目的:探討核因子E2相關因子2（Nrf2）-抗氧化反應元件（ARE）通路在缺氧后處理和吡那地爾后處理減輕大鼠心肌細胞缺氧復氧損傷中的作用。方法:建立成年大鼠心肌細胞缺氧復氧模型,分離、培養(yǎng)心肌細胞,隨機分為6組（n=8）:正常組（N組）、模型組（M組）、缺氧后處理組（IPO組）和不同濃度吡那地爾后處理組（P25組、P50組和P100組）。分離后的心肌細胞培養(yǎng)20 h后,除N組繼續(xù)培養(yǎng)外,其余各組均缺氧45 min,復氧60min。IPO組缺氧45 min后復氧、缺氧循環(huán)3次,每次各5 min,在繼續(xù)復氧60 min;P25組、P50組和P100組缺氧45 min后分別以25、50和100μmol/L吡那地爾處理5 min,復氧60 min。采用real-time PCR及Western blotting技術檢測復氧末心肌細胞中Nrf2、血紅素加氧酶1（HO-1）、NAD（P）H:醌氧化還原酶1（NQO1）和超氧化物歧化酶1（SOD1）mRNA及蛋白表達水平。結果:與N組比較,其它各組與Nrf2、NQO1、SOD1及HO-1的mRNA及蛋白質表達均降低（P＜0.05）;與M組比較,其它各... 

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【文章目錄】：
材料和方法
    1 材料
        1.1 動物選擇和分組
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2 方法
        2.1 分離培養(yǎng)成年大鼠心肌細胞
        2.2 心肌細胞缺氧復氧模型的建立
        2.3 透射電鏡下觀察心肌細胞超微結構
        2.4 Real-time PCR檢測心肌細胞Nrf2、血紅素加氧
        2.5 Westem blotting法檢測Nrf2、HO-1、NQO1和SOD1蛋白的表達
    3 統(tǒng)計學處理
結果
    1缺氧/吡那地爾后處理對細胞超微結構的影響
    2缺氧/吡那地爾后處理對細胞Nrf2、NQO1、SOD1及HO-1 m RNA表達的影響
    3 缺氧/吡那地爾后處理對細胞Nrf2、NQO1、SOD1及HO-1蛋白表達的影響
討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]抗氧化應激轉錄因子-Nrf2的研究進展[J]. 林曉萍,李雯,沈華浩.  中國病理生理雜志. 2011(06)



本文編號：3727658