目的:1.建立并評價EAE模型;2.探討姜黃素對實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)小鼠的干預作用及初步作用機制。方法:SPF級雌性C57BL/6小鼠隨機分為5組:正常對照組(Control組)、EAE模型組、EAE-DMSO組、EAE-雷帕霉素組、EAE-姜黃素組。除正常對照組(Control)外,其余各組通過少突膠質(zhì)糖蛋白35-55(MOG35-55)誘導C57BL/6小鼠建立EAE動物模型,通過小鼠體重變化、神經(jīng)功能評分以及病理HE染色和髓鞘Weil染色結果初步篩選出EAE模型。進一步用藥物雷帕霉素、姜黃素干預EAE小鼠,觀察各實驗組小鼠脊髓組織病理HE染色和Weil髓鞘染色改變,并分別定位、定量檢測相關蛋白的表達以及血清炎癥因子的變化。結果:1.各實驗組小鼠體重變化及神經(jīng)功能評分結果:體重變化評估發(fā)現(xiàn):Control組和EAE組小鼠體重在免疫后7天均有上升,且趨勢相差不大;免疫后14天也呈增長趨勢,但EAE組小鼠體重增長滯后;隨后,免疫21天EAE組小鼠體重有所下降,Control組仍繼續(xù)上升;至免疫后30天,各組小鼠體重趨于平穩(wěn),但EAE組小鼠平均體重明顯低于Control組,...

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 研究背景
        1.1.1 MS及EAE模型簡介
        1.1.2 MS發(fā)病機制
        1.1.3 MS治療進展
        1.1.4 姜黃素藥理作用及研究進展
    1.2 研究內(nèi)容和技術路線圖
        1.2.1 研究內(nèi)容
        1.2.2 技術路線圖
    參考文獻
第二章 EAE模型的建立和評價
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗動物及飼養(yǎng)環(huán)境
        2.1.2 實驗藥物和試劑
        2.1.3 實驗儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 實驗小鼠分組與造模
        2.2.2 小鼠神經(jīng)功能評分
        2.2.3 小鼠體重變化
        2.2.4 脊髓切片的制備及病理染色
        2.2.5 統(tǒng)計學分析
    2.3 結果
        2.3.1 小鼠神經(jīng)功能評分情況
        2.3.2 小鼠體重變化趨勢
        2.3.3 脊髓切片的制備及病理染色結果
    2.4 討論
    參考文獻
第三章 姜黃素對C57BL/6小鼠EAE模型的治療作用及具體機制的初步探索
    3.1 實驗材料
        3.1.1 實驗動物
        3.1.2 實驗藥物和試劑
        3.1.3 實驗儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 實驗分組及藥物干預
        3.2.2 EAE動物模型的建立
        3.2.3 神經(jīng)功能癥狀評分
        3.2.4 腦脊髓切片的制備及病理染色
        3.2.5 免疫組織化學
        3.2.6 Western Blot檢測相關蛋白表達
        3.2.7 ELISA小鼠血清炎癥因子測定
        3.2.8 統(tǒng)計學處理
    3.3 實驗結果
        3.3.1 小鼠神經(jīng)功能評分情況
        3.3.2 組織病理學結果
        3.3.3 免疫組化測定姜黃素治療前后脊髓組織中AKT、mToR和LC3-Ⅱ表達情況
        3.3.4 WB測定姜黃素治療前后EAE小鼠AKT/mTOR自噬通路的變化
        3.3.5 姜黃素治療對EAE小鼠血清炎癥因子含量的影響
    3.4 討論
    參考文獻
第四章 結論
    4.1 主要結論
    4.2 展望
英文縮略一覽表
綜述 植物提取物在多發(fā)性硬化及其動物模型中的應用研究新進展
    參考文獻
研究生期間成果
致謝
附件



本文編號：3867062