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實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎小鼠模型的建立及姜黃素治療作用的探索

發(fā)布時(shí)間:2023-11-25 02:10
  目的:1.建立并評(píng)價(jià)EAE模型;2.探討姜黃素對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)小鼠的干預(yù)作用及初步作用機(jī)制。方法:SPF級(jí)雌性C57BL/6小鼠隨機(jī)分為5組:正常對(duì)照組(Control組)、EAE模型組、EAE-DMSO組、EAE-雷帕霉素組、EAE-姜黃素組。除正常對(duì)照組(Control)外,其余各組通過(guò)少突膠質(zhì)糖蛋白35-55(MOG35-55)誘導(dǎo)C57BL/6小鼠建立EAE動(dòng)物模型,通過(guò)小鼠體重變化、神經(jīng)功能評(píng)分以及病理HE染色和髓鞘Weil染色結(jié)果初步篩選出EAE模型。進(jìn)一步用藥物雷帕霉素、姜黃素干預(yù)EAE小鼠,觀察各實(shí)驗(yàn)組小鼠脊髓組織病理HE染色和Weil髓鞘染色改變,并分別定位、定量檢測(cè)相關(guān)蛋白的表達(dá)以及血清炎癥因子的變化。結(jié)果:1.各實(shí)驗(yàn)組小鼠體重變化及神經(jīng)功能評(píng)分結(jié)果:體重變化評(píng)估發(fā)現(xiàn):Control組和EAE組小鼠體重在免疫后7天均有上升,且趨勢(shì)相差不大;免疫后14天也呈增長(zhǎng)趨勢(shì),但EAE組小鼠體重增長(zhǎng)滯后;隨后,免疫21天EAE組小鼠體重有所下降,Control組仍繼續(xù)上升;至免疫后30天,各組小鼠體重趨于平穩(wěn),但EAE組小鼠平均體重明顯低于Control組,...

【文章頁(yè)數(shù)】:63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 研究背景
        1.1.1 MS及EAE模型簡(jiǎn)介
        1.1.2 MS發(fā)病機(jī)制
        1.1.3 MS治療進(jìn)展
        1.1.4 姜黃素藥理作用及研究進(jìn)展
    1.2 研究?jī)?nèi)容和技術(shù)路線圖
        1.2.1 研究?jī)?nèi)容
        1.2.2 技術(shù)路線圖
    參考文獻(xiàn)
第二章 EAE模型的建立和評(píng)價(jià)
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)環(huán)境
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)藥物和試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)小鼠分組與造模
        2.2.2 小鼠神經(jīng)功能評(píng)分
        2.2.3 小鼠體重變化
        2.2.4 脊髓切片的制備及病理染色
        2.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 小鼠神經(jīng)功能評(píng)分情況
        2.3.2 小鼠體重變化趨勢(shì)
        2.3.3 脊髓切片的制備及病理染色結(jié)果
    2.4 討論
    參考文獻(xiàn)
第三章 姜黃素對(duì)C57BL/6小鼠EAE模型的治療作用及具體機(jī)制的初步探索
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)藥物和試劑
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)分組及藥物干預(yù)
        3.2.2 EAE動(dòng)物模型的建立
        3.2.3 神經(jīng)功能癥狀評(píng)分
        3.2.4 腦脊髓切片的制備及病理染色
        3.2.5 免疫組織化學(xué)
        3.2.6 Western Blot檢測(cè)相關(guān)蛋白表達(dá)
        3.2.7 ELISA小鼠血清炎癥因子測(cè)定
        3.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 小鼠神經(jīng)功能評(píng)分情況
        3.3.2 組織病理學(xué)結(jié)果
        3.3.3 免疫組化測(cè)定姜黃素治療前后脊髓組織中AKT、mToR和LC3-Ⅱ表達(dá)情況
        3.3.4 WB測(cè)定姜黃素治療前后EAE小鼠AKT/mTOR自噬通路的變化
        3.3.5 姜黃素治療對(duì)EAE小鼠血清炎癥因子含量的影響
    3.4 討論
    參考文獻(xiàn)
第四章 結(jié)論
    4.1 主要結(jié)論
    4.2 展望
英文縮略一覽表
綜述 植物提取物在多發(fā)性硬化及其動(dòng)物模型中的應(yīng)用研究新進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
研究生期間成果
致謝
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本文編號(hào):3867062

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