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非洲綠猴IFITM3基因的克隆及其組織特異性表達(dá)差異

發(fā)布時間:2022-02-17 09:18
  目的為研究非洲綠猴(African green monkeys,AGM)干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白3(interferon-induced transmembrane protein,IFITMs)的功能,以及其發(fā)揮抗病毒作用的機(jī)制及作用方式,從非洲綠猴的不同組織器官中克隆了IFITM3基因,并對基因的表達(dá)特性進(jìn)行了分析。方法用RT-PCR方法從非洲綠猴的心、肝、肺、腎、腦等組織器官中克隆IFITM3的全長c DNA。用DNAMAN軟件比較不同物種來源IFITM3 c DNA的核苷酸差異,對AGM IFITM3的遺傳多樣性進(jìn)行分析;用實時熒光定量PCR(Real-time PCR)檢測了非洲綠猴各組織器官中IFITM3基因的表達(dá)情況;用病理學(xué)和免疫組化方法,檢測非洲綠猴不同組織器官中IFITM3蛋白的表達(dá)差異。結(jié)果非洲綠猴的淋巴細(xì)胞、皮膚、心臟、腦、肝、腎、肺和脾中均檢測到IFITM3的表達(dá),所獲IFITM3 c DNA大約為440 bp(442~448 bp),在基因進(jìn)化方面與獼猴的相似性達(dá)到93%。軟件預(yù)測AGM IFITM3蛋白含有高度保守的五個跨膜結(jié)構(gòu)域和特異性位點。Real-time... 

【文章來源】:中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2020,30(04)北大核心

【文章頁數(shù)】:8 頁

【文章目錄】:
1 材料和方法
    1.1 實驗動物
    1.2 主要試劑與儀器
    1.3 實驗方法
        1.3.1 引物設(shè)計
        1.3.2 總RNA、DNA提取與cDNA合成
        1.3.3 非洲綠猴IFITM3基因的克隆
        1.3.4 Real-time PCR檢測
        1.3.5 免疫組織化學(xué)方法檢測IFITM3蛋白的表達(dá)
    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 非洲綠猴IFITM3基因的克隆
    2.2 IFITM3基因序列分析
    2.3 IFITM3的氨基酸序列分析
    2.4 IFITM3的組織特異性表達(dá)
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]豬ifitm基因克隆及其序列和組織表達(dá)分析[J]. 張玉娟,趙婷,徐朝,于琨,馬倩,李超燕,鄭文明,許君.  河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2016(03)



本文編號:3629175

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