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白紋伊蚊雄性決定基因AalNix功能的研究與非缺陷型重組蚊濃核病毒的構(gòu)建和效果測(cè)試

發(fā)布時(shí)間:2022-09-17 16:18
  研究背景:伊蚊傳播的疾病,如登革熱,寨卡和基孔肯雅熱,正在成為全球重大的公共衛(wèi)生突發(fā)事件,而黃熱病等舊的威脅也正在重新出現(xiàn)。白紋伊蚊作為一種重要的傳病媒介,已經(jīng)擴(kuò)散到除南極洲以外的其他大陸,呈現(xiàn)全球擴(kuò)散的嚴(yán)峻態(tài)勢(shì),已經(jīng)成為最危險(xiǎn)的100種入侵物種之一。由于缺乏安全有效的疫苗和特效藥物,長(zhǎng)期以來蚊媒種群防制是蚊媒傳染病防控的關(guān)鍵部分,蚊媒種群防制主要有種群減少和種群替換。種群減少的主要手段就是通過施用化學(xué)殺蟲劑來減少蚊媒種群或通過去除幼蟲孳生地來防止蚊蟲繁殖。然而隨著化學(xué)殺蟲劑的大量使用,蚊蟲對(duì)殺蟲劑抗性的相繼升高,近年來蚊媒傳染病的感染率逐年攀升,環(huán)境污染等問題也相繼出現(xiàn)。由于蚊濃核病毒(Mosquitodensovirus,MDV)特異感染蚊類及其生活史的特性,讓其具有成為高效安全生物殺蚊劑的潛力。發(fā)展MDV為新型生物殺蚊劑將為蚊媒傳染病的生物防制提供一種新的思路。由于野生型MDV存在作用時(shí)間長(zhǎng),毒性弱的特點(diǎn),對(duì)其進(jìn)行基因重組,增強(qiáng)對(duì)蚊蟲的致病性是一種可行的辦法。前期的研究中,在MDV中引入了蝎毒基因和小干擾RNA以增強(qiáng)殺蚊效果,然而隨著外源基因的引入,該病毒也喪失了自主復(fù)制能力,而... 

【文章頁數(shù)】:136 頁

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一部分 非缺陷型重組蚊濃核病毒的構(gòu)建和效果測(cè)試
    前言
    第一章 介導(dǎo)內(nèi)源性miRNA, miRNA海綿和amiRNAs表達(dá)的內(nèi)含子設(shè)計(jì)和重組病毒載體構(gòu)建
        1.材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.結(jié)果
        4.討論
        5.小結(jié)
    第二章 重組蚊濃核病毒體內(nèi)外效果測(cè)試
        1.材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.結(jié)果
        4.討論
        5.小結(jié)
    第三章 重組蚊濃核病毒穩(wěn)定性測(cè)試
        1.材料
        2.實(shí)驗(yàn)方法
        3.結(jié)果
        4.討論
        5.小結(jié)
第二部分 白紋伊蚊雄性決定基因AalNix功能的研究
    前言
    第一章 AalNix的發(fā)育表達(dá)譜分析和功能預(yù)測(cè)
        1.材料
        2.方法
        3.結(jié)果
        4.結(jié)論
        5.小結(jié)
    第二章 應(yīng)用CRISPR/Cas9技術(shù)分析C6/36細(xì)胞中AalNix的功能
        1.材料
        2.方法
        3.結(jié)果
        4.討論
        5.小結(jié)
    第三章 AalNix敲除導(dǎo)致雄性白紋伊蚊內(nèi)生殖器畸形和雌性化
        1.材料
        2.方法
        3.結(jié)果
        4.討論
        5.小結(jié)
附錄
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間成果



本文編號(hào):3679557

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