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基于暗場成像的單顆粒示蹤技術(shù)研究金納米棒與細胞的相互作用

發(fā)布時間:2024-06-10 18:10
  近年來,為滿足疾病診斷及精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)發(fā)展的需求,納米顆粒與細胞相互作用引起了廣泛的關(guān)注。納米顆粒與細胞相互作用由于細胞的復(fù)雜性及納米顆粒的多樣性變得神秘而復(fù)雜,然而傳統(tǒng)的平均的方法不再能滿足人們更加全面的研究納米顆粒與細胞復(fù)雜的相互作用的需求。因此,能夠?qū)崟r追蹤單分子/單顆粒動力學(xué)信息的單分子/單顆粒示蹤技術(shù)得到了廣大研究者們的青睞。本文利用傳統(tǒng)的暗場成像方法構(gòu)建了一套以金納米棒(AuNRs)為探針的單顆粒示蹤技術(shù),并進一步利用該暗場成像的單顆粒示蹤技術(shù)分析了金納米棒與細胞的相互作用。我們可以通過分析示蹤粒子平動和轉(zhuǎn)動動力學(xué)的各種方法和手段來窺探細胞物質(zhì)運動,進而揭開復(fù)雜的細胞作用機制的神秘面紗。本論文主要從以下三個方面開展工作:一、基于金納米棒探針構(gòu)建平動&旋轉(zhuǎn)單顆粒示蹤技術(shù)基于AuNRs的散射偏振性,我們利用傳統(tǒng)的暗場顯微鏡構(gòu)建了一個簡單有效的方法,該方法可以追蹤單個AuNRs的平動和轉(zhuǎn)動信息。該方法的原理是:暗場成像條件下,AuNR在彩色相機中呈現(xiàn)為一個散射像斑,像斑的散射強度受AuNR與光軸之間的夾角(極化角)影響,即AuNR的極化角可以通過其在彩色相機R、G和B三個成像通...

【文章頁數(shù)】:65 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 單顆粒示蹤技術(shù)
    1.3 納米顆粒與細胞相互作用
        1.3.1 納米顆粒吸附到細胞膜上
        1.3.2 納米顆粒在細胞膜上擴散
        1.3.3 納米顆粒被細胞內(nèi)吞
        1.3.4 納米顆粒在細胞內(nèi)輸運
    1.4 金納米棒
        1.4.1 金納米棒的光學(xué)特性
        1.4.2 金納米棒作為光學(xué)探針
    1.5 本論文工作內(nèi)容
第二章 基于金納米棒探針構(gòu)建平動&旋轉(zhuǎn)單顆粒示蹤技術(shù)
    2.1 前言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 實驗試劑
        2.2.2 成像裝置
        2.2.3 金納米棒的表征
        2.2.4 細胞培養(yǎng)
        2.2.5單顆粒示蹤實驗
        2.2.6 R和 G值提取
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 方法原理
        2.3.2 方法可行性驗證
        2.3.3 金納米棒與不同PD-L1 表達量細胞相互作用的旋轉(zhuǎn)行為
    2.4 小結(jié)
第三章 單顆粒示蹤技術(shù)研究細胞膜上擴散金納米棒的動力學(xué)
    3.1 前言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 實驗試劑
        3.2.2 成像裝置
        3.2.3 金納米棒的修飾
        3.2.4 細胞培養(yǎng)
        3.2.5單顆粒示蹤實驗
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 抗體修飾的金納米棒的表征及穩(wěn)定性
        3.3.2 金納米棒平動統(tǒng)計分析
        3.3.3 金納米棒平動和轉(zhuǎn)動時序分析
    3.4 小結(jié)
第四章 單顆粒示蹤技術(shù)研究不同修飾金納米棒與細胞相互作用
    4.1 前言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 實驗試劑
        4.2.2 成像裝置
        4.2.3 金納米棒的修飾
        4.2.4 細胞培養(yǎng)
        4.2.5單顆粒示蹤實驗
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 抗體修飾的金納米棒的表征
        4.3.2 金納米棒吸附
        4.3.3 金納米棒膜上擴散
        4.3.4 金納米棒跨膜
        4.3.5 金納米棒細胞內(nèi)輸運
    4.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝



本文編號:3991708

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