基于斑馬魚模型,探討熊果酸(ursolic acid,UA)對斑馬魚非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的治療作用,研究其對NAFLD治療的分子學(xué)機(jī)制。隨機(jī)挑選野生型AB品系斑馬魚分為正常組,模型組,熊果酸組(5、10、20μg/mL)。正常組給予3.5%葡萄糖,模型組給予3.5%果糖96 h,誘導(dǎo)斑馬魚非酒精性脂肪肝模型。向3.5%果糖的培養(yǎng)液中分別給予相應(yīng)低、中、高濃度的熊果酸液作為給藥組,每天進(jìn)行1次換液,連續(xù)96 h。收集幼魚,檢測幼魚體重、體長以及肥滿度(condition factor)以反映幼魚的肥瘦程度,進(jìn)行整體油紅O染色、蘇木素-伊紅(HE)染色觀察肝臟脂質(zhì)變性情況和病理組織學(xué)損傷程度,甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)試劑盒檢測斑馬魚體脂含量,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測肝組織mTOR/SREBP-1c/ACC1/Fasn mRNA的表達(dá)。與正常組比較,模型組斑馬魚肝臟脂質(zhì)沉積程度嚴(yán)重,斑馬魚體內(nèi)TG、TC及mTOR、SREBP-1c、ACC1、Fasn mRNA的表達(dá)量均上升(P<0....

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【文章目錄】：
1 材料
    1.1 試劑和儀器
    1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.3 斑馬魚模型的構(gòu)建及分組
2 方法
    2.1 斑馬魚肥滿度的測定
    2.2 整體油紅O染色
    2.3 TG、TC含量的測定
    2.4 肝臟蘇木素-伊紅染色(HE)染色
    2.5 mTOR、SREBP-1c、ACC1和Fasn mRNA表達(dá)水平檢測
    2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3 結(jié)果
    3.1 斑馬魚肥滿度的測定
    3.2 斑馬魚整體油紅O染色
    3.3 斑馬魚整體TG和TC含量的測定
    3.4 斑馬魚肝組織HE染色結(jié)果
    3.5 斑馬魚體內(nèi)mTOR、SREBP-1c、ACC1和Fasn mRNA的表達(dá)水平結(jié)果
4 討論與結(jié)論



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