發(fā)布時(shí)間：2024-03-13 23:43

　　第一部分巨噬細(xì)胞培養(yǎng)并對(duì)M1和M2細(xì)胞表型的體外誘導(dǎo)與鑒定目的:巨噬細(xì)胞來(lái)源于血液中分化的單核細(xì)胞,起到非特異性免疫作用,屬于機(jī)體免疫系統(tǒng)的重要組成部分,具有識(shí)別及呈遞抗原、調(diào)節(jié)免疫進(jìn)程、清除異物、免疫監(jiān)視及吞噬等影響機(jī)體細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育的生物學(xué)功能。在機(jī)體的特定微環(huán)境中,巨噬細(xì)胞按照功能及形態(tài)可衍生為兩種不同的細(xì)胞表型,即M1和M2表型,前者屬于巨噬細(xì)胞的經(jīng)典激活途徑,具有抗原殺傷與抑制腫瘤進(jìn)展的功效;后者屬于巨噬細(xì)胞的替代激活途徑,其可參與炎癥反應(yīng)、促進(jìn)血管生成和組織的再造等,在臨床上可認(rèn)為M2型細(xì)胞功能屬于促進(jìn)癌細(xì)胞的發(fā)生發(fā)展。本部分研究旨在體外構(gòu)建巨噬細(xì)胞M1和M2這兩種極化細(xì)胞的模型,為后續(xù)對(duì)極化巨噬細(xì)胞的進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。方法:利用佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯(PMA)刺激U937細(xì)胞,然后加入IL-4和IL-13誘導(dǎo)出M2表型,后用脂多糖和IFN-γ誘導(dǎo)出M1表型;使用qPCR分析通過(guò)TGF-β,Arg-1和TNF-α表達(dá)水平鑒定巨噬細(xì)胞的表型;使用蛋白質(zhì)印跡分析來(lái)定量Arg-1和iNOS蛋白質(zhì)表達(dá);此外,采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定方法(ELISA)用于檢測(cè)IFN-γ,T...

【文章頁(yè)數(shù)】：154 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
個(gè)人簡(jiǎn)歷
摘要
ABSTRACT
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 巨噬細(xì)胞培養(yǎng)和M1 和M2 兩種細(xì)胞表型的體外誘導(dǎo)與鑒定
    一、前言
    二、材料和方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 巨噬細(xì)胞極化過(guò)程的結(jié)合蛋白質(zhì)組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組和甲基化間的差異
    一、前言
    二、實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
    三、實(shí)驗(yàn)流程與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 M1/M2型細(xì)胞極化過(guò)程中結(jié)合蛋白質(zhì)組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組和DNA甲基化組間的相關(guān)性研究
    一、前言
    二、實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
    三、實(shí)驗(yàn)流程與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
全文小結(jié)
附錄
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3927745