目的:探討攜帶埃博拉病毒膜蛋白(Ebola Virus Glycoprotein,EboGp)的HIV-1病毒樣顆粒(Virus like particle,VLP)的免疫原性。方法:1.包裝VLP:(1)用質(zhì)粒HIVgp120、EbovGp、EbovGpAM、Δ8.2和Gluc通過PEI轉(zhuǎn)染法獲取所需 VLP:HIVgp-VLP、EbovGp-VLP、EbovGpΔM-VLP、HIVgp/EboGp-VLP和HIVgp/EboGpAM-VLP;(2)檢測所得VLP包裝是否成功:蛋白印跡法(Western Blot,WB)定性檢測VLP中相關(guān)蛋白:HIVgp120蛋白、HIV P24蛋白、EboGp蛋白和EboGpΔM蛋白是否正確表達(dá);酶聯(lián)免疫法(Enzyme-link Immunosorbent Assay,ELISA)定量檢測VLP中的HIV P24量。2.細(xì)胞實驗:100ng/100μlPBS的VLP:HIVgp-VLP、EbovGp-VLP、EbovGpΔM-VLP、HIVgp/EboGp-VLP和HIVgp/EboGpAM-VLP分別感染C8166細(xì)胞、THP1細(xì)胞、單核細(xì)胞...

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3EbovGp對HIVVLP感染免疫細(xì)胞的影響

圖4EboGpM對HIV-1VLP感染免疫細(xì)胞的影（A）用五組VLP分別感染THP1細(xì)胞，感染后第五天檢測HIVgp(M)/EboGp-VLP相比，P<0.05；（B）用五組VLP分測細(xì)胞培養(yǎng)液中的Gluc值，*表示與HIVgp(M)/EboGp....

圖4EboGpM對HIV-1VLP感染免疫細(xì)胞的影響

圖5檢測HIVgp（M）/EboGp-VLP在小鼠體內(nèi)引發(fā)的免疫反應(yīng)（A）（B）（C）將三組病毒顆粒分別注射到小鼠頸部皮下，用ELISA檢測血清中抗-EboGp抗體、抗-H抗體和抗-HIVP24抗體的量，*表示與HIVgp(M)/EboGp比較，P<0.0....

圖5檢測HIVgp（M）/EboGp-VLP在小鼠體內(nèi)引發(fā)的免疫反應(yīng)（A）（B）（C）將三組病毒顆粒分別注射到小鼠頸部皮下，用ELISA檢測血清中抗-EboGp抗體、抗-HIVgp120抗體和抗-HIVP24抗體的量，*表示與HIVgp(M)/EboGp比較，P<0.05

檢測HIVgp（M）/EboGp-VLP在小鼠體內(nèi)引發(fā)的免疫反應(yīng)（B）（C）將三組病毒顆粒分別注射到小鼠頸部皮下，用ELISA檢測血清中抗-EboGp抗體、抗-HIVgp12和抗-HIVP24抗體的量，*表示與HIVgp(M)/EboGp比較，P<0.05。*....

圖6檢測HIVgp（T）/EboGp-VLP在小鼠體內(nèi)引發(fā)的免疫反應(yīng)(A)（B）將三組病毒顆粒和PBS（陰性對照）分別注射到小鼠頸背部皮下，用ELISA檢測血清中抗-HIVgp120

圖7埃博拉結(jié)構(gòu)圖[29]EbovGp是病毒顆粒表面唯一的跨膜蛋白，其主要功能是通過與宿主細(xì)胞表面受體相結(jié)合使病毒與宿主細(xì)胞融合。EbovGp的免疫原性很強，它能夠有效的靶向抗原呈遞細(xì)胞，包括DC和單核細(xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞（MonocyteDerivedMacroph....

本文編號：3904317