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甘芍湯治療多囊卵巢綜合征模型大鼠的實驗研究

發(fā)布時間:2017-05-22 12:00

  本文關鍵詞:甘芍湯治療多囊卵巢綜合征模型大鼠的實驗研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:本實驗應用來曲唑建立多囊卵巢綜合征(PCOS)大鼠模型,造模成功后用甘芍湯劑對模型組大鼠進行干預,觀察其對性激素水平、血糖、肝臟轉(zhuǎn)氨酶及卵巢組織形態(tài)的影響,旨在通過動物實驗的方法研究甘芍湯劑對多囊卵巢綜合征的作用。方法:第一部分:選用70只42日齡SD清潔級有規(guī)律動情周期的雌性未孕大鼠,隨機分為對照組(1%CMC1ml/100g·d,共21d)20只、模型組(來曲唑1mg/kgd,共21d)50只,模型組用來曲唑(1mg/kgd,共21d)灌胃來建立多囊卵巢綜合征(PCOS)模型,每組大鼠每日行陰道涂片檢測動情周期變化,來曲唑干預3周后,應用剪尾采血法取血1-2ml離心后取血清,應用全自動生化分析儀檢測各組大鼠空腹血糖、血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST);應用化學發(fā)光法測定各組大鼠的性激素水平;隨機選取對照組與模型組各兩只大鼠取雙側卵巢,于10%的甲醛液中固定24小時后行石蠟切片及染色,在光鏡下觀察卵巢組織的形態(tài)學改變。第二部分:選取造模成功的大鼠完全隨機分為PCOS模型對照組(1%CMC1ml/100g·d,共21d)、西藥組即達英-35(炔雌醇環(huán)丙孕酮)(0.2mg/kgd,共21d)組和中藥組即甘芍湯劑組(20mg/kgd,共21d),每組15只,同期正常對照組(1%CMC1ml/100g·d,共21d)15只,各組相應藥物干預3周后用剪尾采血法取血1-2ml離心,取血清,檢測各組大鼠血清性激素水平、ALT、AST水平和空腹血糖;光鏡下觀察卵巢組織石蠟切片的改變。結果:1.自來曲唑建立PCOS大鼠模型第12天起,模型組大鼠陰道涂片在光鏡下角化細胞少見,可見大量白細胞,提示模型組大鼠處于動情間期、無排卵即失去規(guī)律的動情周期;造模結束后檢測各組大鼠血清性激素水平,模型組大鼠血清促黃體生成素(LH)為6.28±0.64m IU/ml、促卵泡生成素(FSH)為2.09±0.44m IU/ml、睪酮(T)為2.26±0.29ng/dl與對照組相比均有顯著升高(P0.05),而模型組雌二醇(E2)水平為55.21±5.83pg/ml、孕酮(P)18.56±2.95ng/ml與對照組相比均有顯著降低(P0.05),證實PCOS大鼠模型建立成功。2.中藥、西藥藥物干預后,中藥組(甘芍湯劑組)大鼠血清LH為3.91±0.47m IU/ml、睪酮T為1.32±0.27ng/dl、FSH水平為1.15±0.22m IU/ml各個指標與PCOS模型組比較下降明顯(P0.05);西藥組(達英-35組)大鼠血清LH為4.52±0.37m IU/ml、睪酮T為1.64±0.34ng/dl、FSH水平為1.15±0.22m IU/ml,與PCOS模型組比較下降明顯(P0.05);與PCOS模型組比較:中藥組血清E2為71.06±4.15pg/ml,P水平為28.46±1.91ng/ml明顯升高(P0.05);西藥組血清E2為67.01±2.87pg/ml、孕酮P水平為23.77±2.25ng/ml升高顯著(P0.05);與西藥組比較:中藥組大鼠血清LH及T水平降低有明顯差異(P0.05),血清E2、P水平升高有顯著性差異(P0.05),FSH水平無顯著性改變(P0.05)。3.卵巢組織形態(tài)學改變:與正常對照組比較:模型組大鼠卵巢包膜增厚、發(fā)白,表面可見多個泡狀結構;鏡下可見多數(shù)卵泡竇腔明顯增大,囊性擴張,卵泡內(nèi)卵母細胞及放射冠消失,顆粒細胞層數(shù)減少,可見少量黃體,多數(shù)未發(fā)育成熟的小卵泡,無成熟卵泡及排卵跡象;與模型對照組比較,甘芍湯劑組大鼠卵巢表面紅潤,白膜變薄;光鏡下可見大量發(fā)育成熟的卵泡,卵泡膜細胞層不厚,顆粒細胞層增厚,囊狀未成熟卵泡少見;達英-35組:卵巢外觀紅潤;鏡下可見成熟卵泡,部分卵泡結構清晰,多層顆粒細胞層形態(tài)完整,排列整齊,未見囊性卵泡,總的黃體和卵泡數(shù)量與PCOS模型組相比增多。4.血糖及轉(zhuǎn)氨酶水平變化:與正常對照組比較:PCOS模型對照組血糖為5.91±0.68mmol/L水平升高(P0.05),肝臟轉(zhuǎn)氨酶ALT為61.2±9.89U/L、AST水平為219.91±31.27U/L明顯升高(P0.05);與模型對照組比較:中藥組(甘芍湯劑組)大鼠血糖為4.90±1.06mmol/L,肝臟轉(zhuǎn)氨酶ALT為65.93±5.48U/L、AST水平為195.091±18.11U/L明顯升高(P0.05);與模型對照組比較:西藥組(達英-35組)大鼠血糖為5.08±0.63mmol/L水平降低明顯(P0.05),肝臟轉(zhuǎn)氨酶ALT水平下降71.47±3.11U/L(P0.05),AST水平為239±14.23U/L兩者比較無顯著差異(P0.05);與西藥組(達英-35組)比較,中藥組(甘芍湯劑組)肝臟轉(zhuǎn)氨酶水平降低有顯著性(P0.05),兩組血糖水平無明顯差異(P0.05)。5.大鼠體重變化選擇SD大鼠平均體重為160±2.5g,造模21天結束后對照組大鼠體重為180.33±2.58g,增長了17.87±3.81g模型組體重為195.4±4.64g,增長了32.91±5.19g。與對照組相比,模型組大鼠體重增加有明顯差異(P0.05),模型組大鼠體重增長幅度較大,兩者比較有明顯差異(P0.05)。中西藥藥物干預后;正常對照組大鼠體重為208.67±3.04g,模型對照組大鼠體重為213.47±3.02g,中藥組大鼠體重為208.53±3.18g西藥組大鼠體重為206.6±3.74g;模型對照組與正常對照組比體重增加有顯著性差異(P0.05),其余三組之間體重增加無明顯改變(P0.05)。結論:1.實驗結果證實,芳香化酶抑制劑來曲唑建立PCOS大鼠模型是一種可靠的、成功率高的、理想的建模方式;2甘芍湯可以使PCOS模型大鼠的血清性激素FSH、LH、T及血糖水平下降,可以促進卵泡發(fā)育成熟,改變卵巢組織的結構形態(tài),這可能是其影響內(nèi)分泌水平促進排卵的作用機制之一;3.甘芍湯劑組大鼠肝臟轉(zhuǎn)氨酶水平與模型對照組、西藥組(達英-35組)比較水平下降(P0.05),提示該湯劑不增加肝損傷,有保護大鼠肝臟的作用優(yōu)勢。
【關鍵詞】:多囊卵巢綜合征 動物模型 甘芍湯 來曲唑 達英-35
【學位授予單位】:山西中醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R271.9;R-332
【目錄】:
  • 中文摘要3-6
  • Abstract6-10
  • 英文縮略詞表10-13
  • 前言13-15
  • 第一部分 PCOS動物模型的建立15-28
  • 材料與方法15-21
  • 1.實驗動物15
  • 2.主要藥物與試劑15
  • 3.主要儀器15-16
  • 4.動物模型的建立及分組16-17
  • 5.標本的采集與處理17-18
  • 6.石蠟塊的制備18
  • 7.HE染色方法18-19
  • 8.性激素的測定19-20
  • 9.統(tǒng)計學方法20-21
  • 結果21-26
  • 討論26-28
  • 1.實驗動物的選擇26
  • 2.PCOS造模方法的選擇26-28
  • 第二部分 甘芍湯對多囊卵巢綜合征(PCOS)模型大鼠的性激素水平及卵巢組織形態(tài)的影響28-41
  • 材料與方法28-30
  • 1.實驗動物選擇與分組28
  • 2.主要試劑及儀器28
  • 3.給藥方式28
  • 4.標本采集與處理28-29
  • 5.性激素系列和血糖、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)的測定29
  • 6.石蠟塊的制備、HE染色29
  • 7.統(tǒng)計學方法29-30
  • 結果30-35
  • 討論35-41
  • 1.多囊卵巢綜合征性激素水平的改變35-36
  • 2.達英-35對PCOS的治療作用36-37
  • 3.甘芍湯劑對PCOS模型大鼠血清性激素水平及卵巢組織形態(tài)的影響37-40
  • 4.甘芍湯對PCOS模型組大鼠肝功能的影響40-41
  • 結論41-42
  • 參考文獻42-46
  • 附錄 中醫(yī)藥治療多囊卵巢綜合征新進展46-54
  • 參考文獻52-54
  • 致謝54-55
  • 作者簡歷55

【參考文獻】

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本文編號:385604

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