發(fā)布時(shí)間：2022-09-30 13:45

　　背景:Elabela是近幾年發(fā)現(xiàn)的新型APJ內(nèi)源性受體,在成人心血管系統(tǒng)中廣泛分布,對(duì)心血管疾病也有一定的影響,但是Elabela在干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化過(guò)程中的作用以及分化過(guò)程中對(duì)APJ表達(dá)量的影響尚未發(fā)現(xiàn)相關(guān)研究。目的:探討Elabela對(duì)臍帶華通膠間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化的影響。方法:復(fù)蘇凍存的臍帶華通膠間充質(zhì)干細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到80%-90%時(shí),使用5-氮胞苷使其向心肌樣細(xì)胞分化,24 h后實(shí)驗(yàn)組更換為含Elabela、體積分?jǐn)?shù)為10%胎牛血清的低糖DMEM培養(yǎng)基,對(duì)照組更換為含體積分?jǐn)?shù)為10%胎牛血清的低糖DMEM培養(yǎng)基。誘導(dǎo)第7,14,21,28天,觀察細(xì)胞形態(tài)變化,同時(shí)收集各組細(xì)胞的總RNA和總蛋白,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot技術(shù)檢測(cè)心肌特異性標(biāo)記物Nkx2.5、c TnT、Connexin43mRNA及蛋白表達(dá);采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)誘導(dǎo)后的心肌樣細(xì)胞中APJ的表達(dá)。結(jié)果與結(jié)論:①在誘導(dǎo)分化各階段,實(shí)驗(yàn)組心肌特異性標(biāo)記物Nkx2.5、cTnT、Connexin43 mRNA和蛋白表達(dá)量均高于對(duì)照組,APJ表達(dá)量也高... 

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【文章目錄】：
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文題釋義：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設(shè)計(jì)
    1.2 時(shí)間及地點(diǎn)
    1.3 材料
    1.4 實(shí)驗(yàn)方法
        1.4.1 臍帶華通膠間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)和傳代
        1.4.2 臍帶華通膠間充質(zhì)干細(xì)胞定向心肌樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化
        1.4.3 Real-Time PCR檢測(cè)各組細(xì)胞心肌特異性mRNA的表達(dá)
        1.4.4 Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞心肌特異性蛋白的表達(dá)
        1.4.5流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)目的基因APJ的表達(dá)
    1.5 主要觀察指標(biāo)
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果Results
    2.1 臍帶華通膠間充質(zhì)干細(xì)胞定向心肌樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化
    2.2 誘導(dǎo)分化不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)心肌特異性標(biāo)志物mRNA表達(dá)
    2.3 誘導(dǎo)分化不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)心肌特異性標(biāo)志蛋白表達(dá)
    2.4 誘導(dǎo)分化各階段目的基因APJ mRNA表達(dá)以及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)目的基因APJ表達(dá)
3 討論Discussion


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Apelin13對(duì)人胚胎干細(xì)胞定向心肌細(xì)胞分化效率的影響[J]. 程濤,陳宇,張寧坤,高連如,王澤,張燕.  山東醫(yī)藥. 2017(33)
[2]Apelin-13對(duì)5-Aza誘導(dǎo)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化的影響[J]. 徐小紅,王力,張寧坤,鄭楠,高連如,朱智明.  解放軍醫(yī)學(xué)雜志. 2013(10)



本文編號(hào)：3683658