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基于流式細(xì)胞術(shù)的大鼠骨髓網(wǎng)織紅細(xì)胞微核實驗方法的建立

發(fā)布時間:2024-03-12 05:40
  目的建立并驗證大鼠骨髓網(wǎng)織紅細(xì)胞(reticulocytes,RETs)微核的流式細(xì)胞術(shù)檢測方法。方法選用CD71-異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)標(biāo)記骨髓網(wǎng)織紅細(xì)胞,CD45-藻紅蛋白(phycoerythrin,PE)標(biāo)記白細(xì)胞,核酸染料DRAQ5標(biāo)記DNA,建立骨髓微核的流式細(xì)胞術(shù)檢測方法。SD大鼠隨機分為甲基磺酸乙酯(ethyl methanesulfonate,EMS)、環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide,CP)、N-乙基-N-亞硝基脲(ethyl nitrosourea,ENU)和秋水仙素(colchicine,COL)染毒組,各組大鼠按染毒劑量不同再分為4亞組,每亞組5只。以染毒劑量為0,作為各組溶劑對照。染毒方案為間隔24 h兩次經(jīng)口給藥。末次給藥后24 h采集雙側(cè)股骨骨髓,采用本研究建立的基于流式細(xì)胞術(shù)的骨髓微核檢測方法測定骨髓中的RETs微核率和RETs比例,并同時使用人工顯微鏡下計數(shù)方法進(jìn)行檢測。結(jié)果成功建立基于流式細(xì)胞術(shù)的骨髓微核檢測方法。采用該方法檢測20只溶劑對照大鼠骨髓微核率(背景微核率)為0.83‰...

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