甘芍湯治療多囊卵巢綜合征模型大鼠的實(shí)驗(yàn)研究
本文關(guān)鍵詞:甘芍湯治療多囊卵巢綜合征模型大鼠的實(shí)驗(yàn)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用來(lái)曲唑建立多囊卵巢綜合征(PCOS)大鼠模型,造模成功后用甘芍湯劑對(duì)模型組大鼠進(jìn)行干預(yù),觀察其對(duì)性激素水平、血糖、肝臟轉(zhuǎn)氨酶及卵巢組織形態(tài)的影響,旨在通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的方法研究甘芍湯劑對(duì)多囊卵巢綜合征的作用。方法:第一部分:選用70只42日齡SD清潔級(jí)有規(guī)律動(dòng)情周期的雌性未孕大鼠,隨機(jī)分為對(duì)照組(1%CMC1ml/100g·d,共21d)20只、模型組(來(lái)曲唑1mg/kgd,共21d)50只,模型組用來(lái)曲唑(1mg/kgd,共21d)灌胃來(lái)建立多囊卵巢綜合征(PCOS)模型,每組大鼠每日行陰道涂片檢測(cè)動(dòng)情周期變化,來(lái)曲唑干預(yù)3周后,應(yīng)用剪尾采血法取血1-2ml離心后取血清,應(yīng)用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)各組大鼠空腹血糖、血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST);應(yīng)用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定各組大鼠的性激素水平;隨機(jī)選取對(duì)照組與模型組各兩只大鼠取雙側(cè)卵巢,于10%的甲醛液中固定24小時(shí)后行石蠟切片及染色,在光鏡下觀察卵巢組織的形態(tài)學(xué)改變。第二部分:選取造模成功的大鼠完全隨機(jī)分為PCOS模型對(duì)照組(1%CMC1ml/100g·d,共21d)、西藥組即達(dá)英-35(炔雌醇環(huán)丙孕酮)(0.2mg/kgd,共21d)組和中藥組即甘芍湯劑組(20mg/kgd,共21d),每組15只,同期正常對(duì)照組(1%CMC1ml/100g·d,共21d)15只,各組相應(yīng)藥物干預(yù)3周后用剪尾采血法取血1-2ml離心,取血清,檢測(cè)各組大鼠血清性激素水平、ALT、AST水平和空腹血糖;光鏡下觀察卵巢組織石蠟切片的改變。結(jié)果:1.自來(lái)曲唑建立PCOS大鼠模型第12天起,模型組大鼠陰道涂片在光鏡下角化細(xì)胞少見(jiàn),可見(jiàn)大量白細(xì)胞,提示模型組大鼠處于動(dòng)情間期、無(wú)排卵即失去規(guī)律的動(dòng)情周期;造模結(jié)束后檢測(cè)各組大鼠血清性激素水平,模型組大鼠血清促黃體生成素(LH)為6.28±0.64m IU/ml、促卵泡生成素(FSH)為2.09±0.44m IU/ml、睪酮(T)為2.26±0.29ng/dl與對(duì)照組相比均有顯著升高(P0.05),而模型組雌二醇(E2)水平為55.21±5.83pg/ml、孕酮(P)18.56±2.95ng/ml與對(duì)照組相比均有顯著降低(P0.05),證實(shí)PCOS大鼠模型建立成功。2.中藥、西藥藥物干預(yù)后,中藥組(甘芍湯劑組)大鼠血清LH為3.91±0.47m IU/ml、睪酮T為1.32±0.27ng/dl、FSH水平為1.15±0.22m IU/ml各個(gè)指標(biāo)與PCOS模型組比較下降明顯(P0.05);西藥組(達(dá)英-35組)大鼠血清LH為4.52±0.37m IU/ml、睪酮T為1.64±0.34ng/dl、FSH水平為1.15±0.22m IU/ml,與PCOS模型組比較下降明顯(P0.05);與PCOS模型組比較:中藥組血清E2為71.06±4.15pg/ml,P水平為28.46±1.91ng/ml明顯升高(P0.05);西藥組血清E2為67.01±2.87pg/ml、孕酮P水平為23.77±2.25ng/ml升高顯著(P0.05);與西藥組比較:中藥組大鼠血清LH及T水平降低有明顯差異(P0.05),血清E2、P水平升高有顯著性差異(P0.05),FSH水平無(wú)顯著性改變(P0.05)。3.卵巢組織形態(tài)學(xué)改變:與正常對(duì)照組比較:模型組大鼠卵巢包膜增厚、發(fā)白,表面可見(jiàn)多個(gè)泡狀結(jié)構(gòu);鏡下可見(jiàn)多數(shù)卵泡竇腔明顯增大,囊性擴(kuò)張,卵泡內(nèi)卵母細(xì)胞及放射冠消失,顆粒細(xì)胞層數(shù)減少,可見(jiàn)少量黃體,多數(shù)未發(fā)育成熟的小卵泡,無(wú)成熟卵泡及排卵跡象;與模型對(duì)照組比較,甘芍湯劑組大鼠卵巢表面紅潤(rùn),白膜變薄;光鏡下可見(jiàn)大量發(fā)育成熟的卵泡,卵泡膜細(xì)胞層不厚,顆粒細(xì)胞層增厚,囊狀未成熟卵泡少見(jiàn);達(dá)英-35組:卵巢外觀紅潤(rùn);鏡下可見(jiàn)成熟卵泡,部分卵泡結(jié)構(gòu)清晰,多層顆粒細(xì)胞層形態(tài)完整,排列整齊,未見(jiàn)囊性卵泡,總的黃體和卵泡數(shù)量與PCOS模型組相比增多。4.血糖及轉(zhuǎn)氨酶水平變化:與正常對(duì)照組比較:PCOS模型對(duì)照組血糖為5.91±0.68mmol/L水平升高(P0.05),肝臟轉(zhuǎn)氨酶ALT為61.2±9.89U/L、AST水平為219.91±31.27U/L明顯升高(P0.05);與模型對(duì)照組比較:中藥組(甘芍湯劑組)大鼠血糖為4.90±1.06mmol/L,肝臟轉(zhuǎn)氨酶ALT為65.93±5.48U/L、AST水平為195.091±18.11U/L明顯升高(P0.05);與模型對(duì)照組比較:西藥組(達(dá)英-35組)大鼠血糖為5.08±0.63mmol/L水平降低明顯(P0.05),肝臟轉(zhuǎn)氨酶ALT水平下降71.47±3.11U/L(P0.05),AST水平為239±14.23U/L兩者比較無(wú)顯著差異(P0.05);與西藥組(達(dá)英-35組)比較,中藥組(甘芍湯劑組)肝臟轉(zhuǎn)氨酶水平降低有顯著性(P0.05),兩組血糖水平無(wú)明顯差異(P0.05)。5.大鼠體重變化選擇SD大鼠平均體重為160±2.5g,造模21天結(jié)束后對(duì)照組大鼠體重為180.33±2.58g,增長(zhǎng)了17.87±3.81g模型組體重為195.4±4.64g,增長(zhǎng)了32.91±5.19g。與對(duì)照組相比,模型組大鼠體重增加有明顯差異(P0.05),模型組大鼠體重增長(zhǎng)幅度較大,兩者比較有明顯差異(P0.05)。中西藥藥物干預(yù)后;正常對(duì)照組大鼠體重為208.67±3.04g,模型對(duì)照組大鼠體重為213.47±3.02g,中藥組大鼠體重為208.53±3.18g西藥組大鼠體重為206.6±3.74g;模型對(duì)照組與正常對(duì)照組比體重增加有顯著性差異(P0.05),其余三組之間體重增加無(wú)明顯改變(P0.05)。結(jié)論:1.實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí),芳香化酶抑制劑來(lái)曲唑建立PCOS大鼠模型是一種可靠的、成功率高的、理想的建模方式;2甘芍湯可以使PCOS模型大鼠的血清性激素FSH、LH、T及血糖水平下降,可以促進(jìn)卵泡發(fā)育成熟,改變卵巢組織的結(jié)構(gòu)形態(tài),這可能是其影響內(nèi)分泌水平促進(jìn)排卵的作用機(jī)制之一;3.甘芍湯劑組大鼠肝臟轉(zhuǎn)氨酶水平與模型對(duì)照組、西藥組(達(dá)英-35組)比較水平下降(P0.05),提示該湯劑不增加肝損傷,有保護(hù)大鼠肝臟的作用優(yōu)勢(shì)。
【關(guān)鍵詞】:多囊卵巢綜合征 動(dòng)物模型 甘芍湯 來(lái)曲唑 達(dá)英-35
【學(xué)位授予單位】:山西中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R271.9;R-332
【目錄】:
- 中文摘要3-6
- Abstract6-10
- 英文縮略詞表10-13
- 前言13-15
- 第一部分 PCOS動(dòng)物模型的建立15-28
- 材料與方法15-21
- 1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物15
- 2.主要藥物與試劑15
- 3.主要儀器15-16
- 4.動(dòng)物模型的建立及分組16-17
- 5.標(biāo)本的采集與處理17-18
- 6.石蠟塊的制備18
- 7.HE染色方法18-19
- 8.性激素的測(cè)定19-20
- 9.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法20-21
- 結(jié)果21-26
- 討論26-28
- 1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇26
- 2.PCOS造模方法的選擇26-28
- 第二部分 甘芍湯對(duì)多囊卵巢綜合征(PCOS)模型大鼠的性激素水平及卵巢組織形態(tài)的影響28-41
- 材料與方法28-30
- 1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇與分組28
- 2.主要試劑及儀器28
- 3.給藥方式28
- 4.標(biāo)本采集與處理28-29
- 5.性激素系列和血糖、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)的測(cè)定29
- 6.石蠟塊的制備、HE染色29
- 7.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法29-30
- 結(jié)果30-35
- 討論35-41
- 1.多囊卵巢綜合征性激素水平的改變35-36
- 2.達(dá)英-35對(duì)PCOS的治療作用36-37
- 3.甘芍湯劑對(duì)PCOS模型大鼠血清性激素水平及卵巢組織形態(tài)的影響37-40
- 4.甘芍湯對(duì)PCOS模型組大鼠肝功能的影響40-41
- 結(jié)論41-42
- 參考文獻(xiàn)42-46
- 附錄 中醫(yī)藥治療多囊卵巢綜合征新進(jìn)展46-54
- 參考文獻(xiàn)52-54
- 致謝54-55
- 作者簡(jiǎn)歷55
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):385604
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