本研究從敬釗纓毛蛛毒液中分離純化出一個新的作用于電壓門控鈉離子通道的毒素,JZTx-14。MALDI-TOF質譜分析確定JZTx-14的平均分子量為3422.17 Da(M+H⁺)。結合Edman降解測序、溶液酶解、LC-MS分析和cDNA文庫搜庫確定了JZTx-14的全長氨基酸序列。JZTx-14由31個氨基酸組成,序列中包含三對二硫鍵,是一個典型的ICK模體毒素(二硫鍵模式:C1-C4,C2-C5,C3-C6)�；钚苑治霰砻鱆ZTx-14是一個非選擇性哺乳動物電壓門控鈉離子通道和細菌電壓門控鈉離子通道NaChBac的抑制劑。JZTx-14可以高親和力抑制哺乳動物NaV1.2-NaV1.8通道和NaChBac通道的電流(IC₅₀均小于1μM),對于NaV1.9通道,JZTx-14主要抑制其快失活,僅輕微抑制其峰電流。分析JZTx-14對NaV1.5/1.9DIIS3–4嵌合體通道[將NaV1.5通道結構域二S3-S4跨膜螺旋間的序列(S3-4胞外環(huán))替換成NaV1.9通道的相應區(qū)域]的活性發(fā)現(xiàn)JZTx-14能結合NaV1.5通道結構域二S3...

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【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
第一章 電壓門控鈉離子通道研究進展
    1.1 電壓門控鈉離子通道的結構與功能概論
    1.2 電壓門控鈉離子通道(NaV1.1-1.9)的病理功能
        1.2.1 電壓門控鈉離子通道的組織分布
        1.2.2 電壓門控鈉離子通道功能失調致離子通道病的相關研究進展
        1.2.3 電壓門控鈉離子通道在腫瘤細胞中的表達與功能
    1.3 作用于電壓門控鈉離子通道的毒素
    1.4 電壓門控鈉離子通道研究展望
第二章 JZTx-14 與細菌和哺乳動物電壓門控鈉離子通道相互作用的分子機制
    2.1 前言
    2.2 實驗材料
    2.3 實驗方法
        2.3.1 JZTx-14 的分離純化和N-端序列測定
        2.3.2 JZTx-14的C-末端序列測定
        2.3.3 電壓門控鈉離子通道突變體質粒構建
        2.3.4 細胞培養(yǎng)與轉染
        2.3.5 全細胞膜片鉗記錄
        2.3.6 數(shù)據(jù)處理
    2.4 實驗結果與分析
        2.4.1 JZTx-14 的分離純化與鑒定
        2.4.2 JZTx-14 對哺乳動物電壓門控鈉離子通道的活性分析
        2.4.3 JZTx-14 是一個電壓門控鈉離子通道的門控調制劑
        2.4.4 JZTx-14 對細菌鈉離子通道的活性分析
        2.4.5 JZTx-14 作用于NaChBac的分子機制研究
    2.5 討論
參考文獻
縮寫表(中英文對照)
攻讀學位期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號：3869905