目的研究羊膜和牙周膜來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞的免疫表型及干性基因表達(dá)的異同。方法取羊膜和牙周膜各3例,采用酶消化法分離細(xì)胞并進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng),獲取第3代人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞(hAMSCs)與人牙周膜干細(xì)胞(hPDLSCs),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)分子免疫表型,實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)干性標(biāo)志基因表達(dá)水平。結(jié)果原代培養(yǎng)的hAMSCs生長(zhǎng)速度快于hPDLSCs,后者形態(tài)均一;第2、3代細(xì)胞均生長(zhǎng)良好,每3天可傳代1次,第3代hAMSCs和hPDLSCs都為均一的長(zhǎng)梭形,呈旋渦狀排列,均高表達(dá)CD90、CD73、CD105和CD44,表達(dá)百分率高于98%;hAMSCs的CD34、CD19、CD45、CD11b、人類(lèi)白細(xì)胞抗原DR(HLA-DR)總陽(yáng)性表達(dá)率低于hPDLSCs(P<0.05)。兩種干細(xì)胞均不表達(dá)/低表達(dá)Sox2mRNA,而Nanog、Oct4和C-myc mRNA呈中高水平表達(dá),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 hAMSCs和hPDLSC具有相似的形態(tài)特征和免疫表型,且干性基因表達(dá)無(wú)明顯差異,hAMSCs的免疫原性可能更低,應(yīng)用前景較大。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑與儀器
    1.2 方法
        1.2.1 hAMSCs的分離和培養(yǎng)
        1.2.2 hPDLSCs的分離和培養(yǎng)
        1.2.3 流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞免疫表型
        1.2.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR）檢測(cè)干性基因表達(dá)水平
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 細(xì)胞生長(zhǎng)與形態(tài)觀察
    2.2 免疫表型變化
    2.3 4個(gè)干性基因mRNA表達(dá)水平
3 討論



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