本研究從敬釗纓毛蛛毒液中分離純化出一個(gè)新的作用于電壓門(mén)控鈉離子通道的毒素,JZTx-14。MALDI-TOF質(zhì)譜分析確定JZTx-14的平均分子量為3422.17 Da(M+H⁺)。結(jié)合Edman降解測(cè)序、溶液酶解、LC-MS分析和cDNA文庫(kù)搜庫(kù)確定了JZTx-14的全長(zhǎng)氨基酸序列。JZTx-14由31個(gè)氨基酸組成,序列中包含三對(duì)二硫鍵,是一個(gè)典型的ICK模體毒素(二硫鍵模式:C1-C4,C2-C5,C3-C6)。活性分析表明JZTx-14是一個(gè)非選擇性哺乳動(dòng)物電壓門(mén)控鈉離子通道和細(xì)菌電壓門(mén)控鈉離子通道NaChBac的抑制劑。JZTx-14可以高親和力抑制哺乳動(dòng)物NaV1.2-NaV1.8通道和NaChBac通道的電流(IC₅₀均小于1μM),對(duì)于NaV1.9通道,JZTx-14主要抑制其快失活,僅輕微抑制其峰電流。分析JZTx-14對(duì)NaV1.5/1.9DIIS3–4嵌合體通道[將NaV1.5通道結(jié)構(gòu)域二S3-S4跨膜螺旋間的序列(S3-4胞外環(huán))替換成NaV1.9通道的相應(yīng)區(qū)域]的活性發(fā)現(xiàn)JZTx-14能結(jié)合NaV1.5通道結(jié)構(gòu)域二S3...

【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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中文摘要
Abstract
第一章 電壓門(mén)控鈉離子通道研究進(jìn)展
    1.1 電壓門(mén)控鈉離子通道的結(jié)構(gòu)與功能概論
    1.2 電壓門(mén)控鈉離子通道(NaV1.1-1.9)的病理功能
        1.2.1 電壓門(mén)控鈉離子通道的組織分布
        1.2.2 電壓門(mén)控鈉離子通道功能失調(diào)致離子通道病的相關(guān)研究進(jìn)展
        1.2.3 電壓門(mén)控鈉離子通道在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)與功能
    1.3 作用于電壓門(mén)控鈉離子通道的毒素
    1.4 電壓門(mén)控鈉離子通道研究展望
第二章 JZTx-14 與細(xì)菌和哺乳動(dòng)物電壓門(mén)控鈉離子通道相互作用的分子機(jī)制
    2.1 前言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 JZTx-14 的分離純化和N-端序列測(cè)定
        2.3.2 JZTx-14的C-末端序列測(cè)定
        2.3.3 電壓門(mén)控鈉離子通道突變體質(zhì)粒構(gòu)建
        2.3.4 細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染
        2.3.5 全細(xì)胞膜片鉗記錄
        2.3.6 數(shù)據(jù)處理
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        2.4.1 JZTx-14 的分離純化與鑒定
        2.4.2 JZTx-14 對(duì)哺乳動(dòng)物電壓門(mén)控鈉離子通道的活性分析
        2.4.3 JZTx-14 是一個(gè)電壓門(mén)控鈉離子通道的門(mén)控調(diào)制劑
        2.4.4 JZTx-14 對(duì)細(xì)菌鈉離子通道的活性分析
        2.4.5 JZTx-14 作用于NaChBac的分子機(jī)制研究
    2.5 討論
參考文獻(xiàn)
縮寫(xiě)表(中英文對(duì)照)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號(hào)：3869905