果蠅Mre11精氨酸突變動物模型的建立及G2/M檢驗點檢測
發(fā)布時間:2023-02-05 16:14
在生物體中,DNA不斷受到內(nèi)源和外源損傷因子的威脅。為了保護(hù)遺傳信息的完整,細(xì)胞在生物進(jìn)化過程中形成了一整套復(fù)雜的監(jiān)控網(wǎng)絡(luò),用以監(jiān)測基因組的完整性,稱為DNA損傷應(yīng)答。該網(wǎng)絡(luò)監(jiān)測DNA損傷的存在,傳遞損傷信號,實現(xiàn)多步的生物學(xué)反應(yīng),包括細(xì)胞周期阻滯、DNA損傷修復(fù)、端粒維持和細(xì)胞凋亡等。MRN復(fù)合物(酵母中MRX)由Mre11、Rad50和Nbs1(Xrs2)組成,是DNA損傷應(yīng)答的一個關(guān)鍵組成部分,參與細(xì)胞周期檢驗點和損傷修復(fù)的各個方面。MRN復(fù)合物可以結(jié)合在染色體DNA上,識別雙鏈斷裂,發(fā)出損傷信號,并在DNA修復(fù)起著重要的作用。研究表明,MRN復(fù)合物突變會導(dǎo)致腫瘤或衰老相關(guān)疾病的發(fā)生。Mre11是MRN復(fù)合物極其重要的成員之一。到目前為止,關(guān)于Mre11的結(jié)構(gòu)和功能已經(jīng)進(jìn)行了大量的研究。Mre11是一種高度保守的70 k Da大小的蛋白,它的N端具有Mn2+/Mg2+依賴性磷酸酯酶結(jié)構(gòu)域,中部具有一個DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域,C端含有一個甘氨酸-精氨酸富集區(qū)(Glycine and Arginine-Rich,GAR)。Mre11的主要功能包括...
【文章頁數(shù)】:56 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
一、材料
1. 果蠅株
2. 果蠅飼養(yǎng)食材
3. 實驗試劑
4. 緩沖液配制
5. 實驗儀器
6. 引物
7. 軟件
二、方法
1. 果蠅食物的配制
2. 果蠅胚胎的收集
3. mre11突變果蠅的建立
4. 單只果蠅PCR檢測
5. PCR
6. 果蠅基因組 DNA 的提取
7. 基因組DNA的瓊脂糖凝膠電泳
8. Southern Blot檢測
9. 果蠅RNA提取
10. 反轉(zhuǎn)錄法合成cDNA
11. 果蠅存活率檢測
12. 果蠅G2/M檢驗點檢測
結(jié)果
1. mre11突變中間體果蠅的建立
2. mre11突變果蠅的建立
3. mre11突變果蠅的DNA損傷敏感性實驗
4. mre11突變果蠅的G2/M檢驗點檢測
討論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號:3735281
【文章頁數(shù)】:56 頁
【學(xué)位級別】:碩士
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中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
一、材料
1. 果蠅株
2. 果蠅飼養(yǎng)食材
3. 實驗試劑
4. 緩沖液配制
5. 實驗儀器
6. 引物
7. 軟件
二、方法
1. 果蠅食物的配制
2. 果蠅胚胎的收集
3. mre11突變果蠅的建立
4. 單只果蠅PCR檢測
5. PCR
6. 果蠅基因組 DNA 的提取
7. 基因組DNA的瓊脂糖凝膠電泳
8. Southern Blot檢測
9. 果蠅RNA提取
10. 反轉(zhuǎn)錄法合成cDNA
11. 果蠅存活率檢測
12. 果蠅G2/M檢驗點檢測
結(jié)果
1. mre11突變中間體果蠅的建立
2. mre11突變果蠅的建立
3. mre11突變果蠅的DNA損傷敏感性實驗
4. mre11突變果蠅的G2/M檢驗點檢測
討論
參考文獻(xiàn)
綜述
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本文編號:3735281
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