目的:探討核因子E2相關(guān)因子2（Nrf2）-抗氧化反應(yīng)元件（ARE）通路在缺氧后處理和吡那地爾后處理減輕大鼠心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷中的作用。方法:建立成年大鼠心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧模型,分離、培養(yǎng)心肌細(xì)胞,隨機(jī)分為6組（n=8）:正常組（N組）、模型組（M組）、缺氧后處理組（IPO組）和不同濃度吡那地爾后處理組（P25組、P50組和P100組）。分離后的心肌細(xì)胞培養(yǎng)20 h后,除N組繼續(xù)培養(yǎng)外,其余各組均缺氧45 min,復(fù)氧60min。IPO組缺氧45 min后復(fù)氧、缺氧循環(huán)3次,每次各5 min,在繼續(xù)復(fù)氧60 min;P25組、P50組和P100組缺氧45 min后分別以25、50和100μmol/L吡那地爾處理5 min,復(fù)氧60 min。采用real-time PCR及Western blotting技術(shù)檢測復(fù)氧末心肌細(xì)胞中Nrf2、血紅素加氧酶1（HO-1）、NAD（P）H:醌氧化還原酶1（NQO1）和超氧化物歧化酶1（SOD1）mRNA及蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:與N組比較,其它各組與Nrf2、NQO1、SOD1及HO-1的mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)均降低（P＜0.05）;與M組比較,其它各... 

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
材料和方法
    1 材料
        1.1 動物選擇和分組
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2 方法
        2.1 分離培養(yǎng)成年大鼠心肌細(xì)胞
        2.2 心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧模型的建立
        2.3 透射電鏡下觀察心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)
        2.4 Real-time PCR檢測心肌細(xì)胞Nrf2、血紅素加氧
        2.5 Westem blotting法檢測Nrf2、HO-1、NQO1和SOD1蛋白的表達(dá)
    3 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié)果
    1缺氧/吡那地爾后處理對細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響
    2缺氧/吡那地爾后處理對細(xì)胞Nrf2、NQO1、SOD1及HO-1 m RNA表達(dá)的影響
    3 缺氧/吡那地爾后處理對細(xì)胞Nrf2、NQO1、SOD1及HO-1蛋白表達(dá)的影響
討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]抗氧化應(yīng)激轉(zhuǎn)錄因子-Nrf2的研究進(jìn)展[J]. 林曉萍,李雯,沈華浩.  中國病理生理雜志. 2011(06)



本文編號：3727658