適配體捕獲磁珠富集大腸埃希菌O157:H7方法的建立
發(fā)布時間:2022-07-16 19:37
目的建立一種低濃度大體積樣品中快速捕獲富集大腸埃希菌O157:H7的方法。方法利用鏈霉親和素-生物素結(jié)合特性,將生物素標記大腸埃希菌O157:H7特異性適配體與鏈霉親和素磁珠相結(jié)合,制備捕獲磁珠,捕獲樣品中的大腸埃希菌O157:H7,通過平板培養(yǎng)計數(shù)法檢測捕獲效率。結(jié)果通過優(yōu)化反應條件,建立的適配體捕獲磁珠富集法在O157:H7低濃度樣品(10~3cfu/ml)中捕獲效率≥92.49%,大腸埃希菌O157:H7濃度10~1cfu/ml時捕獲效率為96.08%,高濃度樣品(10~7cfu/ml)中捕獲效率≥56.52%,在模擬實際樣品(牛奶、果汁、汽水)中捕獲效率均≥70%,與PCR法結(jié)果一致。結(jié)論基于免疫磁珠技術(shù)建立的大腸埃希菌快速捕獲富集方法,具有特異性強、靈敏度高操作簡單、成本低廉等特點,在實際檢測中具有良好發(fā)展前景。
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
材料與方法
1 材料
1.1 菌株
1.2 主要試劑
2 方法
2.1 細菌培養(yǎng)
2.2 捕獲磁珠的制備
2.3 適配體偶聯(lián)濃度的確定
2.4 捕獲磁珠與大腸埃希菌O157:
2.5 捕獲磁珠對不同濃度大腸埃希菌O157:H7的捕獲效率
2.6 捕獲磁珠對模擬樣品中大腸埃希菌O157:H7的檢測
結(jié)果
1最佳捕獲磁珠適配體濃度
2大腸埃希菌O157:H7同捕獲磁珠最佳孵育時間
3 捕獲磁珠對大腸埃希菌O157:H7的敏感性
4 模擬樣品檢測
討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]基于表面增強拉曼光譜法快速檢測細菌抗生素敏感性的研究[J]. 付世杰,李磊嬌,聶鑫,王習文,李志萍,曲晗,王宇田,李頌,田栢會,郝良玉,王玥,邵琳,卜思含,韓德明. 中國病原生物學雜志. 2018(12)
[2]核酸適配體在食源性致病菌檢測中應用的研究進展[J]. 胡金強,黃潤娜,王一,趙衛(wèi)東,高輝,姜春鵬,耿堯,景建洲,董彩文,王章存. 食品工業(yè)科技. 2019(09)
[3]基于熒光微球的免疫層析法結(jié)合免疫磁珠分離技術(shù)快速定量檢測鼠傷寒沙門氏菌[J]. 李倩茹,胡霏,楊悅熙,劉曉云,何小維. 現(xiàn)代食品科技. 2018(03)
[4]基于免疫磁球的埃博拉病毒糖蛋白高靈敏比色檢測[J]. 熊俊逸,胡姣,夏驪,龐代文,張志凌. 分析科學學報. 2017(05)
[5]基于全菌消減SELEX技術(shù)的體外篩選大腸埃希菌O157:H7適配體研究[J]. 許蕊,邱志剛,楊棟,金敏,劉偉麗,李君文,徐群英,袁兆康,諶志強. 環(huán)境與健康雜志. 2016(01)
[6]免疫磁珠富集鼠傷寒沙門氏菌條件的研究[J]. 朱海華,王永,王法云,周莉,王慧,邱紅玲,平洋,譚靜. 食品科技. 2015(08)
[7]免疫磁球捕獲-PCR檢測牛奶中金黃色葡萄球菌的研究[J]. 鄧奕,許迪莘,趙琳娜,楊寅. 食品工業(yè)科技. 2015(07)
[8]免疫磁珠法富集沙門氏菌的優(yōu)化及應用[J]. 山珊,牛瑞江,賴衛(wèi)華,劉道峰,魏華,熊勇華. 食品工業(yè)科技. 2013(13)
本文編號:3663156
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【文章目錄】:
材料與方法
1 材料
1.1 菌株
1.2 主要試劑
2 方法
2.1 細菌培養(yǎng)
2.2 捕獲磁珠的制備
2.3 適配體偶聯(lián)濃度的確定
2.4 捕獲磁珠與大腸埃希菌O157:
2.5 捕獲磁珠對不同濃度大腸埃希菌O157:H7的捕獲效率
2.6 捕獲磁珠對模擬樣品中大腸埃希菌O157:H7的檢測
結(jié)果
1最佳捕獲磁珠適配體濃度
2大腸埃希菌O157:H7同捕獲磁珠最佳孵育時間
3 捕獲磁珠對大腸埃希菌O157:H7的敏感性
4 模擬樣品檢測
討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]基于表面增強拉曼光譜法快速檢測細菌抗生素敏感性的研究[J]. 付世杰,李磊嬌,聶鑫,王習文,李志萍,曲晗,王宇田,李頌,田栢會,郝良玉,王玥,邵琳,卜思含,韓德明. 中國病原生物學雜志. 2018(12)
[2]核酸適配體在食源性致病菌檢測中應用的研究進展[J]. 胡金強,黃潤娜,王一,趙衛(wèi)東,高輝,姜春鵬,耿堯,景建洲,董彩文,王章存. 食品工業(yè)科技. 2019(09)
[3]基于熒光微球的免疫層析法結(jié)合免疫磁珠分離技術(shù)快速定量檢測鼠傷寒沙門氏菌[J]. 李倩茹,胡霏,楊悅熙,劉曉云,何小維. 現(xiàn)代食品科技. 2018(03)
[4]基于免疫磁球的埃博拉病毒糖蛋白高靈敏比色檢測[J]. 熊俊逸,胡姣,夏驪,龐代文,張志凌. 分析科學學報. 2017(05)
[5]基于全菌消減SELEX技術(shù)的體外篩選大腸埃希菌O157:H7適配體研究[J]. 許蕊,邱志剛,楊棟,金敏,劉偉麗,李君文,徐群英,袁兆康,諶志強. 環(huán)境與健康雜志. 2016(01)
[6]免疫磁珠富集鼠傷寒沙門氏菌條件的研究[J]. 朱海華,王永,王法云,周莉,王慧,邱紅玲,平洋,譚靜. 食品科技. 2015(08)
[7]免疫磁球捕獲-PCR檢測牛奶中金黃色葡萄球菌的研究[J]. 鄧奕,許迪莘,趙琳娜,楊寅. 食品工業(yè)科技. 2015(07)
[8]免疫磁珠法富集沙門氏菌的優(yōu)化及應用[J]. 山珊,牛瑞江,賴衛(wèi)華,劉道峰,魏華,熊勇華. 食品工業(yè)科技. 2013(13)
本文編號:3663156
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