甲型流感病毒（InfluenzaAVirus）是分節(jié)段的單負(fù)鏈RNA病毒,能夠造成人類季節(jié)性流感流行和大流感爆發(fā)。我們知道,病毒在細(xì)胞中復(fù)制能力取決于病毒與宿主細(xì)胞之間的博弈能力,即體現(xiàn)在病毒與宿主因子相互作用的差異,特別是針對甲型流感病毒在宿主細(xì)胞核中進(jìn)行病毒基因組轉(zhuǎn)錄與復(fù)制,因此會有更多的宿主因子和病毒因子的相互作用來參與調(diào)控二者之間的博弈。為了篩選出潛在的宿主因子,我們以串聯(lián)親和純化系統(tǒng)（Tandem Affinity Purification Tag system,TAP-Tags）和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）相結(jié)合,以物理性的相互作用與功能性分析相結(jié)合,對病毒的主要8個病毒因子（PA,PB1,PB2,NP,M1,M2,NS1,NS2）與宿主因子間相互作用進(jìn)行篩選,我們共篩選到185個宿主因子。宿主因子的功能分析表明,這些宿主因子大部分參與RNA的加工、剪接和調(diào)控等過程,符合甲型流感病毒的復(fù)制特征。我們進(jìn)一步利用RNAi（RNA interference）技術(shù)篩查了27個綜合得分較高的宿主因子對甲型流感病毒復(fù)制的影響。結(jié)果顯示,具有正向調(diào)控病毒復(fù)制的宿主因子有10個... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市211工程院校985工程院校

【文章頁數(shù)】：106 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１甲型流感病毒流行時間線１３１??

病毒在細(xì)胞中復(fù)制的能力的高低取決于病毒與宿主因子相互作用及博弈的能力。??１．１．１甲型流感病毒的結(jié)構(gòu)和蛋白??甲型流感病毒是分節(jié)段的單負(fù)鏈ＲＮＡ病毒（圖１－２），具包膜，病毒基因??組大約１３．６Ｋｂ，它自身能夠編碼至少１１個關(guān)鍵蛋白（表１）。??Ｍ２??｜?ＨＡ??ｈａ?—?－?Ｍ１?ｌａｙｅｒ??ｌｉｐｉｄ?ｎａ??廣丨。ｐｅ?處分??ｖｉｒａｌ?ＲＮＡｓ??Ａ?ｃｏａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ＮＰ??圖１＿２甲型流感病毒結(jié)構(gòu)示意圖１１１??甲型流感病毒具有包膜，其包膜的主要成分為脂質(zhì)雙分子層，這部分主要來??自宿主細(xì)胞。當(dāng)病毒成熟時，病毒顆粒會在宿主細(xì)胞膜處聚集，然后以出芽的方??式連同宿主細(xì)胞的細(xì)胞膜一起釋放出來［１］。病毒包膜上有血凝素（Ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ，??ＨＡ）與神經(jīng)氨酸酶（Ｎｅｕｒａｍｉｎｉｄａｓｅ，ＮＡ）形成的刺突（Ｓｐｉｋｅ）。ＨＡ為三聚體，??在病毒吸附和侵入過程中發(fā)揮重要作用，是病毒毒力的衡量標(biāo)準(zhǔn)之一。它能夠與??宿主細(xì)胞膜上的唾液酸受體（Ｓｉａｌｉｃ?ａｃｉｄ?ｒｅｃｅｐｔｏｒ）結(jié)合介導(dǎo)病毒進(jìn)入細(xì)胞，并參??與隨之而來的病毒脫殼過程。另外

圖１ｎ］??


本文編號：3624244