新生兒臍帶血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞比率及T細(xì)胞上PD-1表達(dá)的初步研究
發(fā)布時間:2024-09-25 20:58
研究背景及目的:臍帶血(Cord blood,CB)是胎兒娩出、臍帶結(jié)扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液,含有豐富的干細(xì)胞,臍帶血以前被認(rèn)為是一種生物廢棄物,現(xiàn)已成為用于臨床和研究應(yīng)用的造血干細(xì)胞的有用替代來源。與骨髓移植或粒細(xì)胞集落刺激因子(Granulocyte colony stimulating factor,G-CSF)動員的外周血(Peripheral blood,PB)干細(xì)胞移植相比,使用臍帶血移植物作為干細(xì)胞來源為移植受體帶來了優(yōu)點和缺點,例如允許更高程度的人類白細(xì)胞抗原(Human leukocyte antigen,HLA)匹配不同,降低移植物抗宿主。℅raft versus host disease,GVHD)的發(fā)病率與嚴(yán)重程度,延遲植入或更常見和嚴(yán)重的移植后感染。這些變化是由于臍帶血的獨特性質(zhì)所致,信號傳導(dǎo)機(jī)制改變導(dǎo)致細(xì)胞組成不同,例如,淋巴細(xì)胞數(shù)量占優(yōu)勢,嗜中性粒細(xì)胞減少,紅細(xì)胞計數(shù)更高或細(xì)胞的免疫原性降低。盡管眾所周知臍帶血具有不同的生物學(xué)特性,但其分子基礎(chǔ)仍然知之甚少。本研究通過血常規(guī)和流式細(xì)胞術(shù)分析,檢測臍帶血中免疫細(xì)胞的組成和免疫耐受相關(guān)細(xì)胞T細(xì)胞及表...
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中英文縮略詞對照表
中文摘要
英文摘要
1 前言
1.1 背景
1.2 造血干細(xì)胞
1.3 臍帶血移植
1.4 新生兒細(xì)胞免疫系統(tǒng)
1.5 研究目的
2 材料與方法
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗標(biāo)本來源
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要儀器與設(shè)備
2.1.4 主要試劑配制
2.2 實驗方法
2.2.1 血常規(guī)檢測白細(xì)胞分類與計數(shù)
2.2.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測新鮮新生兒臍帶血與母親外周血
2.2.3 PHA-L體外刺激臍帶血淋巴細(xì)胞兩種全血培養(yǎng)方案的比較
2.2.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測培養(yǎng)三天后的全血T細(xì)胞上PD-1表達(dá)的變化情況
2.3 統(tǒng)計學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 肉眼觀察新生兒臍帶血與母親外周血的外觀差異
3.2 血常規(guī)化驗結(jié)果分析
3.2.1 新生兒臍帶血與母親外周血白細(xì)胞、紅細(xì)胞及血小板計數(shù)比較分析
3.2.2 新生兒臍帶血與母親外周血白細(xì)胞分類及計數(shù)比較分析
3.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測新鮮血液結(jié)果分析
3.3.1 有無CD45抗體標(biāo)記淋巴細(xì)胞群對實驗結(jié)果影響的分析
3.3.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測CD34+造血干細(xì)胞在新鮮血液中的表達(dá)
3.3.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測新鮮血液中Treg細(xì)胞比率
3.3.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測新鮮臍帶血與外周血中T細(xì)胞上PD-1的表達(dá)差異
3.4 PHA-L體外刺激全血細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果分析
3.4.1 PHA-L體外刺激全血細(xì)胞兩種培養(yǎng)方案的比較
3.4.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測培養(yǎng)三天后全血T細(xì)胞上PD-1表達(dá)的變化結(jié)果分析
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述 臍帶血及臍帶血干細(xì)胞研究進(jìn)展
參考文獻(xiàn)
本文編號:4006162
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中英文縮略詞對照表
中文摘要
英文摘要
1 前言
1.1 背景
1.2 造血干細(xì)胞
1.3 臍帶血移植
1.4 新生兒細(xì)胞免疫系統(tǒng)
1.5 研究目的
2 材料與方法
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗標(biāo)本來源
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要儀器與設(shè)備
2.1.4 主要試劑配制
2.2 實驗方法
2.2.1 血常規(guī)檢測白細(xì)胞分類與計數(shù)
2.2.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測新鮮新生兒臍帶血與母親外周血
2.2.3 PHA-L體外刺激臍帶血淋巴細(xì)胞兩種全血培養(yǎng)方案的比較
2.2.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測培養(yǎng)三天后的全血T細(xì)胞上PD-1表達(dá)的變化情況
2.3 統(tǒng)計學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 肉眼觀察新生兒臍帶血與母親外周血的外觀差異
3.2 血常規(guī)化驗結(jié)果分析
3.2.1 新生兒臍帶血與母親外周血白細(xì)胞、紅細(xì)胞及血小板計數(shù)比較分析
3.2.2 新生兒臍帶血與母親外周血白細(xì)胞分類及計數(shù)比較分析
3.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測新鮮血液結(jié)果分析
3.3.1 有無CD45抗體標(biāo)記淋巴細(xì)胞群對實驗結(jié)果影響的分析
3.3.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測CD34+造血干細(xì)胞在新鮮血液中的表達(dá)
3.3.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測新鮮血液中Treg細(xì)胞比率
3.3.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測新鮮臍帶血與外周血中T細(xì)胞上PD-1的表達(dá)差異
3.4 PHA-L體外刺激全血細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果分析
3.4.1 PHA-L體外刺激全血細(xì)胞兩種培養(yǎng)方案的比較
3.4.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測培養(yǎng)三天后全血T細(xì)胞上PD-1表達(dá)的變化結(jié)果分析
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述 臍帶血及臍帶血干細(xì)胞研究進(jìn)展
參考文獻(xiàn)
本文編號:4006162
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