HSP70在TGF-β誘導(dǎo)A549細(xì)胞EMT進(jìn)程中的作用
發(fā)布時(shí)間:2023-01-31 06:18
背景與目的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是上皮細(xì)胞失去其特性,進(jìn)而獲得間質(zhì)細(xì)胞的特性。EMT的發(fā)生在胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、纖維化的發(fā)生中具有重要作用。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的主要原因是肺組織上皮細(xì)胞受到刺激,尤其是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(transforming growth factor,TGF-β)的刺激后,上皮細(xì)胞異常修復(fù),發(fā)生間充質(zhì)轉(zhuǎn)化。而上皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化的過程中,形成的中間細(xì)胞形態(tài)肌成纖維細(xì)胞分泌細(xì)胞外基質(zhì)蛋白(extracellular matrix,ECM),造成過度沉積,最終導(dǎo)致肺功能失調(diào)。TGF-β屬于多功能的細(xì)胞因子,是體外構(gòu)建EMT模型的經(jīng)典細(xì)胞因子。當(dāng)細(xì)胞受到缺血、過高熱、毒素、病毒性顆粒等刺激時(shí),合成一組高度保守的蛋白,被稱為“熱休克蛋白”(heat shock proteins,HSP),HSP70是HSP家族的核心成員。最近有研究表明,在臨床上被用于治療胃潰瘍的藥物—替普瑞酮(geranylgeranylacetone,GGA),作為無毒的HSP70的誘導(dǎo)劑被報(bào)道證實(shí)。因此,本實(shí)驗(yàn)通過TGF-β刺激A549細(xì)...
【文章頁數(shù)】:68 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
中英文縮略詞表
1 引言
2 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 細(xì)胞來源
2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
2.1.3 實(shí)驗(yàn)器材
2.2 方法
2.2.1 主要試劑的配制
2.2.2 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的主要方法
2.2.3 免疫印跡法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)蛋白的表達(dá)
2.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
3.1 TGF-β刺激A549細(xì)胞構(gòu)建EMT模型
3.2 篩選GGA誘導(dǎo)HSP70的最優(yōu)濃度及最佳時(shí)間
3.2.1 GGA最優(yōu)濃度的篩選
3.2.2 GGA最佳時(shí)間篩選
3.3 GGA對(duì)EMT模型的影響
3.3.1 GGA(50μmol/L)對(duì)EMT模型的影響
3.3.2 GGA(200μmol/L)對(duì)EMT模型的影響
3.4 GGA對(duì)細(xì)胞形態(tài)的影響
3.4.1 GGA(50μmol/L)對(duì)細(xì)胞形態(tài)的影響
3.4.2 GGA(200μmol/L)對(duì)細(xì)胞形態(tài)的影響
3.5 HSP70對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響
3.5.1 GGA(50μmol/L)對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響
3.5.2 GGA(200μmol/L)對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響
4 討論
4.1 TGF-β刺激A549細(xì)胞構(gòu)建EMT模型
4.2 篩選GGA誘導(dǎo)HSP70的最優(yōu)濃度及最佳時(shí)間
4.3 HSP70對(duì)EMT模型的影響
4.4 HSP70對(duì)細(xì)胞形態(tài)的影響
4.5 HSP70對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 HSP70與疾病的關(guān)系
1 熱休克蛋白家族
2 HSP70家族
3 HSP70與癌癥的關(guān)系
4 HSP70與神經(jīng)系統(tǒng)疾病的關(guān)系
5 HSP70與糖尿病
6 HSP70與其他疾病
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在非小細(xì)胞肺癌EGFR-TKIs耐藥中的研究進(jìn)展[J]. 虞莉,黃沙,呂望,何哲浩,胡堅(jiān). 中國(guó)肺癌雜志. 2018(12)
[2]腦缺血再灌注損傷與還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶的關(guān)系及其研究進(jìn)展[J]. 施成彰,沈建,詹仁雅. 中華危重癥醫(yī)學(xué)雜志(電子版). 2017(06)
[3]非吞噬細(xì)胞氧化酶4在轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β誘導(dǎo)A549細(xì)胞遷移中的作用[J]. 薛騰,徐小艷,夏艷秋,任亞南,燕貞,姚武,周舫. 衛(wèi)生研究. 2017(04)
本文編號(hào):3733774
【文章頁數(shù)】:68 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
中英文縮略詞表
1 引言
2 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 細(xì)胞來源
2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
2.1.3 實(shí)驗(yàn)器材
2.2 方法
2.2.1 主要試劑的配制
2.2.2 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的主要方法
2.2.3 免疫印跡法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)蛋白的表達(dá)
2.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
3.1 TGF-β刺激A549細(xì)胞構(gòu)建EMT模型
3.2 篩選GGA誘導(dǎo)HSP70的最優(yōu)濃度及最佳時(shí)間
3.2.1 GGA最優(yōu)濃度的篩選
3.2.2 GGA最佳時(shí)間篩選
3.3 GGA對(duì)EMT模型的影響
3.3.1 GGA(50μmol/L)對(duì)EMT模型的影響
3.3.2 GGA(200μmol/L)對(duì)EMT模型的影響
3.4 GGA對(duì)細(xì)胞形態(tài)的影響
3.4.1 GGA(50μmol/L)對(duì)細(xì)胞形態(tài)的影響
3.4.2 GGA(200μmol/L)對(duì)細(xì)胞形態(tài)的影響
3.5 HSP70對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響
3.5.1 GGA(50μmol/L)對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響
3.5.2 GGA(200μmol/L)對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響
4 討論
4.1 TGF-β刺激A549細(xì)胞構(gòu)建EMT模型
4.2 篩選GGA誘導(dǎo)HSP70的最優(yōu)濃度及最佳時(shí)間
4.3 HSP70對(duì)EMT模型的影響
4.4 HSP70對(duì)細(xì)胞形態(tài)的影響
4.5 HSP70對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 HSP70與疾病的關(guān)系
1 熱休克蛋白家族
2 HSP70家族
3 HSP70與癌癥的關(guān)系
4 HSP70與神經(jīng)系統(tǒng)疾病的關(guān)系
5 HSP70與糖尿病
6 HSP70與其他疾病
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在非小細(xì)胞肺癌EGFR-TKIs耐藥中的研究進(jìn)展[J]. 虞莉,黃沙,呂望,何哲浩,胡堅(jiān). 中國(guó)肺癌雜志. 2018(12)
[2]腦缺血再灌注損傷與還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶的關(guān)系及其研究進(jìn)展[J]. 施成彰,沈建,詹仁雅. 中華危重癥醫(yī)學(xué)雜志(電子版). 2017(06)
[3]非吞噬細(xì)胞氧化酶4在轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β誘導(dǎo)A549細(xì)胞遷移中的作用[J]. 薛騰,徐小艷,夏艷秋,任亞南,燕貞,姚武,周舫. 衛(wèi)生研究. 2017(04)
本文編號(hào):3733774
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