目的:研究MGRN1對小鼠睪丸支持細胞自噬的影響。方法:體外培養(yǎng)小鼠睪丸支持細胞株(TM4細胞)利用RNAi下調(diào)TM4細胞中MGRN1的表達,然后利用Western印跡(WB)檢測自噬相關(guān)蛋白(LC3-II/I、ATG-5和ATG-7)的表達,免疫熒光及電鏡檢測MGRN1下調(diào)后TM4細胞的自噬小體。結(jié)果:MGRN1下調(diào)后,WB發(fā)現(xiàn)TM4細胞中自噬相關(guān)蛋白(LC3-II/I、ATG-5和ATG-7)表達增加,熒光顯微鏡可觀察到TM4細胞中自噬小體增加,與對照組相比,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),電鏡可觀察到TM4細胞中自噬小體增加。結(jié)論:MGRN1影響睪丸支持細胞的自噬,具體分子機制有待進一步研究。

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【部分圖文】：

圖4電鏡觀察3組TM4細胞中的自噬小體

結(jié)果顯示,與對照組相比,MGRN1下調(diào)明顯誘導了細胞自噬(圖4)。3討論

圖1RNAi下調(diào)TM4細胞中MGRN1mRNA和蛋白的表達

為研究MGRN1基因?qū)ψ允傻挠绊?采用Western印跡分析各組自噬相關(guān)蛋白(LC3-II/I、ATG-5和ATG-7)的表達變化以評價自噬形成,結(jié)果顯示,MGRN1下調(diào)后TM4細胞中LC3-II/I、ATG-5、ATG-7的表達增加(MGRN1下調(diào)組與對照組相比,P<0.05)....

圖2MGRN1下調(diào)的TM4細胞中自噬相關(guān)蛋白(LC3-II/I、ATG-5和ATG-7)的表達增加

圖1RNAi下調(diào)TM4細胞中MGRN1mRNA和蛋白的表達2.3熒光顯微鏡觀察MGRN1表達下調(diào)后小鼠TM4細胞自噬小體的數(shù)量增加

圖3熒光顯微鏡觀察3組細胞中的自噬小體(×100)

表3各組GFP-LC3陽性細胞率(%)Table3.GFP-LC3positivecellsindifferentgroupsofthemouseTM4cells(%)GroupsPositivecells(%)MGRN1knockdown....

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