背景:胚胎受精和早期胚胎培養(yǎng)是輔助生殖技術(shù)中重要的一部分,然而近幾十年來(lái)胚胎培養(yǎng)技術(shù)卻基本沒(méi)有更新,因此胚胎受精和早期胚胎培養(yǎng)的條件成為了限制輔助生殖技術(shù)發(fā)展的一個(gè)瓶頸。目的:構(gòu)建基于微流控芯片來(lái)模擬體內(nèi)受精及早期胚胎發(fā)育環(huán)境的仿真輸卵管模型。方法:采用軟光刻法制作微流控芯片,使芯片微通道在形狀上符合輸卵管的解剖結(jié)構(gòu);組織消化貼壁法進(jìn)行小鼠輸卵管原代上皮細(xì)胞的培養(yǎng)和提純;用角蛋白免疫熒光法對(duì)提純后的小鼠輸卵管原代上皮細(xì)胞進(jìn)行鑒定,并將鑒定后的上皮細(xì)胞種植在微流控芯片通道內(nèi)壁上以模擬輸卵管生化環(huán)境;將芯片接入自動(dòng)換液裝置以模擬輸卵管液流環(huán)境。結(jié)果與結(jié)論:①這款輸卵管模型呈圓柱狀,長(zhǎng)度為2cm,直徑為1cm,在形狀上與體內(nèi)輸卵管峽部的解剖學(xué)特征比較相符合;②角蛋白免疫熒光結(jié)果為陽(yáng)性,提示組織消化貼壁法可分離培養(yǎng)出小鼠輸卵管原代上皮細(xì)胞;③提純后的小鼠輸卵管原代上皮細(xì)胞種植在模型內(nèi)壁,為胚胎的受精和早期培養(yǎng)提供了與體內(nèi)微環(huán)境類(lèi)似的生化環(huán)境。微流控芯片接入自動(dòng)換液裝置后,通道內(nèi)的代謝廢物能被及時(shí)帶走,新的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)得以補(bǔ)充,實(shí)現(xiàn)了對(duì)輸卵管真實(shí)流體環(huán)境的模擬;④研究將微流控芯片應(yīng)用于輔助生殖技術(shù),... 

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]小鼠輸卵管上皮細(xì)胞的原代培養(yǎng)及純化方法研究[J]. 趙曉娥,蘭杰,王妍,楊培先,胡林勇,馬保華.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2009(02)
[2]改良人輸卵管上皮細(xì)胞培養(yǎng)法及電鏡觀察[J]. 毛跟紅,高穎,李紅發(fā),趙虹,沈怡,閔潔.  生殖醫(yī)學(xué)雜志. 2005(02)



本文編號(hào)：3671804