目的觀察銅綠假單胞菌重組Bb(pGEX-OprF-Ⅰ)疫苗免疫及PA01株攻擊小鼠后誘導(dǎo)的保護(hù)力及脾細(xì)胞因子INF-γ、IL-12、IL-4、IL-17和Treg的變化。方法將BALB/c小鼠隨機分為疫苗組、空載體對照組和Bb對照組,每組7只。取5×10⁸ CFU疫苗每日灌胃1次,每周連續(xù)3d,共3周。初次接種后4周用5×10⁷ CFU/10μl的PA01株進(jìn)行滴鼻攻擊。攻擊后2周殺鼠,取肺計數(shù)細(xì)菌負(fù)荷,取脾制備脾細(xì)胞懸液,經(jīng)PaAg刺激培養(yǎng),PCR擴增脾細(xì)胞的INF-γ、IL-12、IL-4、IL-17和Treg基因。結(jié)果疫苗組肺細(xì)菌菌落數(shù)為(0.27±0.02)×10⁸ CFU,空載體組為(7.37±0.89)×10⁸ CFU,Bb對照組為(7.42±0.80)×10⁸ CFU,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);疫苗組脾細(xì)胞擴增出399bp的INF-γ基因片段、300bp的IL-12基因片段、359bp的IL-4基因片段、380bp的IL-17基因片段和250bp的F...

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圖1疫苗免疫及PA01株攻擊后小鼠脾細(xì)胞INF-γ基因PCR產(chǎn)物1.2%瓊脂糖凝膠電泳圖

檢測肺細(xì)菌負(fù)荷是評價疫苗保護(hù)力的重要指標(biāo)。Weimer等[10]將重組OprF-I融合蛋白肌肉注射接種小鼠，在PA01株攻擊后3d免疫小鼠的肺細(xì)菌負(fù)荷明顯下降，肺部炎癥及病理損傷減輕，具有較好的抗感染作用。本研究將重組Bb(pGEX-OprF-I）疫苗灌胃免疫小鼠后用PA01株攻....

圖2疫苗免疫及PA01株攻擊后小鼠脾細(xì)胞IL-12基因PCR產(chǎn)物1.2%瓊脂糖凝膠電泳圖

圖1疫苗免疫及PA01株攻擊后小鼠脾細(xì)胞INF-γ基因PCR產(chǎn)物1.2%瓊脂糖凝膠電泳圖圖3疫苗免疫及PA01株攻擊后小鼠脾細(xì)胞IL-4基因PCR產(chǎn)物1.2%瓊脂糖凝膠電泳圖

圖3疫苗免疫及PA01株攻擊后小鼠脾細(xì)胞IL-4基因PCR產(chǎn)物1.2%瓊脂糖凝膠電泳圖

圖2疫苗免疫及PA01株攻擊后小鼠脾細(xì)胞IL-12基因PCR產(chǎn)物1.2%瓊脂糖凝膠電泳圖圖4疫苗免疫及PA01株攻擊后小鼠脾細(xì)胞IL-17基因PCR產(chǎn)物1.2%瓊脂糖凝膠電泳圖

圖4疫苗免疫及PA01株攻擊后小鼠脾細(xì)胞IL-17基因PCR產(chǎn)物1.2%瓊脂糖凝膠電泳圖

圖3疫苗免疫及PA01株攻擊后小鼠脾細(xì)胞IL-4基因PCR產(chǎn)物1.2%瓊脂糖凝膠電泳圖圖5疫苗免疫及PA01株攻擊后小鼠脾細(xì)胞Foxp3基因PCR產(chǎn)物1.2%瓊脂糖凝膠電泳圖

本文編號：3910700