本文旨在探討胰島素對大鼠骨骼肌成肌細胞增殖的影響。分離和培養(yǎng)大鼠骨骼肌成肌細胞,用胰島素作用于培養(yǎng)的骨骼肌成肌細胞,采用3H-TdR滲入法、BrdU檢測法、MTT實驗分析檢測骨骼肌成肌細胞的增殖情況,用Western blot檢測Akt和ERK的磷酸化水平,同時使用PI3K和MEK特異性抑制劑干預胰島素對骨骼肌成肌細胞的增殖作用影響。結(jié)果顯示,胰島素能明顯促進骨骼肌成肌細胞對3H-TdR的攝入,促進細胞的DNA合成和增殖,并且胰島素促細胞增殖作用具有一定的量效關系,骨骼肌成肌細胞原代細胞和成肌細胞株L6、C2C12都顯示該促增殖作用可被PI3K和MEK特異性抑制劑阻斷,胰島素還提高了骨骼肌成肌細胞Akt和ERK的磷酸化水平。本研究證實胰島素可能通過PI3K/Akt和MEK/ERK信號通路促進骨骼肌成肌細胞增殖。 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
        1.1.1 主要設備, 試劑及細胞
    1.2 方法
        1.2.1 成肌細胞的分離與培養(yǎng)
        1.2.2 大鼠骨骼肌成肌細胞免疫熒光細胞化學鑒定
        1.2.3 細胞分組
        1.2.4 MTT實驗分析
        1.2.5 3H-TdR滲入法
        1.2.6 BrdU檢測法
        1.2.7 Western blot檢測Akt和ERK的磷酸化水平
        1.2.8 統(tǒng)計方法
2 結(jié)果
    2.1 大鼠骨骼肌成肌細胞免疫細胞化學鑒定結(jié)果
    2.2 胰島素促進骨骼肌成肌細胞DNA合成
    2.3 胰島素對骨骼肌成肌細胞的促增殖作用
    2.4 MEK1/2特異性活性抑制劑U0126和PI3K抑制劑wortmannin抑制胰島素對大鼠骨骼肌成肌細胞DNA的合成
    2.5 胰島素上調(diào)骨骼肌成肌細胞中Akt和ERK磷酸化水平
    2.6 Wortmannin和U0126抑制了胰島素促進細胞株L6及C2C12的DNA合成
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]新生SD大鼠成肌細胞體外培養(yǎng)的實驗研究[J]. 黃桂林,李龍江,溫玉明,王昌美,謝文楊.  實用口腔醫(yī)學雜志. 2003(01)



本文編號：3672497