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適配體捕獲磁珠富集大腸埃希菌O157:H7方法的建立

發(fā)布時間:2022-07-16 19:37
  目的建立一種低濃度大體積樣品中快速捕獲富集大腸埃希菌O157:H7的方法。方法利用鏈霉親和素-生物素結(jié)合特性,將生物素標記大腸埃希菌O157:H7特異性適配體與鏈霉親和素磁珠相結(jié)合,制備捕獲磁珠,捕獲樣品中的大腸埃希菌O157:H7,通過平板培養(yǎng)計數(shù)法檢測捕獲效率。結(jié)果通過優(yōu)化反應條件,建立的適配體捕獲磁珠富集法在O157:H7低濃度樣品(10~3cfu/ml)中捕獲效率≥92.49%,大腸埃希菌O157:H7濃度10~1cfu/ml時捕獲效率為96.08%,高濃度樣品(10~7cfu/ml)中捕獲效率≥56.52%,在模擬實際樣品(牛奶、果汁、汽水)中捕獲效率均≥70%,與PCR法結(jié)果一致。結(jié)論基于免疫磁珠技術(shù)建立的大腸埃希菌快速捕獲富集方法,具有特異性強、靈敏度高操作簡單、成本低廉等特點,在實際檢測中具有良好發(fā)展前景。 

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
材料與方法
    1 材料
        1.1 菌株
        1.2 主要試劑
    2 方法
        2.1 細菌培養(yǎng)
        2.2 捕獲磁珠的制備
        2.3 適配體偶聯(lián)濃度的確定
        2.4 捕獲磁珠與大腸埃希菌O157:
        2.5 捕獲磁珠對不同濃度大腸埃希菌O157:H7的捕獲效率
        2.6 捕獲磁珠對模擬樣品中大腸埃希菌O157:H7的檢測
結(jié)果
    1最佳捕獲磁珠適配體濃度
    2大腸埃希菌O157:H7同捕獲磁珠最佳孵育時間
    3 捕獲磁珠對大腸埃希菌O157:H7的敏感性
    4 模擬樣品檢測
討論


【參考文獻】:
期刊論文
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[3]基于熒光微球的免疫層析法結(jié)合免疫磁珠分離技術(shù)快速定量檢測鼠傷寒沙門氏菌[J]. 李倩茹,胡霏,楊悅熙,劉曉云,何小維.  現(xiàn)代食品科技. 2018(03)
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本文編號:3663156

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