)上清理殘余的岡下肌腱末端,對(duì)肱骨大結(jié)節(jié)的岡下肌止點(diǎn)骨皮質(zhì)層進(jìn)行去表面皮質(zhì)化處理,再用lmm的克氏針在肱骨大結(jié)節(jié)上打2個(gè)骨孔。用愛惜邦縫合線,以Mason-Allen縫合法經(jīng)骨隧道重建岡下肌止點(diǎn),沖洗手術(shù)切口無(wú)活動(dòng)性出血后,用不可吸收線依次關(guān)閉皮下組織層及皮膚,適當(dāng)加壓包扎創(chuàng)口,用手術(shù)刀片于肱骨干及尺骨敢中段合適位置行兩處長(zhǎng)約4cm縱行切口,再用止血鉗鈍性分離肌肉組織,探查到肱骨及尺骨位置后,用電鉆于肱骨干及尺骨干中段合適位置各鉆入兩枚粗細(xì)合適的外固定針,確認(rèn)外固定針穿透兩層皮質(zhì)骨固定穩(wěn)定之后,再安裝外固定架及連接桿后用扳手?jǐn)Q緊螺絲,確認(rèn)外固定支架牢固。2.犬類自體半腱肌擴(kuò)張部修復(fù)肩袖損傷的研究首先用速眠新2號(hào)0.08～0.10 mg/kg通過(guò)比格犬臀部肌肉注射,必要時(shí)配合觀察動(dòng)物麻醉反應(yīng)調(diào)整劑量,待動(dòng)物四肢無(wú)力、無(wú)法行走時(shí),再將丙泊酚注射液以0.1 ml/kg的劑量推注入后肢小隱靜脈麻醉,待比格犬完全麻醉,后將麻醉后的比格犬以右側(cè)臥位放置在手術(shù)架上,并用繃帶將比格犬四肢及嘴部捆扎以防術(shù)中比格犬蘇醒造成損傷,之后用剃毛器備皮左側(cè)肩關(guān)節(jié)需手術(shù)區(qū)域,再無(wú)菌消毒、鋪單處理。取左側(cè)肱骨大結(jié)節(jié)為中心的正中切口,測(cè)量長(zhǎng)約3-5cm,鈍性分離皮下、結(jié)締組織層,牽開肱二頭肌,充分暴露肱骨大結(jié)節(jié)-岡下肌腱連接部。用尖刀片在止點(diǎn)處游離岡下肌腱；精細(xì)修剪岡下肌腱末端。然后在肱骨大結(jié)節(jié)上清理殘余的岡下肌腱末端,對(duì)肱骨大結(jié)節(jié)的岡下肌止點(diǎn)骨皮質(zhì)層進(jìn)行去表面皮質(zhì)化處理,直至出現(xiàn)血液從松質(zhì)骨中滲出,再用1mm的克氏針在肱骨大結(jié)節(jié)原岡下肌止點(diǎn)出鉆出2個(gè)骨孔。用愛惜邦不可吸收縫合線,以Mason-Allen縫合法經(jīng)骨隧道重建岡下肌止點(diǎn)。用組織剪于離斷岡下肌肌腱末端5mm處剪斷模擬退縮型肩袖損傷,取自體半腱肌擴(kuò)張部覆蓋于肩袖損傷處模擬半腱肌修補(bǔ)退縮型肩袖損傷組。所有比格犬均用外固定架于尺骨干和肱骨干上鉆孔固定肘關(guān)節(jié)于屈曲位6周,沖洗手術(shù)切口后,用不可吸收線依次關(guān)閉皮下組織層及皮膚,適當(dāng)加壓包扎創(chuàng)口。術(shù)后即刻至術(shù)后3天,臀部肌注注射用青霉素80萬(wàn)單位預(yù)防感染3.大致形態(tài)觀察所有實(shí)驗(yàn)犬觀察6周后在麻醉下于腿部靜脈行空氣栓塞處死,采集所有修補(bǔ)后的肩關(guān)節(jié),并且剔除多余的肌肉及骨骼組織,制作成岡下肌-肱骨復(fù)合體,肉眼下觀察岡下肌肌腱止點(diǎn)處肌腱愈合及走形情況,鑒定各組比格犬岡下肌肌腱的愈合及生長(zhǎng)情況。4.生物力學(xué)檢測(cè)所有實(shí)驗(yàn)犬觀察6周后在麻醉下于腿部靜脈行空氣栓塞處死,采集所有修補(bǔ)后的肩關(guān)節(jié),并且剔除多余的肌肉及骨骼組織,制作成岡下肌-肱骨復(fù)合體,再放置于生物力學(xué)測(cè)試儀器中設(shè)置合適的程序行生物力學(xué)測(cè)試,主要為循環(huán)負(fù)荷測(cè)試和極限負(fù)荷測(cè)試,以鑒定各組比格犬岡下肌肌腱愈合后所產(chǎn)生的生物力學(xué)強(qiáng)度。5.組織學(xué)檢測(cè)同時(shí)取修復(fù)后的岡下肌-肱骨復(fù)合體中岡下肌肌腱止點(diǎn)處組織,制作成蠟片后行Masson染色,以便于觀察各組比格犬中岡下肌肌腱細(xì)胞增殖和排列情況。結(jié)果1.大體形態(tài)觀察使用半腱肌修補(bǔ)組中岡下肌肌腱雖然肌腱走形已經(jīng)畸形并且覆蓋有白色疤痕組織,但其大致走向及肌腱紋理仍然可以觀察到(圖7)；普通肩袖損傷組中岡下肌肌腱末端疤痕組織明顯多于正常的肌腱組織(圖8)；在退縮型肩袖損傷組中岡下肌肌腱末端未見明顯肌腱組織,用鑷子輕輕撥開周圍疤痕組織仍未見明顯肌腱成分(圖9)。2.生物力學(xué)測(cè)試將各組肩袖樣本肌肉端置于干冰盒內(nèi),肌腱止點(diǎn)處于常溫中,待肌肉部分凝固成塊狀后放置于生物力學(xué)測(cè)試機(jī)上,標(biāo)本固定后加載3N前負(fù)荷,調(diào)整負(fù)荷為8N-50N,固定往復(fù)位移lmm,頻率0.25Hz循環(huán)牽拉40周。然后以1mm/s的前進(jìn)位移牽拉岡上肌腱至拉斷(圖10、11、12),記錄生物力學(xué)測(cè)試過(guò)程中各組肌腱組織所能承受的最終負(fù)荷,結(jié)果顯示在同樣是退縮型肩袖損傷組中運(yùn)用于自體半腱肌擴(kuò)張部修補(bǔ)組所能承受的最終負(fù)荷要優(yōu)于沒有運(yùn)用自體半腱肌擴(kuò)張部修補(bǔ)組。3. Masson染色結(jié)果所有實(shí)驗(yàn)犬岡下肌肌腱止點(diǎn)處Masson染色結(jié)果顯示(放大20倍),普通肩袖損傷組(圖13)肌腱纖維排布大致正常；退縮型肩袖損傷組(圖14)肌腱纖維排布較為紊亂,并且肌腱細(xì)胞數(shù)目明顯要低于前組；半腱肌修補(bǔ)組(圖15)染色結(jié)果顯示不僅肌腱纖維排布整齊而且細(xì)胞數(shù)目也比退縮型肩袖損傷組要多。結(jié)論1.利用外固定支架固定修復(fù)后的犬類肩關(guān)節(jié)可以有效的避免影響肩袖修復(fù)的外界因素,接近較為理想的動(dòng)物模型,為以后各種肩袖修復(fù)材料和外科手段收集更為準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。2.在此動(dòng)物模型的基礎(chǔ)上使用自體半腱肌擴(kuò)張部修補(bǔ)研究發(fā)現(xiàn)使用自體半腱肌擴(kuò)張部能促進(jìn)腱-骨愈合達(dá)到可靠的生物力學(xué)強(qiáng)度。3.在此動(dòng)物模型的基礎(chǔ)上使用自體半腱肌擴(kuò)張部修補(bǔ)研究發(fā)現(xiàn)使用自體半腱肌擴(kuò)張部能能有效促進(jìn)肌腱細(xì)胞增值。
【關(guān)鍵詞】：犬類 肩袖損傷 制動(dòng)模型 半腱肌擴(kuò)張部 修復(fù)
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R-332;R686
【目錄】：

• 摘要3-8
• ABSTRACT8-14
• 前言14-23
• 參考文獻(xiàn)17-23
• 第一部分 犬類肩袖損傷修復(fù)制動(dòng)模型的建立23-34
• 1 材料與方法23-27
• 2 結(jié)果27
• 3 討論27-31
• 4 結(jié)論31
• 參考文獻(xiàn)31-34
• 第二部分 犬類自體半腱肌擴(kuò)張部修復(fù)肩袖損傷的研究34-55
• 1 材料與方法34-43
• 2 結(jié)果43-48
• 3 討論48-51
• 4 結(jié)論51
• 參考文獻(xiàn)51-55
• 全文總結(jié)55-56
• 綜述56-70
• 參考文獻(xiàn)64-70
• 中英文縮略詞表70-71
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文71-72
• 致謝72-73

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