發(fā)布時間：2024-02-17 20:56

　　目的:研究碘乙酸鈉誘導(dǎo)的大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎(KOA)模型腸道菌群變化情況,探究腸道菌群與KOA的潛在聯(lián)系。方法:將SPF級大鼠分為空白對照組和KOA組,通過膝關(guān)節(jié)局部注射碘乙酸鈉制造大鼠KOA模型。通過16SrDNA檢測大鼠糞便中的腸道菌群變化情況,蛋白印記法檢測結(jié)腸組織中NF-κB和TNF-α蛋白表達,RT-qPCR檢測結(jié)腸組織中Caspase-1和IL-1β基因表達情況,蘇木精-伊紅染色觀察結(jié)腸黏膜通透性變化,蘇木精-伊紅染色觀察關(guān)節(jié)滑膜和軟骨組織的病理變化情況。ELISA檢測血液上清中LBP,IL-1β,TNF-α及IL-10炎癥因子水平。結(jié)果:與空白對照組相比,從KOA組中篩選出明顯變化的腸道菌群,以Akkermansia和疣微菌門變化最為顯著,結(jié)腸黏膜通透性增加,結(jié)腸組織中NF-κB p65及TNF-α蛋白表達升高,結(jié)腸組織中Caspase-1和IL-1β基因表達升高,血液中促炎因子LBP,IL-1β及TNF-α蛋白含量升高,抗炎因子IL-10蛋白含量降低。結(jié)論:KOA病理狀態(tài)下腸道菌群發(fā)生變化,結(jié)腸炎癥反應(yīng)增強,結(jié)腸炎癥反應(yīng)或許在提高全身炎癥反應(yīng)水平、促進與腸道菌群相關(guān)的KOA...

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圖2WesternBlot檢測結(jié)腸組織NF-κBp65及TNF-α蛋白的表達（與空白組相比，**P<0.01)

圖1腸道菌群結(jié)構(gòu)變化對比2.3RT-qPCR檢測結(jié)腸組織Caspase-1及IL-1β基因表達

圖4KOA組結(jié)腸黏膜相對于空白組發(fā)生明顯破壞

正常組大鼠結(jié)腸黏膜結(jié)構(gòu)完整，杯狀細胞排列整齊，無炎癥細胞浸潤。模型組大鼠結(jié)腸黏膜不完整，杯狀細胞缺失，腸黏膜屏障破壞（圖4）。2.5ELISA檢測大鼠血清中促炎因子與抗炎因子水平

圖5ELISA檢測大鼠血清中促炎因子與抗炎因子水平（與空白組相比，**P<0.01,*P<0.05)

ELISA檢測大鼠血清中促炎因子與抗炎因子水平見圖5。2.6大鼠滑膜組織及膝關(guān)節(jié)軟骨組織蘇木精-伊紅染色

圖6軟骨滑膜蘇木精-伊紅染色結(jié)果

滑膜組織蘇木精-伊紅染色：空白組滑膜組織內(nèi)細胞呈扁平分布，可見大量的脂肪細胞，無炎性細胞浸潤及血管擴張現(xiàn)象（圖6a）；模型組滑膜組織可見大量炎性細胞浸潤、脂肪細胞減少，小血管擴張及增多（圖6b）。軟骨組織蘇木精-伊紅染色：空白組軟骨表面平滑，細胞核藍色，細胞排列規(guī)則，各層結(jié)構(gòu)界限....

本文編號：3901312