第一部分巨噬細胞培養(yǎng)并對M1和M2細胞表型的體外誘導與鑒定目的:巨噬細胞來源于血液中分化的單核細胞,起到非特異性免疫作用,屬于機體免疫系統(tǒng)的重要組成部分,具有識別及呈遞抗原、調(diào)節(jié)免疫進程、清除異物、免疫監(jiān)視及吞噬等影響機體細胞的生長發(fā)育的生物學功能。在機體的特定微環(huán)境中,巨噬細胞按照功能及形態(tài)可衍生為兩種不同的細胞表型,即M1和M2表型,前者屬于巨噬細胞的經(jīng)典激活途徑,具有抗原殺傷與抑制腫瘤進展的功效;后者屬于巨噬細胞的替代激活途徑,其可參與炎癥反應(yīng)、促進血管生成和組織的再造等,在臨床上可認為M2型細胞功能屬于促進癌細胞的發(fā)生發(fā)展。本部分研究旨在體外構(gòu)建巨噬細胞M1和M2這兩種極化細胞的模型,為后續(xù)對極化巨噬細胞的進一步研究奠定基礎(chǔ)。方法:利用佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯(PMA)刺激U937細胞,然后加入IL-4和IL-13誘導出M2表型,后用脂多糖和IFN-γ誘導出M1表型;使用qPCR分析通過TGF-β,Arg-1和TNF-α表達水平鑒定巨噬細胞的表型;使用蛋白質(zhì)印跡分析來定量Arg-1和iNOS蛋白質(zhì)表達;此外,采用酶聯(lián)免疫吸附測定方法(ELISA)用于檢測IFN-γ,T...

【文章頁數(shù)】：154 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
個人簡歷
摘要
ABSTRACT
前言
    參考文獻
第一部分 巨噬細胞培養(yǎng)和M1 和M2 兩種細胞表型的體外誘導與鑒定
    一、前言
    二、材料和方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻
第二部分 巨噬細胞極化過程的結(jié)合蛋白質(zhì)組學、轉(zhuǎn)錄組和甲基化間的差異
    一、前言
    二、實驗材料與設(shè)備
    三、實驗流程與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻
第三部分 M1/M2型細胞極化過程中結(jié)合蛋白質(zhì)組學、轉(zhuǎn)錄組和DNA甲基化組間的相關(guān)性研究
    一、前言
    二、實驗材料與設(shè)備
    三、實驗流程與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻
全文小結(jié)
附錄
綜述
    參考文獻
致謝



本文編號：3927745